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科研学霸天团，48小时有问必答

问wb跑蛋白条带糊了是什么原因呢？

dxy_a3w222q8

换个封闭液吧，这背景这么脏，不知道蛋白有没有降解

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问加了FBS的FACS缓冲液在室温放了两天，忘记放4度了有影响吗？

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问加了FBS的FACS缓冲液在室温放了两天，忘记放4度了有影响吗？

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问内参配平了之后，按照配平后的上样量跑完目的洗了之后再跑内参又不平了是为什么？

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问转膜一直转不上是什么原因？转完之后膜上的条带是飘逸的，之前都没出现过这样的情况

莫恨香消玉减

有几种可能：1,夹子没有夹紧2,转膜液温度太高3,转膜时间过长

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问WB目标蛋白位置偏下而内参蛋白位置基本正确是为什么呀

dxy_gp0fsbmr

可能是杂带建议把杂带切了再显影试试

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问用酶直接标计小鼠腹水做为检测抗体是否可行，会有什么影响？

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问qpcr里面的ck的cq值超过30是默认不表达嘛？一般怎么处理呀！qpcr要注意什么呀！最后做成什么样的图高级一点呢

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问标准蛋白质溶液浓度过低会怎样？

凌晨三点Dxy

可能会出现以下几个问题：1. **灵敏度降低*：Lowry法的灵敏度可能会受到影响，因为该方法的测定范围通常为1-10mg蛋白质。如果标准蛋白质溶液浓度过低，可能无法达到这个测定范围的下限，从而导致无法准确检测到样品中的蛋白质含量。2. **线性关系受影响*：Lowry法依赖于在一定浓度范围内，所形成蓝色的深浅与蛋白质含量之间的线性关系。如果标准蛋白质溶液浓度过低，这种线性关系可能会受到影响，

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问coip做两个蛋白的互作，为什么结果能检测到被A蛋白拉下来的B蛋白，却检测不到A蛋白？

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问Co-IP中条带奇怪

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问过表达稳转已验证，但标签抗体做IP杂不出标签本身的原因是什么

sw279

换抗体，或者直接用标签磁珠Anti-flag，Anti-myc磁珠这种

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问从公司买了过表达质粒，293-t能显示出flag，我的癌细胞pcr过表达趋势明显，但是wbflag死活跑不出来。求教！

sw279

用买的质粒做的转染吗？还是自己转化过的呢？我也有这个情况

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问慢病毒感染3T3细胞，请问病毒感染多久？多久后可以进行puro药筛？浓度大概是多少呢？

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问为什么wb条带有的多有的少？

瓜米2IHF

可考虑以下几点1转膜没加紧2样品没定量

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问角膜上皮细胞hcet怎么刺激才能高表达tlr4蛋白

88 围观

问各位大神，我这张图是怎么回事都是小黑点，这个位置应该出现目的蛋白的条带

88 围观

问用OPA法测量蛋白与多糖接枝度前需要将蛋白浓度都调为一致吗？

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问请问有没有会取小鼠背根神经节的大佬！求指导，求发视频啊😭😭😭😭😭😭😭

dxy_a3w222q8

你把脊柱旁边的肉弄干净，脊髓抽离，用剪刀沿中部剪开脊柱就可以看到背根神经节了。

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问folin酚试剂法测定蛋白质含量实验报告

凌晨三点Dxy

以下内容仅供参考：Folin酚试剂法，又称为Lowry法，是一种常用的蛋白质定量分析方法。该方法基于蛋白质与铜离子在碱性条件下的络合反应以及Folin-Ciocalteu试剂（一种含有磷钼酸和磷钨酸的还原剂）的还原反应，生成一种深蓝色的复合物，其吸光度与蛋白质浓度成正比。### 实验目的：通过Lowry法测定未知蛋白质样品的总蛋白质含量。### 实验原理：在碱性条件下，蛋白质与Cu^2+形成络合物

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