丁香通
丁香园
论坛
医药招聘
丁香医生
更多
调查派
用药助手
丁香搜索
医药数据库
来问医生
我要登录
|
免费注册
|
我的丁香通
企业机构:
成为企业机构
个人用户:
个人中心
移动端
搜实验
大家都在搜
大家都在搜
0 人通过求购买到了急需的产品
免费发布求购
搜索
发布求购
实验专区
实验库(10000+)
实验问答
实验专题
热门视频
前沿资讯
科研者之家
丁香通
>
实验专区
>
实验问答
>
蛋白质
实验问答
23,520,754 科研人在看
科研学霸天团,48小时有问必答
我要提问
全部
细胞
免疫
蛋白质
PCR
DNA
RNA
微生物
动物
遗传
生物信息
其他
问
TGF诱导HK-2,48h后细胞掉了,求大神指教
Eason老歌迷
如果要是正常组也死掉了,可能就是你细胞培养的问题,是不是培养基问题,或者是传代细胞老化了。
2 回答
234 围观
2 回答
234 围观
去回答
问
WB实验
Eason老歌迷
你这可能是非特异性条带,可以选一个特异性比较高的抗体,或者是你封闭时间久一点。
3 回答
540 围观
3 回答
540 围观
去回答
问
Co-IP 泛素化条带
Eason老歌迷
没有出现拖尾条带,而是单一条带,你是不是抗体用错了啊?至于泛素化质粒的构建你可以参看这篇文献,我也是按照这个方法来的“强制泛素化乙肝病毒核心抗原融合基因表达质粒的构建”
1 回答
4828 围观
1 回答
4828 围观
去回答
问
三次elisa结果均不一致,之前没有出现或者这样的情况,阳性越来越少是什么原因
Eason老歌迷
三次用的都是一批次的试剂吗?不同厂家的试剂一定不能混用,包括底物和洗涤液。由于校准标准有差异,还有抗体、检测方法、试剂、交叉反应等因素都会导致对样本的检测结果不一致。同时要注意试剂的批号和出厂日期,虽然试剂的有效期多为 1 年,但随着时间越长,试剂盒里的有效成分会有一定的衰减,尽量选择离出厂日期较近的试剂盒。
2 回答
350 围观
2 回答
350 围观
去回答
问
怎么验证一个信号通路
bamboopiggy
nfkb 必须要检测p65,IKKa,IKKb,IKBa 还有p50,别的你选着做。
4 回答
860 围观
4 回答
860 围观
去回答
问
请教:coip实验IgG组出现阳性结果是什么原因?
你好几和户
简单说anti-A的抗体由特异性的识别A蛋白的Fab片段和IgG片段组成。但是anti-A抗体有可能有非特异性结合,这些就是背景。而IgG的阴性对照的引入就是为了消除这个背景。如果实验结果正确,那么“实验组”的条带应该比“阴性对照组”亮很多。
2 回答
1667 围观
2 回答
1667 围观
去回答
问
蛋白质的免疫沉淀和Western Bloting检测磷酸化的问题?
冷泉港蛋白
如果你是想发现新的磷酸化位点,以基因P53为例,看下文献,它会告诉你怎么做如果你是研究已发现的磷酸化位点,厂家有相应的抗体可以购买。UNIprot 数据库显示了已发现的和预测的修饰位点,你可以看下。文献:Novel homeodomain-interacting protein kinase family member, HIPK4, phosphorylates human p53 at ser
3 回答
433 围观
3 回答
433 围观
去回答
问
请问抗体需要现定制,没有成品的,可靠吗?
Eason老歌迷
是的,我们实验室有几个抗体就是这样的,你只要找的公司靠谱就可靠。
3 回答
334 围观
3 回答
334 围观
去回答
问
提取患者标本RNA
illusio
1.用小量提取多处理几个样品,合并后浓缩一下,或者冻干浓缩一下;2.尝试强力裂解液CLB,并且加大处理量,比如加大10倍处理量,然后用几个基因组先清除后,把所有的上清加到一个吸附柱上去,就能提高浓度
3 回答
434 围观
3 回答
434 围观
去回答
问
跑胶拖带
whilt-shirt
有可能是模板出了问题导致没P出来
3 回答
302 围观
3 回答
302 围观
去回答
问
救助|本科科研萌新,纯化的蛋白大小与预期大小不符
冷泉港蛋白
有下面几个原因:1.如果是蛋白降解,在36KD应该有条带,你仔细观察下,看看有没有。比较下未诱导和诱导的差别2.可能是序列中间有终止密码子,你看下测序结果。3.这种分析,最好有图
3 回答
571 围观
3 回答
571 围观
去回答
问
20g小鼠眼球采血只有不到0.6ml 分离血清只有100ul多,请问有什么更好的采血方式呢?
Eason老歌迷
摘眼球取血,是大家常用的方法,简单、易操作,取血量大,当然缺点就是过于残忍还有就是心脏采,用1毫升的针管,也能采到将近1毫升,当然需要练练第三,可以麻醉了以后(用乙醚就可以),腹主动脉取,也用1毫升的针管子,采血量也很大。
3 回答
1236 围观
3 回答
1236 围观
去回答
问
什么是WB阳性对照?β-actin难道不是阳性对照吗?
whilt-shirt
阳性对照指的是肯定能够达到预期效果的刺激, β-actin只是内参
3 回答
1476 围观
3 回答
1476 围观
去回答
问
请问ELISA试剂盒检测MAC-T饥饿处理后的细胞培养上清,为什么无法计算出酪蛋白浓度?
illusio
对于目的蛋白浓度特别低的样本,可以尝试用高敏ELISA,但这也并不意味着一定能检测到样本浓度,只能说可以提高样本的可测率,并使结果更加可靠。因为通常用普通ELISA检测的样本OD值都偏低,而高敏ELISA可提高样本OD值,使之尽量位于标曲范围内,得到的数值也更加可信。
2 回答
192 围观
2 回答
192 围观
去回答
问
WB结果
bamboopiggy
1.分装时要混匀,2,你上样的枪尖可能有差异,3,胶配的有问题,4,转膜有问题。5,抗体加的不匀
6 回答
673 围观
6 回答
673 围观
去回答
问
【求助】WB的抗体--氨基酸末端抗原
Eason老歌迷
没啥影响,可以正常购买。你可以去一个专门对比抗体的网站查看,或者去文献里查看他们都用的什么类型的抗体。
3 回答
263 围观
3 回答
263 围观
去回答
问
融合蛋白提问
bamboopiggy
你最好是在n端连GFP或者则就是c端去掉跨膜区以后,连GFP,否则,GFP可能检测不到。
2 回答
399 围观
2 回答
399 围观
去回答
问
ip实验
冷泉港蛋白
你搜下,之前讨论过相关问题。涉及到蛋白互作研究的几个层次
3 回答
384 围观
3 回答
384 围观
去回答
问
酶联免疫试剂盒检测细胞培养上清中的酪蛋白浓度时,若样本中酪蛋白浓度太低,怎样将样本浓缩?
麻黄连翘赤小豆
蛋白浓度低一般都没办法浓缩吧,除非和蛋白浓度高的样本混合
3 回答
190 围观
3 回答
190 围观
去回答
问
磷酸化AKT WB实验复孔结果差异大
bamboopiggy
wb只要趋势一致就可以,不能要求量一定一样,因为跑胶,转膜,封抗体等,都会造成影响。
4 回答
724 围观
4 回答
724 围观
去回答
1
•••
101
102
103
104
105
•••
172
跳至
页
意见反馈
合作咨询
提问
扫一扫
实验小助手
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序