求助！养的胚胎干细胞老是分化怎么办？

环境不要变，保证营养供应，加入细胞因子

培养基配置比例可能需要调整一下，可以看一看这方面的文献。

考虑主要原因是：1.饲养层状态不好、密度不够以及原来的细胞已经分化；2.建议每次传代，让细胞差速贴壁沉降时间更长点，分化的干细胞会沉下去；3.也可以考虑采用KOSR，这样可以增加传代的代数；而且细胞接种不宜过密；饲养层需铺满铺匀。

有一些方法可以尽可能地延缓细胞的分化，包括以下几点：

培养基配方优化：合适的培养基配方对于维持细胞状态的稳定性非常重要。可以尝试不同的培养基配方，比较不同组分对细胞状态的影响。

细胞培养环境控制：细胞培养环境的控制对于细胞状态的维持也很重要。可以尝试控制培养温度、氧气浓度、CO2浓度等因素，以保持细胞在最适合的环境中生长。

细胞传代尽量减少：细胞的传代会增加细胞的分化风险，因此尽量减少传代的次数，可以延缓细胞的分化。

添加生长因子：添加一些生长因子可以帮助维持细胞状态的稳定性，例如FGF、LIF等。

需要注意的是，以上方法并不能完全避免细胞的分化，但可以尽可能地延缓细胞的分化，从而提高细胞利用率。同时，也建议在细胞培养中加入细胞状态检测方法，如形态学观察、基因表达水平检测等，及时发现并处理细胞分化问题。