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        难消化的新鲜组织提取出的RNA建库后QPCR不合格,有什么方法可以改善?

        相关实验:不同处理组织的方法对提取 RNA 产量的影响

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        LoMarlene

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        3 个回答

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        bamboopiggy

        有帮助

        1.将你的组织,直接放到trizo里,再进行剪碎。2.用液氮将组织冻住后,研钵内弄碎后,再加入trizol。3.买个组织提取rna的kit,可以试试。

        user-title

        府宅

        有帮助

        在RNA提取过程中凡是与RNA接触到的器皿都必须是RNase-free的,具体可通过以下两种方式获得:DEPC处理失活RNase:用含有DEPC的水浸泡实验器皿失活RNase,然后进行高温灭菌。

        或者直接购买RNase-free的实验耗材:适用于经费充足的实验室,放心可靠。图片描述

        user-title

        dxy_gwrp7ndq

        有帮助

        在收获组织及细胞死亡之后,应立即灭活内源的 RNA 酶,以防止 RNA 降解。

        1)用含离液(如胍盐)的细胞裂解液收获样品并立即匀浆。

        2)用液氮瞬间冻结样品。值得特别注意的是:组织块必须保证足够小,在浸入液氮的瞬间就能冻结,以确保瞬间令 RNA 酶失活

        3)立即将样品置于 RNAlater ? Tissue Collection : RNA Stabilization Solution 中。它是一种水相、无毒的收集试剂,能立即稳定并保护完整、未冻结的组织和细胞样品中的 RNA 。关键要点是组织样品切片一定要够薄(く0.5 cm ),这样 RNAlater 才能在 RNase 破坏 RNA 之前迅速渗入组织块中。

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