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        在CDNA加入量和体积不变的话,10ul体系SYBR Green多加0.5ul是否对CT值有显著影响,结果是否可用

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

        user-title

        地包天松鼠

        平常都做10ul体系的,今天的SYBR Green比平时多加了0.5ul,总体系变成10.5ul。

        CT值是开始DNA含量开始指数增加的循环次数,我的操作失误不影响CDNA的初始量,我觉得对最终结果应该没有影响,我的想法有问题吗,这次失误的结果还能用吗

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        6 个回答

        user-title

        是TTT

        有帮助

        多加0.5不会对CT值有显著影响,没关系的,结果可以用

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        如果在cDNA反应体系中多加了0.5 μl的SYBR Green,而总体系体积从10 μl变为10.5 μl,这个小误差通常不会对CT值产生显著影响,尤其是当你保持了cDNA的初始量不变时。

        CT值是反应开始阶段,荧光信号的指数增加循环次数,用于定量PCR(qPCR)的数据分析。在这种情况下,只是SYBR Green的体积稍微增加,而cDNA的初始量和体积保持不变。因此,理论上来说,你的初始DNA含量应该没有改变,所以CT值应该不会受到显著影响。

        然而,需要注意的是,这个小误差可能会在极少数样本中引入一些变异性。如果你的实验要求非常严格,或者需要准确的定量结果,建议重复实验并使用标准方法,确保实验操作的一致性和准确性。

        总的来说,根据你的描述,只有SYBR Green体积稍微多加了0.5 μl,而cDNA的初始量没有改变,你的实验结果应该是可用的,尤其是对于初步的数据分析和趋势观察。

        user-title

        dxy_mqg1dtg8

        有帮助

        应该问题不大,因为你计算的是样品相对于内参的相对值,SYBR Green加到了导致样品的Ct值变了,内参的相应也变了,所以可能计算结果影响不大。

        user-title

        z流沙z

        有帮助

        多了0.5ul没有太大影响,结果可以使用

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可以用,cdna不变的话,多加入0.5ul影响不大

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        对ct值可能影响不大,但是结果只能参考,不能引用,

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