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        做PCR心肌组织提取后测浓度时提示有胍的污染是什么原因?

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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        小鱼儿吐泡泡泡


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        3 个回答

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        土井挞克树

        有帮助

        清洗不彻底,要采用涡流清洗,保证洗涤彻底

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        balalaLy

        有帮助

        裂解液成分中有胍盐,加完氯仿离心取上清的时候没有分干净污染了

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        loveliufudan

        有帮助

        在进行PCR实验时,如果检测到DNA样本中存在胍类化合物的污染,可能会导致PCR反应的假阳性或假阴性结果,影响实验结果的准确性和可靠性。

        胍类化合物是一类强还原性化合物,常用于生化实验中的DNA和RNA提取中。这些化合物可以还原某些金属离子,如铜离子(Cu2+)和铁离子(Fe3+),使其变为活性离子(Cu+和Fe2+),并进一步与DNA或RNA中的核酸碱基结合,形成DNA或RNA-胍配合物。这些配合物在PCR反应中可能会被误认为是DNA或RNA,导致PCR反应结果不准确。

        胍类化合物的常见来源包括Tris-HCl缓冲液、EDTA(乙二胺四乙酸)、TE缓冲液等。因此,在进行DNA或RNA提取时,应该注意使用无胍的试剂和缓冲液,如Tris-HCl缓冲液的pH值应该在8.0以上,而不是7.4。此外,可以使用去胍剂(如β-巯基乙醇、二巯基甲酰胺等)去除样本中的胍类化合物污染,避免影响PCR反应的准确性和可靠性。

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