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        请问跑Qpcr时,内参基因跑不齐,但是目的基因可以跑齐是什么原因呢?

        相关实验:实时荧光定量 PCR(realtime PCR)

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        dxy_cehnw633


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        3 个回答

        user-title

        z流沙z

        有帮助

        内参基因齐是因为cDNA上样量可能差不多,而不齐就是因为上样量不一致,目的基因齐只是偶然,因为上样量本身就不一样,然后目的基因表达量还不一样。没有关系,只要跑的qpcr没有问题,都还是能计算出来。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可能是扩增效率不齐导致的,可以调整内参的稀释倍数

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        loveliufudan

        有帮助

        如果内参基因在不同样品中跑不齐,但目的基因可以跑齐,可能是由于以下原因:

        内参基因在所研究的生物学过程中会发生变化,导致其表达量在不同样品中存在差异。而目的基因的表达则受到其他因素的影响,与内参基因的变化不一定一致。

        实验操作中可能存在技术误差,例如RNA提取和反转录的效率、PCR反应的稳定性等,这些因素也可能导致内参基因的表达量存在差异,从而影响QPCR结果的准确性。

        在这种情况下,建议重新选择一个稳定的内参基因或采用多个内参基因进行校正,以确保QPCR结果的准确性。同时,还可以考虑进行实验操作的优化,减小技术误差的影响。

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