qpcr求助，溶解曲线双峰

这个基因做了第一次正式实验，发现80度那里提前出来一个峰，觉得是引物二聚体。条件不变，再做一次还是差不多这样。不知道这是不是真的就是引物二聚体还是其他原因？如果是应该改怎么改变反应条件才能不产生引物二聚体？

反应体系如下：10ul体系 95度30秒 95度5秒 59度30秒 40个循环

SYBR mix 5

FP 0.4

RP 0.4

H20 3.2

CDNA 1

引物二聚体，也可能是污染了，也可能是引物的非特异性扩增。可以做个温度梯度，或者试着提高退火温度可以降低引物二聚体。

是不是cdna被污染了。两次都这样的话，可能是模板的原因

有双峰，说明引物的特异性不好。每个峰值代表一个扩增产物。建议优化引物。