迟C迟
因为引物的延伸是从3′端开始的,3′端不要终止于密码子的第3位,尽量不要用T,因为密码子第3位易发生简并,会影响扩增的特异性与效率。
天一湖医者
因为PCR反应中是从引物的3‘端开始合成新DNA链的。所以新合成的DNA链中,原来的引物在5‘端,新加入的碱基在3‘端。
引物3’端为关键碱基,是PCR延伸的起始端,不能进行任何修饰,也不能形成二级结构的可能,一般3‘端也不能发生错配,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
秋秋欣欣
因为引物的延伸是从 3’ 端开始的
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