如何通过qpcr.测定基因敲除鼠基因的表达情况(主要是样品浓度不太一致)

收样品，然后提RNA，调整浓度，做逆转，然后跑qpcr，与内参值进行比较。其实你是基因敲除，做wb可能更能说明问题。

通过qpcr.测定基因敲除鼠基因的表达情况

在敲除的片段两端设计引物，扩增后电泳。理论上敲除成功的小鼠扩增出的片段大小=野生型小鼠的片段大小－敲除的片段大小，所以可通过电泳图的条带大小来进行鉴别，但实际上，若敲除的片段过大，有的酶是扩增不出来野生型片段的，比如有的酶，1.5K以下基本可以P出条带，大于1.5K的大部分是P不出的，所以当野生型的条带无法扩增时，这对引物就不能鉴定纯杂合了。