【扩增启动子】有时候同样的条件，第一次能扩增出来有单一明亮的条带，第二次就没有条带，这是什么原因呢？对于启动子扩增有什么建议吗？

没有条带的话，是不是操作过程中导致样本降解了

这个和扩增那一段没有啥相关性，主要是你扩增过程中是不是少加了什么东西，导致扩增不出来？

以前能够做出来，说明操作没有问题，反应体系也没有问题，但是后来做不出来，主要考虑两个因素：模板是否降解？dNTP是否出问题？

做pcr，要时刻记着这6个：模板，引物，taq酶，dNTP，mg2+，温度及其他条件控制。设计实验围绕的是这6个中心环节，而troubleshooting也要从这6个方面入手，一项项排查，孔的大小应该不会是造成条带问题的原因。建议你筛查一遍，从污染、操作顺序、加量多少等分别排查，是否有不当之处。