• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        PCR的阶段的作用为什么分这么多阶段 cDNA浓度的范围DNA/RNA比值。

        相关实验:定量PCR技术

        user-title

        一个小哭包

        wx-share
        分享

        3 个回答

        user-title

        Topmicro

        有帮助

        变性、退火、延伸需要不同的温度条件和反应时间所以分阶段进行。

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        因为pcr不是直接显示的dna的浓度,需要将dna进行扩增以后进行比较,所以分为变性 退火 延申三个阶段。至于cDNA,一般会用500ngRNA,反转为cDNA,为20ul,加水稀释到200ul作为模板来上样。

        user-title

        未来9

        有帮助

        PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成:

        1、模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;

        2、模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;

        3、延伸:DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。

        cDNA一般用的最多的是1-100ng/ul(工作浓度

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序