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        都说RNAi很容易降解,转染效率很低。一般采用什么策略和技术来防范呢?

        相关实验:RNA 的提取和纯化实验

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        丁香实验

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        1 个回答

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        丁香实验

        有帮助
        RNAi中,标准的非修饰的siRNA确实容易降解,这不仅在保存过程中,而且在转染过程中。 对siRNA的降解,可以合成修饰的双链siRNA,以提高合成中的稳定性,使用合成好的siRNA,尽量严格做到不要受RNA酶的污染。 对转染来说,因为要接触血清,培养基以及细胞内酶的作用。这时,好的转染试剂作用就显现出来了。要做到在血清中游离时,保护siRNA不受培养基中酶和蛋白的降解、吸附等影响,同时在进入细胞后不被溶酶体降解,并能释放到细胞质中。好的转染策略还不仅有保护的作用,更重要的是浓缩siRNA,不将细胞外的其他成分,特别是毒性成分,如抗生素、过多的蛋白带入细胞,以避免细胞产生毒性反应,毒性对RNAi实验来说,影响非常大。
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