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科研学霸天团，48小时有问必答

问求parkin引物序列？

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问PCR反应条件的三要素

珠海舒桐

PCR（聚合酶链反应）是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段。PCR反应条件的三要素通常指的是：1. 模板DNA：这是需要被扩增的DNA片段。它可以是基因组DNA、质粒DNA或任何其他形式的DNA。2. 引物（Primers）：这些是短的单链DNA片段，它们与目标DNA序列的两端互补，用于指导DNA聚合酶开始合成新的DNA链。3. 热稳定DNA聚合酶：最常见的是Taq聚合酶，它能够在PCR

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问RNase I的特点及使用方法？

珠海舒桐

RNase I 是一种核糖核酸内切酶，它来源于大肠杆菌，主要作用是降解单链RNA。以下是RNase I的一些特点和使用方法：RNase I 的特点：特异性：RNase I 能够特异性地降解单链RNA，在所有四个核苷酸（腺嘌呤、胞嘧啶、鸟嘌呤和尿嘧啶）后切割。热稳定性：RNase I 可以通过将样品加热至70°C来灭活，这使得它在实验中易于控制。广泛的应用：RNase I 在DNA纯化过程中用于降解

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问实验过程，流程，注意事项

珠海舒桐

等位基因特异性PCR（Allele-Specific PCR, AS-PCR）是一种用于检测特定等位基因的PCR方法，它通过设计特异性引物来区分不同的等位基因。以下是等位基因特异性PCR的实验流程、注意事项以及一些技巧：实验流程：引物设计：根据已知的等位基因突变，设计引物的3'末端在可能发生突变的位置。需要设计至少三条引物：两条分别含有待测DNA中突变位点的突变碱基及正常碱基，另一条为正常对侧引物

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问将二者测浓度后等摩尔数加入并使总量不超过 100 ng？

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问突然PCR扩不出来，但定量浓度很高

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问转录因子下游靶基因变化的检测时间

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问RPA产物怎么纯化？

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问46bp的条带要胶回收怎么跑清晰

221 围观

问各位老师，请问qPCR重复性的问题

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问还是达尔文前后文为球会

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问<u>aaasdddda?</u>

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问T4连接长了很多菌，但菌P不出来，只有引物二聚体

珠海舒桐

可能是转化效率比较低，可以多p几个菌。要是还没有，建议调整载体和插入片段的比例，重新连接转化

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问为什么PCR产物跑胶会降解?

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问PCR不同板子之间的CT值是否可以比较，如何进行板间校正？

huang282815

进行标准曲线的标定，且每版带上几个标准品进行一起实验即可进行板间矫正

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问同一个引物的溶解曲线不一样，是由于哪些原因引起的？

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问当有多条序列时，如何设计他们的共同引物，扩出编码区

208 围观

问请问各位老师，oligo7设计PCR引物时引物二聚体分析出现free 3’-end好吗？

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问qpcr试验内参基因ct值

dxy_w9d4ad89

第一个问题，你需要看你的内参基因差的多不多，差的多则需要换内参基因。第二个问题，确定内参基因没问题的话，目的基因在处理后Ct值低于未处理，说明被上调。

1 回答493 围观

问为什么rt-pcr有扩增曲线和融解曲线但是没有基因表达情况呢

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