• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        southern blot

        相关实验:Southern blot 实验

        user-title

        dxy_fxg4t9c9

        目前只有阳性质粒能杂交出来,maker有微弱的印记,样品完全没有,有人知道怎么回事嘛

        wx-share
        分享

        6 个回答

        user-title

        是TTT

        有帮助

        增加上样量、增加探针浓度、如果这两者增加了依然没有条带,那就要换一种探针试试

        user-title

        dxy_mqg1dtg8

        有帮助

        可能是样品浓度太低,或者样品DNA呗限制性内切酶完全切割,或者是探针的特异性不足。

        user-title

        dxy_fxg4t9c9user-title

        基因组DnA被完全酶切了,会怎么样啊,我是把一个载体插入到我的菌里,选的酶切位点是载体上有的,但是酶切位点不在探针的位置,

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        marker显示不理想建议提高dna上样量重复测量,大部分都是误差原因

        user-title

        沫子大大

        有帮助

        可能是样品中含有的目标序列太少或者不含有

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        如果在Southern Blot实验中只有阳性质粒能够成功杂交出印记,而maker只有微弱的印记,而样品完全没有杂交信号,可能存在以下几种可能的原因:

        1. 目标序列的拷贝数低:样品中的目标序列可能是低拷贝数的,即目标序列在基因组中的拷贝数非常有限。在这种情况下,杂交信号可能非常微弱,难以检测到。你可以尝试增加探针的浓度、增加杂交时间或使用更敏感的检测方法,以增加信号的强度。

        2. 样品预处理不当:样品的DNA可能没有被适当地处理,导致目标序列无法在Southern Blot实验中被成功检测到。确保你在样品处理过程中使用了适当的酶切酶、缓冲液和处理时间,并根据目标序列的特点进行优化。

        3. 样品DNA浓度不足:如果样品DNA的浓度过低,可能无法产生足够的信号来进行检测。确保你在实验中使用足够的样品DNA量,并考虑进行DNA扩增或浓缩来增加目标序列的浓度。

        4. 实验条件不合适:可能存在实验条件方面的问题,例如电泳条件、转移条件、杂交温度和时间等。请确保你使用的条件是适合你的目标序列和探针的,并进行优化。

        5. 引物或探针设计问题:如果你使用的引物或探针设计不合理,可能导致杂交信号的低强度或特异性不足。重新评估你的引物或探针设计,并确保其能够特异性地结合到目标序列上。

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        marker只有微弱的印记,是不是因为阳性质粒太带太明显,导致其它的显不出来?

        user-title

        dxy_fxg4t9c9user-title

        把阳性稀释了,条带很弱,可以杂交出来,但是样品还是不行

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序