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        lip3000脂质体转染问题?

        相关实验:脂质体介导的真核细胞转染实验

        user-title

        dxy_r8ysszr4

        1、某因子的真核过表达质粒在用lip3000转染到细胞过程中质粒的加入量怎么设梯度摸索呀?

        2、用无毒素质粒大提试剂盒提取的质粒用于转染,浓度和纯度最好是在什么范围内?

        根据lip3000说明书上写着加入DNA浓度的范围是0.5μg/μL,而本人大提的浓度为200ng/μL,能不能用?还是说浓度低可以多加几微升?

        3、lip3000转染试剂混合物250μL直接加到细胞中,也有先加点无血清培养基再加上转染试剂,这两种哪个转染效率高?

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        4 个回答

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        建议先加到无血清培养基再转染,成功率高

        user-title

        dxyc42u

        有帮助

        我们是先加无血清培养基再加上转染试剂效果挺好

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        lip3000转染试剂混合剂250uL直接加到细胞中其转染率更高,因为加无血清培养基再加上转染试剂可能导致转染率下降。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        1.对于真核过表达质粒的lip3000转染,加入的质粒量需要根据细胞类型、质粒大小、质粒浓度等因素进行优化。一般来说,可以进行梯度试验,尝试不同浓度的质粒进行转染,选择表达水平最佳的质粒浓度进行后续实验。

        2.对于用无毒泰质粒大提试剂盒提取的质粒,浓度和纯度越高越好。一般来说,建议将浓度调整至0.5ug/ul,可以尝试用纯水或无血清的培养基稀释到适当的浓度。如果浓度较低,可以考虑增加转染量或加长转染时间,以提高转染效率。

        3.直接将lip3000转染试剂混合物加到细胞中或先加点无血清培养基再加上转染试剂,两种方法效果差别不大。一般建议直接加到细胞中,以避免试剂在无血清培养基中的不均匀分布。但如果实验结果不理想,可以尝试两种方法比较,选择效果更好的方式。

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