蛋白表达不出来
dxy_z5a5ngg5
去年十二月找公司合了质粒并转了BL21甘油菌，iptg诱导表达很成功，但是从今年五月开始，同样的步骤跑胶发现目的蛋白不表达了，挑平板活化后诱导也是，求大佬帮忙分析指导一下，万分感谢！！
5 个回答
bamboopiggy
有帮助
先提一下质粒送测序，确定你的质粒还在
天一湖医者
有帮助
1.质粒是否成功转化到你的宿主菌。
2.改变诱导时机和诱导剂浓度,一般当OD值在0.5-0.6时较好。
3.也许蛋白已经表达,只是不是已可溶形式表达的。
4.也许是蛋白表达过低,SDS-PAGE不能发现。
balalaLy
有帮助
菌体的状态和诱导剂都会有关系，不同批次的诱导剂有时效果会差很多
府宅
有帮助
可能是有杂菌污染，导致蛋白表达不出
dxy_gwrp7ndq
有帮助
可能是高浓度IPTG会抑制蛋白表达，会生成包涵体
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