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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
做完转化后培养的菌(DH5a)长不大是什么原因啊?
我是金博士
建议你重新做,可以用氯化钙法制备,转化效率不错的。去年2月份的能转化出来还是很奇迹的。一般感受态最多3个月,都不保险。你这样长出来的菌是不正常的,不用纠结了,不要,重新做。
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问
质粒 DNA 比基因组 DNA 更大吗?
hexiabeibei8687
不是吧,细菌基因组怎么也有M级哦,质粒一般也就几K吧
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问
为什么经过酶切过后胶回收分子量变大了?
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问
DNA 纯化为何只说硅胶膜吸附法?
我是金博士
方法一是硅胶膜吸附法,方法二是离子交换住法,而磁珠吸附法已经不怎么用了。方法一适合去除一些杂带等,方法二则能纯化得比较彻底。你可能只看到方法1,没看到方法2哦。一般都建议方法2的。
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问
QPCR 时,取 DNA 的量应为多少?
dyyapple1985
做chip时,input 留做chromatin【预加抗体】的1/10,做q-PCR时,input 再1:10稀释,然后和抗体沉淀的DNA作对比
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问
为什么我的感受态制备不出来?
detaibio
影响大肠杆菌蛋白表达实验中,感受态细胞转化效率的因素及实际操作过程中应注意的事项:1.细菌的生长状态:实验中应密切注视细菌的生长状态和密度,尽量使用对数生长期的细胞(一般通过检测OD600来控制.DH5α菌株 OD600为 0.5 时细胞密度是 5 × 107/ml );2.所有操作均应在无菌条件和冰上进行;3.经 CaCl2处理的细胞,在低温条件下,一定的时间内转化率随时间的推移而增加, 24小
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问
植物免疫沉淀酶切的疑问
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问
FISH探针设计问题
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问
为什么我的pcr产物和载体连不上?
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问
抗体保存
alaling
看你本身抗体浓度如何,如果低的话就赶紧用吧,如果像二抗之类比较高的,放一两个月没什么问题
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问
为什么质粒DNA能在真核细胞里面表达?
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问
为什么我总是提取不到DNA?
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问
请问稳定转染稳定细胞系统构建的过程是什么样的?
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问
双酶切后的DNA去磷酸化处理时应该在酶切同时进行还是酶切后再进行去磷酸化处理?
我是金博士
在酶切后的,反应体系不一样的呢。
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问
CRISPR 构建点突变细胞系是杂合突变好还是纯合好?
dxy_g1lhlo40
这个不用纠结,你构建细胞系的时候,杂合子和纯合突变单克隆都是有一定概率能获得的,到时候你做实验的时候都保留,进行对比。这样实验数据就更有说服性
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问
AB抗体检测出来的条带为什么不在一个位置?
极客医生
因为最后跑的是变性胶 所以最大的可能是B比原来的位置小了 我第一直觉会test是不是降解了 A有助于稳定B 遏制B的降解 所以会跑出B的碎片,顺手验证一下就用同样的样load一个继续跑过 把小分子量的区域拉开 看在小分子量的区域能不找到另一部分B,如果B大了 就先矫正一下系统。
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问
琼脂糖凝胶电泳时,maker跑出来了,但是目的条带完全没有,怎么办
前置OTZ
RNA没提好,重来吧
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问
什么情况下转化平板上会出现卫星菌落?
李存耀
氨苄的抗菌效果的时间段在13-16个小时,一般转化后14个小时菌斑就能够满足接下来下面的实验要求了,菌斑直径在0.5mm左右,16小时后还在37℃下培养就会出现卫星菌
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