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        DC细胞的抗原提呈实验步骤?

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        Liaoyacong

        我是想做DC的抗原提呈功能,主要看DC在抗原提呈前与发生抗原提呈后DC细胞的相关变化,请问该怎么做?

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        3 个回答

        user-title

        周末也要努力呀

        有帮助

        DC细胞抗原提呈实验步骤如下:


        1. 培养和收集DC细胞:使用培养基(如RPMI 1640)培养DC细胞,通常使用骨髓源或外周血单个核细胞(PBMC)分离的细胞。收集细胞后,用PBS洗涤细胞。


        2. 处理抗原:选择合适的抗原,如蛋白质、多肽或细胞裂解物。将抗原处理成合适的浓度。


        3. 刺激DC细胞:将DC细胞与抗原共同培养。通常使用1-2μg/mL的抗原浓度。培养时间可以根据实验需要而定,一般为24-48小时。


        4. 收集细胞:将培养的DC细胞收集起来,用PBS洗涤细胞。


        5. 表面标记:使用适当的抗体标记DC细胞表面的抗原。常用的标记抗体有CD11c、CD80、CD86等。


        6. 流式细胞术:使用流式细胞仪对标记的细胞进行分析。通过检测细胞表面标记物的表达情况,可以评估DC细胞的抗原提呈能力。


        7. 数据分析:根据流式细胞术的结果,分析DC细胞的抗原提呈能力。可以比较不同处理组的细胞表面标记物表达水平,评估抗原提呈的效果。



        user-title

        高山云初

        有帮助

        1、将人单核细胞加入DC-GROW培养基中混匀,培养得到溶液A

        2、取溶液A,调节温度至36-38℃,孵育3.5-4.5h,除去非粘附细胞,向粘附细胞中加入培养基,继续孵育,至有细胞集落生成时,加入肽库得到溶液B;继续孵育23-25h得到负载抗原未成熟DC细胞溶液

        user-title

        Liaoyaconguser-title

        您好,我做的是C57来源的BMDC,请问该怎么做?需要用抗原肽吗?

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        S1、将人单核细胞加入DC-GROW培养基中混匀,培养得到溶液A;

        S2、取S1中得到的溶液A,调节温度至36-38℃,孵育3.5-4.5h,除去非粘附细胞,向粘附细胞中加入培养基,继续孵育,至有细胞集落生成时,加入肽库得到溶液B;继续孵育23-25h得到负载抗原未成熟DC细胞溶液;

        S3、取S2中得到的负载抗原未成熟DC细胞溶液

        user-title

        Liaoyaconguser-title

        您好,能够具体点吗?或者告诉我相关文献也可以

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