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        有何种方法可以证明TLR4受体可以识别PGN?

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        dxy_us0dqq99

        目前已经获得了TLR4的基因全长,也构建了对应的绿色和红色荧光标签蛋白质粒,想探究TLR4是否可以识别PGN,一直找不到合适的方法,求各位给点建议,实在交不出研究方案了

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        3 个回答

        user-title

        周末也要努力呀

        有帮助


        1. 细胞系实验:使用TLR4表达的细胞系(如HEK293T/TLR4细胞)和对照细胞系(如HEK293T/空白细胞)进行实验。将PGN添加到细胞培养基中,观察TLR4细胞系是否产生细胞因子(如TNF-α、IL-6等)的释放,而对照细胞系则不产生。这表明TLR4受体能够识别PGN并触发细胞信号通路。


        2. RNA或蛋白质水平的检测:使用实时定量PCR或免疫印迹等技术,检测TLR4基因或蛋白质的表达水平。在添加PGN后,如果TLR4基因或蛋白质的表达水平显著

        user-title

        dxy_us0dqq99user-title

        非常感谢你的解答,pgn刺激细胞后,定量结果显示TLR4表达上升,因此想在蛋白水平做pull down或者其他实验验证,pull down应该做不了 没有相关的磁珠,不知道还有其他实验可以验证吗?

        user-title

        高山云初

        有帮助

        可以尝试用PCR-SSCP方法来证明TLR4受体能够识别pgn。

        user-title

        dxy_us0dqq99user-title

        可以再稍微具体一点吗,谢谢了🙏

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        用PCR-SSCP方法来证明TLR4受体能够识别pgn。

        user-title

        dxy_us0dqq99user-title

        我要先购买肽聚糖pgn这个东西 再加到pcr产物里吗,可以详细的讲解一下吗,谢谢啦

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