分泌性蛋白超滤浓缩后做WB

你好！问一下，最后选取什么蛋白做内参了？

可以将体积浓缩至20倍以下，再定量到同一体积。需要外泌体内参。是用BCA检测，检测不到可能是因为标准液的浓度不匹配，建议对浓缩后的蛋白进行小体积稀释，可以多测几个稀释度的浓度定量更准

增加裂解时间，或者超声彻底断裂。同时检查一下裂解液成分和loading是否变质

蛋白浓度太高的原因，而你加的是5 loading buffer，SDS的浓度不够高。你可以把样品稀释一下试试，就好了。

那是有DNA断裂，超声试一下。