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        如何诱导HK2细胞衰老?

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        赛尔吉奥拉莫斯

        本人在做肾脏衰老方面研究,目前想用HK2细胞诱导细胞衰老,之前用过tBHP处理4h后换液,然后等24-48h染sa-beta-gal,虽然能染上,但比较浅,但是像p16 p53 p21等蛋白没有趋势,各位大神们有没有更好的建议呢? 目前想用d-gal去诱导,有没有试过的请指路,谢谢!

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        5 个回答

        user-title

        南京中科世康生物

        有帮助

        组合使用多种诱导剂 为了获得更强的细胞衰老效果,

        可以组合使用多种诱导剂。例如,可以同时使用D-半乳糖和tBHP,

        或者结合其他氧化应激诱导剂(如H2O2)和基因干扰技术来诱导HK2细胞衰老。

        这种组合方法可能有助于增强细胞的老化程度,

        从而更好地评估老化标志物和细胞衰老的机制。

        user-title

        dxy_c5z56e7

        有帮助

        您好,请问您做出来了吗,我也做此方向,想向您交流请教一下

        user-title

        汤姆卜丽波

        有帮助

        看过一个文章是这样做的,

        细胞分为对照组,5、10、20、40、80和100g/lD-gal组,并设空白组,各组设置6个平行复孔,D-gal组分别处理6、12、24和48h然后测增值

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        针对诱导细胞衰老的方法,您可以尝试以下建议:

        使用D-galactose:D-galactose是一种葡萄糖代谢产物,已被证明可以诱导细胞衰老。您可以通过在培养基中添加D-galactose来诱导HK2细胞衰老。具体方法可以在细胞培养基中加入不同浓度的D-galactose,然后进行一定时间的培养,最后检测细胞的老化程度。

        使用较长时间的tBHP处理:您可以尝试使用较长时间的tBHP处理,比如24h或更长时间,以增强细胞的衰老程度。此外,您可以在tBHP处理前和处理后分别进行细胞活力和老化标志物的检测,以确认tBHP处理的效果。

        组合使用多种诱导剂:您可以使用多种不同的诱导剂组合,如D-galactose、tBHP、氧化应激剂等,来诱导HK2细胞衰老。这样有助于增强细胞的老化程度,从而更好地评估老化标志物。

        user-title

        赛尔吉奥拉莫斯user-title

        您说的组合试剂有没有具体方法呢?想拿来参考一下,比如细胞系、代数、药物处理方法等

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        用过tBHP处理的话需要延长处理时间,6h后换液,然后等24-48h再染。用Dgal的话一般处理4h左右,效果好一些

        user-title

        赛尔吉奥拉莫斯user-title

        请问您用的是什么细胞系啊?如果是hk2的话用的话有没有记代数呢?我用的hk2传代多了会有好多异形性细胞,对药物浓度反应都不太一样,您说的那个方法我也用过不知道是不是细胞原因做不出来

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