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        AKTA纯化蛋白所用的缓冲液A、B液和脱盐液请问配方是什么

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        dxy_5dq7x910


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        2 个回答

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        loveliufudan

        有帮助

        缓冲液A和缓冲液B的具体配方以及脱盐液的配方取决于你的纯化策略和目标蛋白质的特性。以下是一些常见的配方:

        1.离子交换层析:

        缓冲液A(低离子强度缓冲液):

        20 mM Tris-HCl,pH 8.0

        缓冲液B(高离子强度缓冲液):

        20 mM Tris-HCl,pH 8.0

        1 M NaCl

        脱盐液(用于对蛋白进行脱盐):

        20 mM Tris-HCl,pH 8.0

        2.亲和层析(如Ni-NTA层析):

        缓冲液A(结合缓冲液/洗涤缓冲液):

        20 mM Tris-HCl,pH 8.0

        500 mM NaCl

        20 mM Imidazole

        缓冲液B(洗脱缓冲液):

        20 mM Tris-HCl,pH 8.0

        500 mM NaCl

        250-500 mM Imidazole

        脱盐液(用于对蛋白进行脱盐):

        20 mM Tris-HCl,pH 8.0

        请注意,这些配方仅作为参考。你需要根据你的目标蛋白质以及纯化策略来调整缓冲液的配方。例如,你可能需要调整缓冲液的pH、离子强度或者添加其他试剂(如还原剂、保护剂等)。在进行实验前,请确保详细了解目标蛋白质的特性以及相应纯化策略的要求。

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        土井挞克树

        有帮助

        AKTA的脱盐缓冲液用的是柠檬酸缓冲液,配方是将柠檬酸配成0.1M的母液,磷酸氢二钠都配成0.2M母液,之后柠檬酸加9.7ml,磷酸氢二钠加10.3ml,然后再稀释。然后配合PH计进行微调。

         

         

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