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        培养秀丽隐杆线虫做寿命分析,大家都是添加多少浓度的5-FU,抑制卵的发育的,做实验卵会孵化影响实验结果,求助!

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        努力搬砖的小凡


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        4 个回答

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        huarenqiang5

        有帮助

        5-FU浓度在19.6 mg时就有抑制作用,随着浓度的加大其抑制作用也随着增加。

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        loveliufudan

        有帮助

        通常浓度会因实验设计和不同实验室的习惯而有所不同,一般的浓度在50-200 μM之间。需要注意的是,过高的浓度可能会对线虫的寿命产生毒性影响,而过低的浓度可能会对卵的抑制效果不佳。因此,最好是在实验开始前通过小规模试验来确定最适宜的浓度。

        另外,在添加5-FU时,需要注意的是尽可能选择在卵发育阶段添加药物,以避免卵的孵化影响实验结果。一些实验室通常在线虫L1期(即孵化后第一天)添加药物,以抑制卵的发育。

        关于培养基的选择,一般使用NGM(Nematode Growth Medium)培养基,该培养基中不含脂肪酸、胆固醇等物质,可以减少对线虫脂肪代谢的影响。在培养基中添加10-20 g/L 的葡萄糖可以维持线虫的生长和繁殖。常见的实验器材为96孔板或24孔板。至于平行实验组的数量,需要根据实验设计和统计学原则来决定,一般建议不少于三组。

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        土井挞克树

        有帮助

        一般10-50ug的剂量就足够了。

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        努力搬砖的小凡user-title

        想请教一下,加入的时候是配置好一定的5-FU母液,等到培养基温度较低时加入是吧?您一般会配置多少浓度的母液呢?还是有其它加入方法,从而保证无菌。

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        sswei

        有帮助

        5-Fu按照至少50mg/kg/天添加,会抑制卵的发育。

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