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        crispr慢病毒文库感染细胞,为什么选择0.3MOI,是怎么推导出来的?

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        juyue2010


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        3 个回答

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        土井挞克树

        有帮助

        0.3的时候是病毒和细胞的最佳结合状态,推导过程一般是设置梯度实验验证得到的。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        以MOI为0.3的剂量感染2×107个A549-Cas9细胞,相当于6×106细胞被感染,也就是文库中的每种sgRNA会被整合到>1000个细胞中。

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        在进行CRISPR慢病毒文库感染细胞时,病毒感染的复杂性和效率会受到多个因素的影响,例如病毒滴度、细胞接种密度、病毒感染时间、病毒与细胞之间的相互作用等。因此,在进行感染实验时,需要对病毒感染条件进行优化,以提高感染效率和减少毒性。

        一般来说,病毒感染复杂性的最小要求是,每个细胞至少被感染一个病毒颗粒。因此,可以根据细胞数量和病毒滴度,计算出需要使用多少病毒颗粒,以达到每个细胞至少被感染一个病毒颗粒的效果。

        例如,如果使用的是0.3 MOI(Multiplicity of Infection),表示每个细胞会被感染0.3个病毒颗粒,因此需要使用的病毒数量就是:病毒数量 = 细胞数量 × 0.3。在实际操作中,可以根据细胞接种密度、病毒滴度等因素进行适当调整,以获得最佳的感染效果。需要注意的是,病毒感染过程中,过高的MOI可能会导致细胞毒性增加,而过低的MOI可能会影响病毒感染效率,因此需要进行实验优化和对照实验,以确定最适宜的感染条件。

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