关于植物悬浮培养的几个问题

已巳己

2022-05-29

第一次做植物细胞悬浮，有点不明白有些实验步骤应该怎么做，目前遇到的问题如下，请大家解答一下，非常感谢！！

细胞悬浮时，过滤细胞的话，大家都用的什么过滤装置呀？我们选用的是40目和400目的镍网，但是不知道镍网使用的具体操作步骤，可以采取镍网➕漏斗的这种组合吗？或者有其他的用法？我们还考虑过针筒式过滤器？哪种好一点？或者有没有其他的推荐呢？
镍网的灭菌以及后续的清洗是怎样操作的？
在培养基的选用方面有什么建议吗？
怎样判断继代的时间点？（是取样然后显微镜镜检吗？）
继代时是静置好还是离心好一点？
在称量愈伤组织的时候怎么称量？（意思就是，愈伤组织是无菌状态的，需要怎么称量，是将它从培养基中取出来称量吗？那接种到液体培养基时需要灭菌吗？或者还有其他什么方法呢？）
还想问一下，微孔滤膜是高压蒸汽灭菌的吗？

目前就这些了，因为第一次做细胞方面的实验，有很多操作性的东西不是很清楚，看文献也大多都是结果或者技术路线，在操作方面没有说明（也可能是我看的文献或者相关资料不足）。

希望大家能解答一下，真的非常感谢！！！

迟C迟

2022-05-31

有帮助

2、细胞悬浮过滤我们直接用一次性的细胞筛，不用高压灭菌处理。3.在培养基选进口的，实测好用。4.显微镜镜检细胞完整无破碎，生长良好可继代。5.继代培养需要以非常慢的速度摇晃培养。6.首先愈伤组织接种到液体培养基时肯定不能灭菌，灭菌不就死亡了吗。把称量仪先用酒精擦拭，再放在超净台灭菌，在超净台里称愈伤组织。7.微孔滤膜买一次性的，不用高压蒸汽灭菌。