用酶标仪96孔板测细胞活性氧

消化细胞并计数，每孔种10000个细胞，每个处理3-5个复孔。

细胞密度约80%时，实验组加药培养6h，对照组DMSO处理。

配置探针孵育工作液：避光操作，用培养基稀释探针，终浓度10μM。

吸掉旧培养基，PBS洗细胞一次。

避光操作，每孔加入100μl探针工作液，37℃培养箱孵育20min。

弃掉探针孵育工作液，PBS温和地洗1次，然后各孔加入100μl培养基。

在荧光酶标仪上检测荧光强度，保存数据。

之后需要检测CCK-8的操作步骤（检测细胞数量）

配置CCK-8检测工作液，每孔100μl工作液，额外加3个空白孔blank，孵育1h后去检测OD450的值。

荧光强度与总细胞数的比值就是相对ROS水平。

计算方法：ROS的检测值/对应孔CCK-8的检测值。

分析各组ROS水平的差异。 作者：超超Tracy https://www.bilibili.com/read/cv10854756?ivk_sa=1024320u 出处：bilibili

有空白对照组，所有数值和空白对照组比一下就可以。

检测CCK-8的操作步骤（检测细胞数量）

配置CCK-8检测工作液，每孔100μl工作液，额外加3个空白孔blank，孵育1h后去检测OD450的值。

荧光强度与总细胞数的比值就是相对ROS水平。

计算方法：ROS的检测值/对应孔CCK-8的检测值。

分析各组ROS水平的差异。