实验问答22,853,502 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问请问如何确定药物作用于细胞的靶蛋白是什么？脂溶性很差的药物能通过细胞膜吗？

天一湖医者

.高通量筛选的方法用微量滴定之类的方法,看分子能否与已知的蛋白质结合。一般只做计算机算出来的特定蛋白质

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问植物外泌体或者细胞外囊泡如何提取蛋白质

bamboopiggy

建议你直接买个外泌体蛋白提取的试剂盒吧，都做到这么个份上了，不怕花钱补充一下：thermo有个kit，可以直接提取外泌体得RNA和蛋白质，说明如下：总外泌体 RNA 和蛋白分离试剂盒设计用于从预分离的或富集外泌体中分离 RNA 和蛋白（未提供）。其适用于 RNA 表达（具体为 miRNA）、处理或功能研究。该试剂盒能够回收相同纯化外泌体制备物中的 RNA 和蛋白。其中一部分样品经过有机提取，然后在

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问各位大神救命！帮我看看这是什么污染？应该如何防治？

bamboopiggy

感觉你还是重新提吧，这个是细胞间常见的真菌污染，感觉很难清除掉。再提的时候，注意无菌操作

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问请问小鼠AWR测定的球囊如何制作

bamboopiggy

自制结直肠扩张球囊 (简称球囊)：一次性保鲜袋用塑封机制成长2 cm，直径0.8 cm，一端封闭的圆柱形球囊，输液导管插入球囊中，导管与开口端用丝线结扎，确保密封不漏气。测量时将球囊插入小鼠肛门，深度为球囊结扎线距肛门括约肌大约0.5 cm处，用胶带轻轻将外端导管固定在小鼠尾巴上，以防球囊在实验过程中滑出。导管通过三通管一端与血压计相连，一端连接注射器。小鼠在实验前12 h禁食不禁水。将小鼠放置在

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问请问怎么研究药物作用于细胞的方式是通过膜表面受体发挥作用还是进入细胞里面的呢？

bamboopiggy

你可不可以在你的药物上加上一个示踪的蛋白，然后confocal照一下就可以。

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问脑细胞提取，如何避免污染

天一湖医者

1、从培养箱取放细胞前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。培养瓶放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。2、操作的时候防护服、口罩、手套缺一不可。操作前，准备好所有实验所需物品，以减少走动，物品需有序摆放在超净台触手可及的地方，同时空留足够操作空间。3、操作时，试剂不用尽量及时盖上盖子，移至操作区外围，尽量不要从开口容器上经过。

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问Fe3O4@Au核壳结构可见吸收峰怎么调控红移

未来9

纳米复合粒子粒径的增大和分散介质离子强度的增高, 可以使最大吸收峰发生红移, 并出现峰形展宽的情况.

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问纤维素、半纤维素和木质素之间有没有什么含量关系？

天一湖医者

　　没有什么关系。纤维素（cellulose）是由葡萄糖组成的大分子多糖。不溶于水及一般有机溶剂。是植物细胞壁的主要成分。纤维素是自然界中分布最广、含量最多的一种多糖，占植物界碳含量的50%以上。棉花的纤维素含量接近100%，为天然的最纯纤维素来源。一般木材中，纤维素占40～50%，还有10～30%的半纤维素和20～30%的木质素。　　半纤维素(hemicellulose)：是由几种不同类型的单糖

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问在同种质粒上插入不同基因，比较这些基因的表达量，质粒转染时按等质量算，还是按等拷贝数算呢？

bamboopiggy

因为你要比较的不同基因的表达量，所以要在同一个级别比较，需要按照拷贝数来计算，不能按照质量算了

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问制作的细胞成长曲线没有到达平台期是因什么原因？

天一湖医者

有以下原因：一是细胞接种密度过低；二是细胞培育时刻过短；三是细胞成长状况欠好，使其不能正常增殖。

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问.细胞成长曲线还有其他办法制作吗？

bamboopiggy

你可以用exel做，也可以用spss，graphpad做，都可以啊

3 回答331 围观

问HepG2细胞裸鼠成瘤

ChaunceyMu

加matrigel，这个成瘤是很慢的，需要生长20几天后才会慢慢长起来，长起来以后就跟正常肿瘤一样的生长速度了。我们用的是NSG小鼠

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问用NBS溴代苯环上的甲基需要反应多长时间，只要溴代上就行

天一湖医者

用NBS溴代苯环上的甲基一般反应时间为5小时。

1 回答1056 围观

问小鼠经氯化钙救治后反应

天一湖医者

氯化钙有强烈的刺激性，静脉注射时如漏出血管外，可引起组织坏死。静脉注射治疗剂量，不会有什么症状。只是疼痛。小鼠会叫起来、会反抗。

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问hela细胞培养或转染后出现浑浊，放大可见小的颗粒。尝试加大二抗的量，加三抗等方法都没什么效果。求解答，谢谢~

天一湖医者

细菌污染一般培养2－3天后能看到培养液明显混浊，镜下也能看到密布的细菌颗粒，你这个看上去也有可能是支原体污染，可以在培养液里加环丙沙星试试，100ml培养液里加1mg环丙沙星。

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问293T细胞出现如图线状物质，会随时间逐渐增多，影响细胞生长。求解决或者预防方法。谢谢

bamboopiggy

换好一点的血清试试，293t还是比较娇气的，血清不好，状态会差

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问请问各位，国产的CD45磁珠去除白细胞有效果比较好的吗？

一个小哭包

在血液中捕获和富集CTC细胞的方法是利用CD45免疫磁珠结合表达CD45抗原的白细胞，进行磁分离去除白细胞，此法可将去除大部分表达CD45的淋巴细胞，并将全部类型的CTCs富集分选出来。但是剩余的白细胞包括粒细胞(CD15抗原)和单核细胞(CD14抗原)还存在，剩余的细胞中仅能获得0.01％～1％的CTCs。

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问基因测序的标本如何保存

一个小哭包

1. 植物组织：植物组织一般要求重量大于 4g。首先我们要准备好液氮预冷的无酶管，并做好取样器械的消毒和去RNA酶处理，尽量选取新鲜幼嫩、生长旺盛部位的样本进行迅速采集，然后用RNase-free水对样品表面进行快速的清洗，吸干表面液体之后放入无酶管中液氮速冻（时间不要太短哦），待彻底冷冻后，转移至-80℃冰箱保存。2. 动物组织：送样的重量一般要求在 2g以上。若在实验室中取样，做好器械的消毒和

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问his标签纯化目的蛋白跑胶呈现出拖尾的现象同一个胶其他样则不这样原因是什么呢？

bamboopiggy

感觉是你纯化蛋白上样浓度有点大，所以才出现了拖尾。

3 回答1805 围观

问成球实验培养的细胞球可以冻起来么

bamboopiggy

你最好把细胞球弄成单细胞悬液再冻起来，否则会损伤细胞球中间的细胞的。

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