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科研学霸天团，48小时有问必答
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问
蛋白分子量标准品200kD的条带经常分层，如何解决呢？
whilt-shirt
选用浓度更低的胶，比如8%或者6%，marker选10-250kd
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问
DNA检测时，蛋白消化效果怎么评估？
天一湖医者
对消化后的蛋白残留量进行评价WB比较好。
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问
树突状细胞的流式细胞分析
bamboopiggy
你如果没有做过，最好找平台的老师帮你弄，做好阴性对照。阴性对照和阳性结果之间会有很明显的差异的。
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问
NC 膜 PVDF 膜 尼龙膜的差异。
天一湖医者
NC膜只可以和单链rna.dna在高盐条件下结合，与dna分子非共价键结合，易丢失dna.而且NC膜很脆，易断，不能反复使用，优点是对探针和蛋白质吸附作用较弱，杂交信号本底低。尼龙膜可以与单链及双键多核苷酸链结合，与DNA共价键结合，可以反复利用10到20次，膜强度高，不易破坏，优点是可以重复使用，碱可以促进DNA与尼龙膜的结合。
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问
紧急求救 流式测凋亡
balalaLy
细胞太密会影响药物的效果，建议还是重新铺板吧
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问
MCAO小鼠模型求助
sunny陈520
这个的确不好做，而且死亡率也高，不过多练习也可以的，以前做的时候用的是那种鱼线，很细，插进去的那端平口剪成斜口会好进去点哦
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问
流式细胞摄取实验数据大神指点怎么处理啊？跪求各位
Eason老歌迷
有没有使用补偿算法和归一算法对原始数据进行处理啊
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问
miRNA minics和质粒进行共转染？
Eason老歌迷
理论上共转染的时候minics和质粒可以分别用不同的转染试剂进行转染。但是我没有试过这种方法。
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问
温敏质粒pset4s敲除链球菌基因时，升高温度，质粒也无法丢失，始终处于单交换的状态。
372 围观
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问
有没有是血红素诱导的下游基因产生色素的基因开关呢？
367 围观
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问
如何查找自己需要的基因开关
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问
为什么蛋白纯化后分子量变小了？
Eason老歌迷
这个属于正常，纯化后有洗脱，浓度更纯，可能分子量就变小了。
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问
转染有些细胞能转进有些细胞转不进
bamboopiggy
建议你配成mix以后，同时转hela和293看看，是不是因为质粒的原因，还是你在配置mix过程中，有遗漏
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问
膜蛋白的提取以及如何做IP？
dxy_c1z3mp3
取决于蛋白特性，具体蛋白具体分析，tween triton sds 尿素，另与之相互作用的蛋白是可溶不可溶都需要考虑，高盐变性是否会影响其蛋白互作结果，另也可以考虑全长中的亲水片段
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问
小鼠合笼两个月还没有怀孕，怎么处理
whilt-shirt
可以换新的种鼠或者喂养鸡蛋生瓜子增加小鼠营养
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问
小鼠MCAO行为学评分
天一湖医者
adhesive removing的胶带选择3M的就可以。
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问
转录组学求助
yanlai000
那就网络药理学的思路么：找一个中药复方确定靶标，然后分析疾病的转录组学确定疾病genes，二者取交集找到中药对疾病的靶标，然后分子对接准确预约靶标。
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问
跑wb的时候条带总是不完美 笑脸😊一样的条带怎么回事
balalaLy
page胶凝的不好，或者是样品中有杂质
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问
体外磷酸化反应，如果底物蛋白有磷酸化状态的话，加了激酶和不加激酶看不出差别怎么办？
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问
动物随机分组简便操作？
sophomore
先打耳标，记好每只动物编号，用excel或spss软件参照随机数模型建立个随机数分组就行。
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