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科研学霸天团,48小时有问必答
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流式细胞术
汤姆卜丽波
看你想要投稿的杂志对图有什么要求,按照要求来,对机器出的图进行标注就可以了,三组重复趋势一直的话选最有代表性的
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问
动物行为学的数据分析方法
汤姆卜丽波
这个需要你自己统计根据时间频率制表,然后统计软件进行相关性分析
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问
想问一下293t产生的病毒可以感染293t细胞嘛?是否是病毒滴度不够
汤姆卜丽波
这个应该不行吧,就算是可以感染应该也不会对细胞本身造成影响啊
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问
想探究动物体内某mRNA的半衰期,可以注射放线菌素D来抑制转录,再在不同时间点测定mRNA含量吗?
bamboopiggy
这个实验你最好用细胞来做,放线菌素D,在体内的作用浓度,尤其是你要取得那个部位,可能不好确定。
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问
C57BL/6小鼠皮下成瘤失败
bamboopiggy
可能是你细胞的状态不好,你放了多长时间去打的,再就是double check你算的细胞的浓度没有问题,我以前算错过一个数量级,结果在double check的时候发现了。
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问
双荧光素酶报告基因实验,研究miRNA与靶基因互作时,转染的miRNA的量与质粒的量如何确定,以及二者的比例有一个推荐值吗?
bamboopiggy
这个你只能自己做预实验来摸,每个的条件可能都不一样。
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问
求助 为什么SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色后再脱色条带就没有了
Eason老歌迷
可能是你上样量太低了,能染上色,但是脱完色就看不到条带。如果上样量过低,造成每条条带的蛋白量都在2ng以下,自然看不到任何条带。你需要重新对蛋白样品进行定量,如果定量无误,需要增加蛋白上样量。
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问
为什么我跑PCR的空白和对照在100bp附近都有有一条清晰明亮的条带,而且感觉不是引物二聚体
申东熙老伯
空白对照都有应该是污染,考虑一下是不是水污染了。
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问
油红O染色
bamboopiggy
MDA-231是乳腺癌细胞系,你是怎么处理了以后,要染油红O?这个你最好设一个可以染出来的阳性对照,否则,不好说。
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小鼠血糖超过血糖仪上限
Eason老歌迷
如果血糖值超过了上限,那就换一台机器,换一台能测出具体血糖数值的。
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请问小鼠淋巴结流式细胞数不够怎么办
Eason老歌迷
一只小鼠不够,那就做实验的时候,每组多分几个小鼠即可。
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问
18sRNA内参基因CT值大概多少正常
汤姆卜丽波
差不多,13,14,我们一般15-18,你三次重复都是这个那就可以的
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问
外泌体新手求帮助
汤姆卜丽波
我们是冰盒直接放上复苏的,没影响
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问
Hoechest/PI染色
汤姆卜丽波
你不看染色荧光,这个是软件统计需要的,你需要图还有就是软件统计的正常细胞和凋亡细胞的量,算趋势
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问
有大肠杆菌和链霉菌都可以使用的启动子吗
Eason老歌迷
这篇文献讲的很清楚,”大肠杆菌-链霉菌穿梭载体的构建及应用”。可以用Ptipa。
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请问病毒滴度检测用QPCR法,前面病毒的预处理是怎么处理?双链RNA病毒
汤姆卜丽波
有专业的纯化试剂盒,直接病毒纯化
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类器官基因编辑
bamboopiggy
将病毒离心到细胞的表面,然后促进病毒进入细胞。
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问
石蜡染色片子糊脏
Eason老歌迷
石蜡染色片子糊,脏有几个原因。可能是脱蜡时间不足或二甲苯由于使用过久,浓度降低,致使组织切片内蜡未彻底脱净。或者是取材时部份组织受挤压或取材后未及时固定。或者是浸蜡时温度过高,超过68 ℃或者是切片组织内有水分。或者是盖玻片和载玻片不清洁。
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各位大佬,机器和粉碎机中有大肠是用什么消毒的?怎样操作?
Eason老歌迷
消毒水你用二氧化化氯吧,较好、稳定,不残余,我们是用200PPM,然后再用开水漂烫一下。
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问
超离提取外泌体,粒径大大如何优化
Eason老歌迷
你可以试试一步法。一步法蔗糖垫缓冲超速离心方法能够获得更好的产量、细胞外囊泡完整性更佳和蛋白质污染物也更少。分离出的细胞外囊泡的大小、形态、产量和表面标记蛋白表达均能够被正常检测和表征。一步法则直接将蔗糖垫用于样品中细胞外囊泡的浓缩,即体液或细胞上清液直接添加于蔗糖垫之上,收集蔗糖垫使用PBS稀释后再次离心得到细胞外囊泡即可。去掉了预浓缩步骤,也减少了沉淀形成的次数。
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