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科研学霸天团，48小时有问必答

问拟南芥遗传转化对质粒大小的要求

loveliufudan

对于拟南芥的遗传转化，质粒大小是一个重要的因素。一般来说，质粒大小在10-15 kb以内的质粒比较容易转化到拟南芥中，而大于15 kb的质粒则可能会降低转化效率。因此，你的质粒大小14.5 kb左右，理论上来说是可以转化到拟南芥中的。当然，除了质粒大小外，还有其他因素也会影响拟南芥的遗传转化效率，例如使用的转化方法、所选用的细胞株、质粒构建的复杂度等等。因此，如果你想要高效地转化你的质粒到拟南芥中

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问用snapegen构建重组质粒，插入片段后，载体要替换的区域这下面两个有什么区别嘛？第一个需要改变插入片段序列方向才能克隆。

loveliufudan

根据您提供的信息，我猜测您正在使用Snapegen软件构建重组质粒。在要替换的区域中，Xhol (158) - EcoRI (192) - 5335 碱基对是一个连续的DNA序列，而EcoRI (192) - Xhol (158)是该区域的另一端。这两个端点的主要区别在于它们的方向性。如果您要插入的片段是在Xhol (158) - EcoRI (192) - 5335 碱基对序列的正向方向上，那么

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问如何定量检测细胞膜上脂质含量？

loveliufudan

定量检测细胞膜上脂质含量可以使用荧光染料，如荧光磷脂。下面是一种可能的实验步骤：处理细胞：将需要检测脂质含量的细胞培养至对数生长期，并用PBS洗涤一次。可以选择用一些药物（如脂肪酸、LDL、TNF-α等）来影响细胞膜上脂质含量，比较不同处理组间的差异。荧光染色：将细胞用含有荧光磷脂的染色液体进行荧光染色。可以选择不同的染色剂和浓度来优化染色效果。将细胞染色后，用PBS洗涤掉未结合的染料。荧光分析：

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问求助2937细胞转染的相关问题？

loveliufudan

这种情况可能是由于以下一些原因导致的：过度传代：HEK293细胞虽然可以进行长期传代，但过度传代会导致细胞生长减缓，形态变差。建议每次传代不要超过10倍左右。染色体不稳定：HEK293细胞是一种染色体不稳定的细胞系，经常出现染色体异常和突变。如果细胞已经连续传代多次，可能会导致染色体的不稳定性增加，从而影响细胞的生长和形态。感染：HEK293细胞有可能被细菌、真菌或者病毒感染。如果在细胞培养过程中

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问求助-广义估计方程GEE 协变量

huarenqiang5

是的，重复测量数据需要进行单因素GEE分析进行筛选混杂因素。

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问析因分析因变量可以是分类变量嘛

huarenqiang5

析因分析2×2×2，因变量可以是分类变量。

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问journal of advanced nursing求投稿经验

研一打工仔

初审两个月了，还没给回复，一直在Undergoing review阶段

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问review投稿肝癌分子

dxyc42u

Frontiers of Materials Science

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问审稿快的核心期刊

huarenqiang5

可以投这个《中医肿瘤学杂志》。

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问frontiers in physiology投稿相关问题

huarenqiang5

这个没什么问题的，不用担心，只要文章质量好就没事。

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问chip-seq发文章可以不做重复吗？

dxyc42u

看杂志的，有的可能不需要的，有的就会要

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问各位大神，我做的肠道TLR4-NFkB,用WB测肠道总p65下降，是否可以说明通路被抑制了，还是必须测磷酸化NFkB

loveliufudan

肠道TLR4-NFkB通路的激活可以通过NFkB信号转导通路进行，而p65是NFkB家族的一个成员，因此在一定程度上可以反映该通路的活性。p65在未被磷酸化时会停留在细胞质中，而当受到特定信号激活时会被磷酸化而迁移进入细胞核并激活下游基因的转录。因此，p65的下降可以暗示该通路被抑制了，但并不能说明抑制是由于磷酸化的改变，还是由于其他机制的调控，例如通过核转运的改变。如果你想更全面地了解该通路的活

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问在current vascular pharmacology上投了一篇文章最终的内容审核要多久

土井挞克树

一般一个月左右，过了一个月可以询问编辑

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问载药颗粒释放速率测定

土井挞克树

用你的平均释放速度除时间就得到释放速率

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问外泌体做蛋白质组学需要去高丰度蛋白吗？

loveliufudan

对于外泌体样本进行蛋白质组学分析时，通常也需要去除高丰度蛋白。外泌体是一种细胞分泌的小囊泡，内含大量不同种类的蛋白质，其中某些蛋白质可能具有极高的丰度，这些高丰度蛋白可能会掩盖住外泌体中其它低丰度蛋白质的信号，影响蛋白质组学分析的准确性和可靠性。一般采用不同的富集方法去除外泌体中的高丰度蛋白，常用的方法包括尺寸排除层析、电泳、超速离心等。这些方法都是通过物理化学性质差异选择性地富集外泌体，同时剔除

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问血浆、血清样本做基于质谱的蛋白质组学为什么要去除高丰度蛋白?

loveliufudan

血浆和血清中的蛋白质种类繁多，其中大部分蛋白质都是极低丰度的，而极少数的蛋白质却具有高丰度。这些高丰度蛋白质可以占据大量的质谱信号，使得低丰度蛋白质的检测变得困难，甚至无法检测到。因此，在进行基于质谱的蛋白质组学分析时，需要去除高丰度蛋白质，以便更好地检测低丰度蛋白质。去除高丰度蛋白质的方法有多种，其中最常用的是亲和层析法和尺寸排除层析法。亲和层析法基于高丰度蛋白质和其它蛋白质之间的亲和性选择性地

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问蛋白质组学或代谢组学分批检测，数据能再整合到一起分析吗？

loveliufudan

对于蛋白质组学或代谢组学分批检测的数据，可以通过不同的方式进行整合，以便进行综合分析。一种常见的整合方法是批次效应校正。由于蛋白质组学或代谢组学分批检测时可能受到不同实验条件或实验者的影响，因此批次效应校正可以帮助消除这些影响，提高数据的可靠性。通常，批次效应校正可以通过一些统计学方法实现，如正则化、标准化或应用混合模型等。另一种整合方法是采用多元统计学技术，如主成分分析（PCA）、偏最小二乘回归

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问RNAlater 保护液保存的样本，能做代谢组和蛋白质组吗？

loveliufudan

RNAlater是一种RNA保护剂，通常用于保存组织和细胞样本以保护RNA的完整性和稳定性。虽然RNAlater在保存RNA方面表现出色，但它也可以被用于保护代谢物和蛋白质的完整性和稳定性，因此保存在RNAlater中的样本也可以进行代谢组和蛋白质组的分析。在进行代谢组学和蛋白质组学之前，需要先将样本从RNAlater中取出，并用适当的缓冲液洗涤样本，以去除RNAlater中的残留物。此外，在样品

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问石蜡样本（FFPE）是否可以进行蛋白质组学？

loveliufudan

石蜡包埋的组织样本（FFPE）通常是组织学和免疫组织化学分析的标准方法，但是由于石蜡处理过程中样本受到的交联和硬化，样品中的蛋白质会发生损伤和部分降解，同时可能会有一定程度的蛋白质交叉链接，使得样品的蛋白质可溶性下降，从而影响蛋白质质谱分析的结果。因此，从FFPE样本中提取蛋白质需要采取一系列的特殊处理方法，以解交联、降解和减少其他的影响。近年来，一些新兴的蛋白质组学方法，如蛋白质组学信号增强技术

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问冻存久了的血清、血浆抽提外泌体做蛋白质组学有啥风险？

loveliufudan

长时间的冻存可能会影响血清、血浆中外泌体的完整性和数量，从而影响外泌体蛋白质组学研究的结果。一些研究表明，冻存时间越长，外泌体的完整性和数量会逐渐降低，从而可能导致假阴性或假阳性结果。此外，冻存的过程中也有可能引起蛋白质的降解和氧化，从而影响外泌体蛋白质组学的结果。因此，为了获得更准确和可靠的结果，最好尽可能在采集后立即进行外泌体的抽提和蛋白质组学分析，或者在短时间内将血清、血浆进行冷冻保存，同时

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