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问
标记红细胞内的酶,应该用什么荧光(激发,发射波长),以避开红细胞的自发荧光?
土井挞克树
红细胞内血红蛋白会产生自发荧光红细胞的自发荧光减少方法交联固定诱发。使用非醛类固定剂,比如冰乙醇,可有效降低交联固定而诱导的自发荧光。红细胞。动物组织取材固定前,先用PBS进行灌注。先进行预实验。检测自发荧光的波长范围,再选择与自发荧光荧光信号波长相差较大荧光信号。组织自发荧光淬灭剂。自发荧光淬灭试剂中的离子可通过碰撞方式,捕获自发荧光光源分子发出的电子,阻止该电子从激发态回归基态和能量释放,从而
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问
我要用流式测外泌体上的蛋白marker,一定要用磁珠吗,有没有提供具体的步骤
土井挞克树
磁珠要用的步骤可以参考【1】具体而明确的检测 【2】定量分析,荧光与外植体量之间有很好的相关性。 【3】直接检测细胞培养上清液和生物液中的外泌体。无需分离或沉淀 【4】需要的样品量非常少 【5】灵敏度更高,动态范围更广。即使是少量的样品,也能保证检测结果。 【6】可重复性 【7】允许外泌体捕获细胞群的同时进行免疫表型分析
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问
NADPH从胞质进入线粒体基质的穿梭机制
土井挞克树
NADPH的穿梭机制是等价还原物的穿梭机制,给你发机制图
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问
D-半乳糖造细胞衰老模型,该用什么溶,是pbs还是DMSO?
土井挞克树
pbs就可以。PBS调成弱酸或者弱碱稍微温热一下就能全溶基本不影响溶解度的。
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问
THP-1细胞构造脓毒症模型能不能直接用lps,不加pma?
土井挞克树
PMA一般用来诱导单核THP-1分化为巨噬细胞样细胞,LPS目的是诱导M1 polarization.,如果你不需要巨噬样细胞可以不加
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问
我做了一个随机对照前瞻性研究,探讨一个药物对疾病的有效性并分析各因素的相关性
Dr_劉医生
1.用试验组和对照组进行比较,不然你得药物干预等于没用,也就不属于随机对照试验;2. 治疗前、治疗3个月和治疗6个月,3个时间点不需要做三次,可以直接做时间变化曲线(KM曲线),用COX回归分析;3. 把因素4、5当作协变量,在回归分析模型中给adjusted因素4和5,如果还有统计学意义,就能说明不和因素4、5有关,反之则是由于因素4和5导致的
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问
Methods and Protocols系列丛书
Dr_劉医生
算是论著,看文献引用方式就知道,没有journal
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问
怎么中文撤稿
c_Yeats
中文期刊已经发表?还是要看具体情况和编辑沟通发邮件说明下情况
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问
HLA-B27单一出现临床意义大吗? 临床症状不明显,麻烦说明一下,谢谢!
Dr_劉医生
有一定临床意义,HLA-B27阳性只是提示强直性脊柱炎、银屑病关节炎等患病风险高,具体得结合患者关节临床症状和家族史等来判断,建议去风湿科门诊看一下
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问
蛋白的抗体对抗体的要求
balalaLy
抗体不需要复温,而且需要尽量保持低温
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问
请权威专家帮忙解答一下,血肌酐检测跟检测试剂有关吗?为啥临床参考值各不相同?
土井挞克树
一般来说抗凝剂肝素钠对酶法肌酐测定结果有影响,所以参考标准不同
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问
用D-半乳糖诱导细胞衰老,如果用pbs溶的话,对pbs占比有要求吗?不能超过5%?如果筛选出了损伤浓度为200mM,母液得配多少
c_Yeats
可以用pbs,占比没要求。更推荐按试剂说明书用合适的溶剂来配比。若你所说的损伤浓度(工作浓度)为200mM,母液可以配10X/100X用时做稀释就行。
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问
用96孔板免疫荧光法测重组杆状病毒滴度,荧光总是特别少是怎么回事?
土井挞克树
可以尝试加大上样量,可能存在降解。
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问
P450酶源提取过程中研磨液离心温度最低多少度?
师医生说
应该参考专家共识或者是文献来针对实验中的环境温度进行实验,大于10度以上很容易引起酶活性的失活同时也会有其他的提取不完全或者是干扰因素出现
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问
stata软件制作拉贝图时,输入命令后显示option null not allowed
Dr_劉医生
你把数据变量的中文去掉,labbe的命令行没啥问题
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问
SEER数据库无法生成Matrix
Dr_劉医生
大概率应该是socket的连接工具出现了问题,把数据和网络的连接重新断开连接一下
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问
meta分析数据提取
土井挞克树
按照基线分组时的人数计算就可以。
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问
自身对照试验在写文章的时候,应该把它类于什么试验?
Dr_劉医生
就明写就行,随机对照试验可以写DBRCT(double placebo randomized clinical trial),自身对照试验写non-DBRCT。
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问
一个家系的耳聋基因突变分析,投稿让把数据库上传公共数据库,请问这个怎么上传?求指
Dr_劉医生
首先是否是must,还是require;第二直接问编辑公共数据库是哪一个。上传原始数据切记要谨慎,必要时可以提供给编辑,但建议最好不要上传公共数据库
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问
【求助】多糖去蛋白
dxy_k2sipqk6
请问一下你弄懂这个了吗?我也是看不懂这个,我用文献说的5%的三氯乙酸溶液去除蛋白,完全没有沉淀
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