实验问答22,045,081 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问噬菌体展示能检测出蛋白质直接相互作用吗？

Dr_劉医生

可以，噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，使外源基因随外壳蛋白的表达而表达。

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问.蛋白质液相色谱法的步骤是什么？

土井挞克树

液相色谱仪的测试步骤总共分为三个步骤：　　第1步：测试产品或者样品做分解和分类：　　根据标准，将所测试的样品或者产品拆解/分解到机械方法无法拆分的均值样品。并根据均值样品的材质进行分解为：塑料基体，五金金属基体，铝镁基体和焊锡基体。　　第2步：分类测试样品的中：　　根据分类后的样品，对塑料基体的样品分别用XRF做Pb、Cd、Hg、Cr，Br元素的检测和用ROHS2.0测试仪做邻苯4项的检测，综合判

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问细胞给药浓度怎么计算

麻黄连翘赤小豆

按冻干粉的量算，进行CCK8梯度筛选

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问测未知物（单体化合物）的激发和发射波长

土井挞克树

因为你是未知物，那么你物质的性质是不清楚的，所以要做溶解曲线，对未知物有一定分析。

1 回答284 围观

问油红O染色不理想，甘油明胶封片后可以重新再染色吗

Dr_劉医生

可以，但重新上蜡，脱水，脱酒精会干扰你再次制片的结果，建议选好染色方法，谨慎封片

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问有研究血友病B的大神吗？凝血因子IX（FIX）怎么检测活性？不是FIXa。具体方法

Dr_劉医生

凝血因子Ⅸ（Ⅸ︰C）的促凝活性检测一般用QuickⅠ一期法，正常参考值：凝血因子Ⅸ︰C：67. 6%~128. 5%。还可以用免疫火箭电泳法测定凝血因子Ⅸ︰Ag：68. 7%~127. 7%。

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问TSA分析

Dr_劉医生

用的R语言的TSA包吗，数据没有提取成功，第一行的数据信息太多了，分个组就可以啦

2 回答484 围观

问甘油冷冻保存法，忘了摇匀了，过了三个小时摇还有效果吗？

Dr_劉医生

可以用，用的时候还得水浴加热融化

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问meta能因为临床异质性大排除一些文献吗

Dr_劉医生

不能这样排除，得严格按照你的纳入标准来；此外，异质性不是主观，得通过敏感性分析和异质性检验来发现，从而决定是否排除

2 回答428 围观

问microRNA，circRNA，lncRNA，ceRNA，siRNA，shRNA有什么区别？

balalaLy

microRNA，circRNA，lncRNA，ceRNA，siRNA，shRNA有什么区别都是RNA,microRNA小RNA，circRNA环状RNA，lncRNA长链非编码RNA，ceRNA 内源竞争RNA,这些都是内源RNA,siRNA，shRNA是人工合成的，导入细胞后可以干扰或敲低目的RNA的外源性RNA

3 回答2037 围观

问提前质粒的时候，提好多次，浓度很低，需要怎么办？

Dr_劉医生

第一个保证菌体充分裂解释放了，第二个增加菌体悬液的量

3 回答2253 围观

问GEO数据集里面病例数较少

juyue2010

会有疑问，病例数少，统计结果可信度大为下降

3 回答295 围观

问流式细胞PI单染中为什么用RNAse？

dxy_ju4vzuyw

PI是常用染料，但嵌入到双链Dna和Rna的碱基对中与之结合，无碱基特异性，故染色前必须用RNase A处理细胞，排除双链Rna的干扰

3 回答1069 围观

问流式检测细胞周期时加RNA酶所需的温度？

Dr_劉医生

37度孵育30min，然后加裂解液，4度继续孵育30min。园子里有方案，可以去看看

2 回答675 围观

问实验过程中出现非特异性染色处理有哪些？

土井挞克树

一抗用多克隆抗体容易出现非特异性染色，建议用高纯度，高效价的针对更具特异性抗原决定簇的单克隆抗体来解决。单克隆抗体很贵，不过结果真的很好。尤其是背景非特异性染色不会太深。真是一分价钱一分货。一抗过期也会造成杯具，所以要注意抗体的有效期。

3 回答138 围观

问实验过程中荧光强度弱怎么处理？

土井挞克树

1 荧光染料和显微镜的荧光块可能不是很配合　　2 汞灯的中心没有调节好,或者汞灯的寿命到了　　3 样本的制作是否可以更好,　　4 是否用用了合适的物镜

3 回答1057 围观

问要验证某个细胞上有无该蛋白的存在，需要做免疫组化和westernblot试验吗？做这两个试验时的一抗和二抗可以共用吗

土井挞克树

需要做两个实验，抗体可以共用。

3 回答316 围观

问请问下这个circo图该怎么看啊

Dr_劉医生

这是典型的细胞聚类的circo图，看细菌和细胞类型的相互作用。你在网上看到的那是常规的外圈染色体和基因的，用R作图的时候都是可以修改外圈的数据信息。推荐你看下这篇文章的figure1A，和你这个是一样；“Tumor microenvironment characterization in gastric cancer identifies prognostic and immunotherapeu

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问请问神经系统的spine turnover是什么意思，如何翻译

Dr_劉医生

树突棘周转，一般和突触连接，树突形态一起反应神经元的内源性可塑性指标。基本所有神经元检测都会测这个，推荐一篇文献，Gao BY, Cao YX, Fu PF, et al. Optogenetics stimulates nerve reorganization in the contralesional anterolateral primary motor cortex in a mouse

2 回答569 围观

问为什么空载质粒转染也能诱导炎症啊？

juyue2010

质粒内毒素超标，会导致炎症因子产生

3 回答966 围观

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