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科研学霸天团，48小时有问必答

问Uuo模型的假手术组是在假手术后1天处死还是第14天？

土井挞克树

Uuo模型的假手术组是在假手术后14天和28天处死

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问L-色氨酸如何加入LB培养基

sswei

色氨酸一般是在稀酸或稀碱溶液中溶解，然后加入培养基。

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问测MDA时，TBA配置时溶解了，但在4℃保存时又有晶体析出是为什么，会影响测定结果吗？

loveliufudan

如果在TBA配置时发生了溶解，但在保存时又有晶体析出，可能是因为TBA在配制时被过度加热或过度搅拌，导致其在水中溶解度增加，但在降温和停止搅拌后，TBA的溶解度会下降，导致晶体析出。这种晶体可能会影响测定结果，因为它们可能会干扰TBA试剂与其他物质的反应。为了最小化晶体对测定结果的影响，建议您在进行MDA测定之前先过滤掉晶体，以确保测定中只有溶解的TBA试剂。另外，请确保在TBA配制过程中避免过度

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问蛋白挂柱洗脱不下来请问怎么处理

loveliufudan

以下是可能的解决方案：尝试调整醋酸钠的浓度和NaCl的浓度：您可以尝试减少NaCl的浓度，例如使用250mM NaCl或更低的浓度进行洗脱。另外，您可以尝试增加醋酸钠的浓度，例如使用100mM或更高的浓度。如果您的试剂可以承受更高的醋酸浓度，您还可以尝试使用更高浓度的醋酸（例如0.2 M或更高）。尝试调整洗脱缓冲液的pH：您可以尝试在不同的pH值下进行洗脱。除了pH4，您还可以尝试pH3或更低的条

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问如何进行抗原表位筛选？

loveliufudan

对于筛选T/B细胞抗原表位的问题，以下是一些常用的软件和方法：IEDB（The Immune Epitope Database）：IEDB是一个公共数据库，收集了人类和其他物种中已知的T/B细胞表位信息。可以使用该数据库中的工具进行序列分析和抗原表位预测。可以使用IEDB中的线性和非线性预测工具，例如BepiPred、NetMHC、NetCTL等。DiscoTope：DiscoTope是一个基于机

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问Gateway反应的引物是怎么设计的？需要加上attB这个没看懂

loveliufudan

在Gateway克隆技术中，attB位点是重要的克隆元件，它位于载体和DNA片段之间，是介导DNA片段定向插入载体的关键元素。因此，在进行Gateway反应时，需要使用含有attB位点的引物，以引导目标DNA的定向克隆。通常情况下，引物设计可以遵循以下步骤：根据目标DNA片段的序列，选择包含attB位点序列的引物。这些引物通常被称为Gateway入口引物或attB引物。设计引物时需要考虑attB位

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问pAT03-Apr是什么特性？重组酶表达质粒

loveliufudan

pAT03-Apr是一种重组质粒，可用于大肠杆菌中表达重组酶。该质粒包含多个重要元件，包括：起始子和终止子：用于启动和终止转录过程。多克隆位点：用于方便地插入目标基因的DNA序列。T7启动子：用于诱导T7 RNA聚合酶的表达。带有6个组氨酸标签（6xHis-tag）的启动子和终止子：用于方便地将重组蛋白纯化。胰凝乳蛋白酶切位点：用于释放表达的重组蛋白。因此，pAT03-Apr质粒可以方便地克隆目标

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问中药入血成分内标物选择

sswei

在排除误差后，可选用该物做内标。

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问[求助]小鼠肝脏缺血再灌注模型

alimGYR

你好，你的模型怎么样了，我的模型生化指标很理想，但是he染色he免疫组化感觉没有损伤和凋亡

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问nissl染色，海马一直裂口

loveliufudan

出现裂口、断裂的可能原因如下：组织处理过程中损伤导致。如固定不足、处理时间过长、处理过程中机械振荡等都可能导致组织细胞裂口。切片过程中操作不当，如切片厚度不均、切片时候挤压组织等。石蜡切片加热时间过长或过高，导致组织脱水过度。针对以上可能原因，可以采取以下措施避免裂口的产生：在处理组织时，注意固定充分、处理时间控制、避免机械损伤等。切片前要进行组织的均匀包埋和切片厚度的控制，切片时不要挤压组织。石

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问求助 SD大鼠高脂诱导胰岛素抵抗

loveliufudan

SD大鼠60%高脂饲料诱导可以导致胰岛素抵抗和糖代谢异常，而OGTT测试可以用来评估机体的葡萄糖耐受性。如果在第6周的OGTT测试中发现异常，这意味着这些SD大鼠可能已经出现了胰岛素抵抗和/或糖代谢异常的迹象。但在第17周再次进行OGTT测试时，如果没有发现异常，这可能是由于以下原因：大鼠的身体已经适应了高脂饲料，改变了其代谢途径，使其在更长的时间内维持了较好的糖代谢能力。大鼠可能已经发展出代偿性

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问一个公认的抑癌基因，但是在某个癌中高表达，并且表达越高预后越差

loveliufudan

这种情况通常可以解释为在不同类型的肿瘤中，同一个基因可能会发挥不同的作用。在正常组织中，这个基因可能发挥抑癌的作用，但在某些特定类型的癌症中，由于其他基因的改变或某些环境因素的影响，这个基因的功能可能被转化为促进肿瘤发展。另外，有些基因的表达可能会在不同的肿瘤类型中表现出差异，因此这个基因在某个癌症中的表达水平高，并不一定代表它在其他类型的癌症中也会高表达。此外，一些研究还表明，在某些情况下，高表

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问脑组织He病理

loveliufudan

正常大鼠皮质中存在神经元变性的情况比较罕见，但是在老龄化大鼠中神经元变性和神经元丢失是比较普遍的现象。这些变化可能是与年龄相关的自然退化过程的一部分，与神经元的生命周期有关。此外，胼胝体疏松也是正常的老化过程之一。胼胝体是大脑中的一个白质结构，它主要由神经纤维和胶质细胞组成。随着年龄的增长，胼胝体中的神经纤维数量可能会减少，这可能导致胼胝体的疏松和萎缩。虽然神经元变性和胼胝体疏松都是正常的老化过程

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问求助：羊口疮病毒OrfV

来一起探讨

可以向本省的畜牧兽医科学院或省动物疫病预防控制中心咨询一下

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问亚胺培南平板配制及储存问题

loveliufudan

1.自制亚胺培南LB平板在4℃下可保存3-4周左右，但是抗生素的有效性会随着时间的延长而降低，因此建议在使用前进行检测，确保抗生素的有效性。2.自制亚胺培南LB平板接种细菌后，在37℃下培养一般需要24-48小时左右才能观察到结果。过长时间的培养可能会导致抗生素的失效，使得对亚胺培南敏感的J53也能生长出菌落。通常情况下，如果细菌在24小时内没有生长，就可以认为该菌株对亚胺培南敏感。但具体时间的判

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问裂解BL21(DE3)plSs感受态细胞细菌蛋白方法

loveliufudan

反复冻融可能会导致细菌膜破裂，释放出溶菌酶等细胞内容物，但这种方法并不可靠，同时也会破坏细胞内的其他蛋白质、DNA等分子。而且这种方法通常适用于某些特定的菌株和特定的表达质粒，不是所有的菌株和质粒都适用。如果您的菌体像果冻一样，可能是因为在冻融的过程中，细胞壁或细胞膜已经被破坏了，导致整个细胞变得脆弱，甚至发生了溶解。这时候再进行离心操作，会发现细胞碎片难以分离。如果您需要裂解BL21(DE3)p

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问谁知道这个怎么cfu计数呀

loveliufudan

以下是一些基本的CFU计数步骤：取一定量的细菌培养物，通常是通过吸液器或针头来定量取样。使用万能试剂或其他方法将细菌稀释到适当的浓度，使其易于计数（一般是1:10到1:1000的稀释比）。取适量的细菌稀释液，在无菌平板上均匀涂布，然后在37℃下培养一定时间（一般为16-24小时）。计数菌落，将菌落数乘以稀释倍数，得到原始细菌数量。注意事项：在进行CFU计数前，需要确保培养物已经均匀混合，否则会影响

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问导师放养，想问下大佬关于中药相关问题。

loveliufudan

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问阿米巴在肠道以外组织一般不形成包囊体的原因是什么

loveliufudan

这是因为在肠道以外的环境中，阿米巴原虫没有必要形成包囊体来抵御环境压力和营养不足的情况。在肠道内，阿米巴原虫通常会遇到环境压力和营养不足等不利条件。在这些情况下，阿米巴原虫会形成包囊体，以保护自己并保持生存。包囊体是一种耐久结构，可以在不良环境中存活数年，同时也是传播病原体的重要手段。然而，在肠道以外的环境中，阿米巴原虫通常可以通过吞噬细菌和其他微生物来获取充足的营养，并且不需要面临如此强烈的环境

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问有人知道end over end rotator是什么仪器吗

sswei

end over end rotator是端对端旋转器。

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