实验问答22,888,183 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问分别用不跑熔解曲线的QPCR的产物和跑了熔解曲线的产物（都是染料法），去做跑胶做鉴定，这两种的结果会有什么区别？

loveliufudan

不跑熔解曲线的qPCR产物和跑了熔解曲线的qPCR产物在跑胶鉴定上可能会有一些区别，这取决于具体的实验条件和实验设计。如果两种产物中所扩增的目标序列是相同的，并且扩增效率和特异性也相同，那么这两种产物在跑胶鉴定上可能没有明显的差异。这是因为，无论是哪种产物，都是在qPCR反应中被扩增出来的，它们在跑胶鉴定上应该会呈现出相同的带型和强度。但是，如果两种产物的实验条件和实验设计存在差异，那么它们在跑胶

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问Frontiers 在 Independent Review阶段有2个审稿人已完成，但是没有是否通过

_Bingo_

请问在IR阶段只有一个review is ongoing是指只有一个审稿人吗但是客服告诉我有两个审稿人

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问关于cAMP（E.coli）

loveliufudan

果糖代谢通路中的某些中间产物，如麦芽糖（maltose）和异麦芽糖（isomaltose），可以通过激活磷酸转移酶MalT来增加cAMP水平，并诱导LacZ等基因的表达。但是，果糖对cAMP含量的影响可能是复杂的，可能涉及多个代谢途径和调节机制。

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问蛋白包被试纸条，干燥几天之后出现黄色条带

sswei

硝酸纤维素膜（nitrocellulosefiltermembrane，简称NC膜），在胶体金试纸中用做C/T线的承载体，同时也是免疫反应的发生处。转膜后nc膜变黄是因为是dov、色母等添加剂发生反应所致，需更换以免影响后续实验。

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问求助：买的通过流式检测的抗体，可以用酶标仪来测吗

汤姆卜丽波

应该也是可以的，像做elisa一样然后测显色就可以

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问RDP4

土井挞克树

可能你下载的版本与你设备不兼容，更换版本再下载

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问CCLE打不开

dxy_z9ihw7ae

您好，看您的评论您已经解决了，想请问一下您是通过哪种方法解决的

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问dsRNA质量检测标准

汤姆卜丽波

一般的，我们只看OD260/OD280（Ratio，R）。1.82.0时，我们认为RNA中蛋白或者时其他有机物的污染是可以容忍的，不过要注意，当你用Tris作为缓冲液检测吸光度时，R值可能会大于2（一般应该是<2.2的）。当R<1.8时，溶液中蛋白或者时其他有机物的污染比较明显，你可以根据自己的需要决定这份RNA的命运。当R>2.2时，说明RNA已经水解成单核酸了

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问除了观察阴道栓外如何确定E14.5天小鼠？

土井挞克树

除了阴道栓还可以通过观察牙齿，E14.5天,小鼠牙胚进入帽状期,可见成釉器分化为内釉上皮、外釉上皮和星网状层,釉结结构明显

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问番茄组培接种番茄种子暗处理后有一罐种子发芽特别少，这是为什么呢？

汤姆卜丽波

有可能是你蒸馏水洗的不够导致有细菌保留，和种子竞争培养基

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问尼可刹米引起小鼠惊厥的原因是什么

土井挞克树

尼克刹米过量具有中枢兴奋作用，增强神经钠离子内流，提高中枢的兴奋性，所以可以引起惊厥。

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问组织固定完，脱水到百分之多少的乙醇，就可以保存在-20了啊

Dr_劉医生

一般到60%就可以保存了，乙醇低于50%基本就没有脱水能力了

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问Hela 细胞是否可以用PEI顺转,转效如何啊

总是让起名字

借楼，hela细胞有不同类型，包括hela hela s3, hela 229, 3者形态差异很大，你们测的转染效率数据是基于哪一种hela检测的？能否提供一下图片，谢谢。

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问自噬通量检测使用自噬抑制剂，是持续干预还是检测前干预？

loveliufudan

对于体内实验，由于Baf和CQ都具有毒性，因此应尽可能缩短给药时间，以避免不必要的副作用。一些文献报道将Baf或CQ腹腔注射于小鼠体内，并在处死前30分钟进行检测。这种方法可以提高细胞内药物浓度并减少不必要的细胞死亡。但是，如果您的实验需要更长的时间来观察效应，可以根据您的具体实验条件和药物的性质选择合适的时间。对于体外实验，建议在细胞培养期间添加Baf或CQ，并允许药物与细胞进行足够的交互时间。

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问细菌制备PID模型大鼠为什么会死亡率很高呀

loveliufudan

在制备PID模型的过程中，如果细菌多次进入大鼠体内，可能会导致严重的感染，从而导致大鼠死亡。此外，如果实验条件不足或不当，例如细菌的清洗、存储和使用不当，或者大鼠体内抵抗力减弱，也可能导致大鼠死亡。因此，制备PID模型时必须严格遵守安全操作规程，以保证大鼠的健康和实验的成功。

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问请问这几种蛋白有什么区别呢？

loveliufudan

Recombinant Human TNF-α/TNFSF2：这是基本形式的重组人类TNF-α蛋白质，没有标签或特殊结构。Recombinant Human Soluble TNF-α (Trimeric form)：这是人类TNF-α蛋白质的可溶性形式，呈现为三聚体结构。这种形式的TNF-α在生物活性方面可能与天然形式更接近，因为TNF-α在体内通常以三聚体形式存在。Recombinant Hu

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问请问有造出成功cums抑郁小鼠模型的大牛吗？？？

loveliufudan

为了提高模型的成功率，可以尝试以下方法：模型标准化：确保每次实验的实施方案一致，减少实验操作中的偏差。确保实验材料、动物来源和实验条件（例如温度、湿度、光照周期）保持一致。提高应激强度：在CUMS实验中，可以尝试增加应激刺激的强度或频率。例如，可以增加应激持续的天数、每天的应激次数或更频繁地更换应激刺激类型。同时，保持刺激类型的多样性，以避免动物适应特定刺激。合适的动物选择：选择合适的品系、性别和

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问明胶酶谱最后拿什么拍照呢

loveliufudan

在拍摄明胶酶谱（明胶酶切割后的凝胶）时，确实可以使用凝胶成像仪。通常凝胶成像仪分为紫外（UV）成像仪和白光（WL）成像仪两种。对于明胶酶谱，我们通常使用白光成像仪。在拍摄明胶酶谱时，凝胶成像仪可以提供均匀的背景光，从而获得更好的图像。成像仪通常配备专业相机和镜头，可以捕捉到高分辨率和高对比度的图像。如果您没有凝胶成像仪，也可以尝试以下方法来改善手机拍摄效果：使用白光背景：在拍摄时，将凝胶放置在一个

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问克隆基因时，测序结果比对氨基酸序列，发现总是在同一位置发生氨基酸突变，这是什么原因呢

土井挞克树

与局部的碱基有关系，一般GC碱基发生突变的可能性比较大所以容易在此突变

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问vp实验及甲基红实验的注意事项

loveliufudan

VP实验注意事项：1.保证试剂的新鲜度：试剂的质量对实验结果具有重要影响。使用新鲜的巴拉特试剂A（α-萘乙醇）和巴拉特试剂B（40% KOH溶液）。2.掌握试剂的添加顺序：先加入试剂A，再加入试剂B。注意不要将试剂混合后一起加入。3.加入试剂后摇匀：试剂加入后要摇匀，然后等待一段时间（通常约15分钟）观察颜色变化。4.观察时间：颜色变化可能在几分钟到1小时之间出现，因此需要密切观察。结果的判断以红

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