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细胞培养技术 细胞周期的测定 一、原理 细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。 单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法，但它不能代表细胞群体的周期，故现多采用其他方法测群体周期。 测定细胞周期的方法很多，有同位素标记法、细胞计数法等，这里介绍一种利用BrdU渗入测定细胞周期的方法。 BrdU（5-溴脱氧尿嘧啶核苷）加入培养基后 ...

各种水的区别

用户按使用场合、物料性质等因素选择合适的离心机，以达到预期的目的。选型时有以下三个必须重视的问题： 1.防腐性能 离心机所分离的物料一般都具有一定的腐蚀性，与物料接触部分的材质，必须能够达到耐腐蚀 的要求，以保证安全使用。 结构件材料种类（ 304 、 321 、 316L 、钛板）、密封圈、密封垫材质，表面处理措施（衬塑、衬胶、表面 涂），以及滤布的材质等等均应在选型时确定。可在选型时将物料的 ...

实验室基础设备是科研和临床医学的必备装备但是许多实验室往往注重分析型的临床检验而忽略基础设备。 离心机是最常用的基础设备之一，在医院实验室应用非常广泛，离心机十分离血清，沉淀有形细胞，浓缩细菌，PCR试验等等必不可少的工具。 一、离心机的工作原理 离心机在高速旋转的过程中，由离心力所导致的运动使悬浮于液体中的固体物质形成沉淀，也就是悬浮体液中质量或体积较大的物体向转头半径最大的方向移动，而质量或体 ...

离心机是实验室最常用的基础设备之一，在医院实验室应用非常广泛，离心机十分离血清，沉淀有形细胞，浓缩细菌，PCR试验等等必不可少的工具。 选购普通离心机，根据工作量的大小，主要从转速和容量两个方面选择。下面详细介绍选购精密离心机应该注意的问题： 1.转速 离心机根据最大转速的不同分为低速离心机 <10000rpm/min，高速离心机1 0000rpm/min一30000rpm/min，超高速离 ...

复苏技术 1. 细胞复苏的原则 在实际操作中，冻存细胞要进行复苏，再培养传代。复苏细胞一般采用快速融化法。以保证细胞外结晶快速融化，以避免慢速融化水分渗入细胞内，再次形成胞内结晶损伤细胞。 2. 细胞复苏的主要操作步骤 （1）佩戴眼镜和手套，从液氮罐中取出安瓿或冷冻管。 （2）迅速放入38℃水浴中，并不时摇动，在1分钟内使其完全融化，然后在无菌下取出细胞。 （3）在1000r/min速度下离心5～ ...

离心机的原理介绍

介绍了四种离心机的使用性能及特点

离心机的三种新技术简介

介绍PGZ平板刮刀自动卸料离心机结构特征

离心机主要用于将悬浮液中的固体颗粒与液体分开；或将乳浊液中两种密度不同，又互不相溶的液体分开(例如从牛奶中分离出奶油)；它也可用于排除湿固体中的液体，例如用洗衣机甩干湿衣服；特殊的超速管式分离机还可分离不同密度的气体混合物；利用不同密度或粒度的固体颗粒在液体中沉降速度不同的特点，有的沉降离心机还可对固体颗粒按密度或粒度进行分级。

概述 细胞培养技术自1907年开创以来，历经一个世纪现已成为自然科学领域不可缺少的研究方法之一。在细胞培养技术广泛用于科学研究领域的令天，细胞株的冷冻保存和解冻复苏这一基础技术日益得到重视。 低温保存是活体组织保存最常用的方法之一。冷冻保存一般是指在0— 196 oC进行保存，就是将体外培养物悬浮在加有或不加冷冻保护剂的溶液中，以一定的冷冻速率降至零下某一温度，并在此温度下对其长期保存 ...

冻存液：一般用10%DMSO(推荐用sigema原装的，质量好不用预消毒)+10％血清的完全培养基，如果细胞珍贵的话最好用10％DMSO＋90％全血清。 降温方法：用最少两厘米厚的医用棉纱将冻存管紧紧包裹，扎紧，直接放入-70度冰箱，隔夜取出冻存管直接放液氮冻存。 复苏效果对比：细胞冻存2周后复苏，本方法冻存的细胞与使用程序性降温仪冻存的细胞复苏效果相差不大，但明显比传统4度、-20度、-70度的 ...

一、细胞冷冻保存 1.材料： 生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene　5000-0020)、0.4％（w/v）trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降温机(KRYO10SeriesII) 2、冷冻保存方法： （1）传统方法: 冷存管置于4℃10分钟--->-20℃30分钟---& ...

背景知识 ： 细胞培养的传代及日常维持过程中，在培养器具、培养液及各种准备工作方面都需大量的耗费，而且细胞一旦离开活体开始原代培养，它的各种生物特性都将逐渐发生变化并随着传代次数的增加和体外环境条件的变化而不断有新的变化。因此及时进行细胞冻存十分必要。细胞冷冻储存在-70℃冰箱中可以保存一年之久；细胞储存在液氮中，温度达-196℃，理论上储存时间是无限的。 原理 ： 细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻 ...

第一天： 17：00：后用接种环取一单克隆细菌接种于LB培养液中，37°C摇床过夜（不要超过16小时） 第二天： 7：30：打开紫外灯，照射半小时（将器械放入通风橱中） 8：00：将20mL的LB培养液放入250mL的三角烧瓶中，按1：100的比例稀释过夜培养的细菌（即放入200ul 的细菌液体），将其放入37°C摇床，培养约3.5个小时 11：00：打开紫外灯，照射半小时 11： ...

计算支原体的菌数不能用血球计数板、比浊法等，需要采用菌落形成单位（CFU）计数法或者颜色改变单位（CCU）测定法。这两种计数法都需要几天才能出结果，也就是原来待测菌液的菌数。请问如何将该菌液保存下来，以便接下来的定量共同培养、抗药等实验？ 如果是直接将菌液放到－20度或者－70度冰箱保存，直到需要的时候再溶解，那么冻存过程中肯定有一定数量的支原体死亡，解冻后的菌液菌数也许远低于测定值CCU/CFU ...

zyh43把支原体菌种接种在培养基中，然后冻存（-20度），在跟踪培养时发现相同的菌种，有的可以保存一年，而有的一个月就死亡，有时加入甘油，只是效果也不大！对此不知各位有什么看法呢？ 1、假如不是同一培养液中的支原体，因为个体差异，保存的时间不一样是很正常的。 2、添加甘油作为保护剂，在-20°C～-30°C的普通冰箱冷冻保存时，因为添加保护剂的细胞混合物的共融点可能处在这个温度 ...

支原体（霉形体）的培养技巧支原体是介于病毒与细菌之间的一类微生物，在自然界广泛存在，使人和多种动物、植物害病。 它缺乏细胞壁而不同于细菌，能在无细胞培养基生长繁殖，并含有RNA和DNA而有别于病毒。支原体以二分裂方式繁殖，基本形态为圆形、丝状形，后者易形成分枝状菌丝，因而得名支原体。其大小介于病毒和细菌之间，最小直径125-250nm，可通过滤器。基因组小只5×108道尔顿，是已知能自 ...

最近看大家常提到支原体污染，就翻了翻书，做了些笔记，现在贴出来和大家分享： 支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性。可为圆形、丝状或梨形。 支原体形态多变，在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构。其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于细胞表面和细胞之间。横断面与细胞 ...