全部

细胞的复苏 细胞复苏的原则－快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。 具体操作 一. 实验前准备： 1.将水浴锅预热至37℃ 2.用75％酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。 3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、 ...

微量凯氏定氮仪的安装

1、试剂来源 Vero/slam细胞由国家麻疹实验室提供，使用代次不超过15代。 2、操作步骤 2.1维持液的配制 100mlDMEM& ...

传统的空斑实验方法测呼吸道合胞病毒的PFU值由于其空斑形成较小且需要借助特异性的表面融合蛋白抗体来确定故操作繁琐费用较高。这里介绍给大家三种简单易行的空斑形成实验操作方法： 方法一 1、以5×10e5/ml的密度接种Hep－2细胞到6孔板中，每孔加入3ml细胞悬液； 2、待细胞长成单层后（不得超过48hr），移去营养液，每孔加入400ul的PBS和100ul毒液（10倍系列稀释）； 3 ...

常用设备 准备室的设备： 单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜（放置未消毒物品）、储品规（放置消毒过的物品）、包装台。配液室的设备：扭力天平和电子天平（称量药品）、PH计（测量培养用液PH值）、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液）。培养室的设备：液氮罐、储品柜（存放杂物）、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温 ...

一、细胞培养基质量标准(粉): 细胞培养基的最主要指标是使特定的细胞在指定的细胞生存环境中存活、发育生长和繁殖，基础培养基是提供这些条件的基本物质，不同的细胞可能还须添加不同的其它物质。 目前国内细胞培养基的商品没有统一的标准，即没有行业标准，也无部颁标准和国家标准。本企业为了使产品质量稳定可靠，在市场上有较强的竞争力，特编制产品标准。并经上海市质量技术监督部门批准，本企业产品标准代号 Q/TOS ...

图注：ELISPOT 法在检测低频率产生细胞因子的细胞时具有独一无二的敏感性。将指定数目的能产生 IFN- 的T细胞与一百万个抗原呈现细胞（Antigen Presenting Cells，APC）混合后，使用 ELISPOT 法（上图）、胞质内染法（中图）和 ELISA 法（下图）分别测量产生 IFN- 的细胞的数目。 •ELISPOT 分析使单细胞分泌产物可视化。这些分析 ...

1.为什么要热灭活血清？ 加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。 2.L－谷氨酰胺在细胞培养中重要吗？它在溶液中不稳定吗？L－谷氨酰胺在细胞培养时是重要的。脱掉氨基后，L－谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L ...

无菌操作基本技术 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60分钟灭菌，以70%ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无 ...

ELISPOT技术简介　随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用 使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法（ ELISA ）检测体液中游离的细胞因子（ CK ）或抗体，但由于游离的循环抗体或 CK 的半哀期不同，使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合，而不能确切的反映体内的抗体及 CK 的水平。 80 年代，国外的科研工作者 ...

对于像黑色、棕色小鼠以及裸鼠，我们不能单纯用常规方法编号，因此对于这类动物，可以采用一些特殊的编号方法 一.采取耳朵打孔编号： 1号双耳无孔; 2号左耳打孔; 3号右耳打孔; 4号双耳打孔; 5号左耳双孔; 二.耳缺法 左前缺-1号; ...

选择材料及预处理 　　以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中，如盐析，有机溶剂提取，层析和结晶等；二是将混合物置于单一物相中，通过物理力 ...

选择材料及预处理 　　以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中，如盐析，有机溶剂提取，层析和结晶等；二是将混合物置于单一物相中，通过物理 ...

一、原理 可溶性抗原（或抗体）吸附于免疫学反应无关的颗粒（称为载体）表面上，当这些致敏的颗粒与相应的抗体（或抗原）相遇时，就会产生特异性的结合，在电解质参与下，这些颗粒就会发生凝集现象。这种借助于载体的抗原抗体凝集现象就叫做间接凝集反应(Indirect agglutination reaction)。 载体的存在使反应的敏感性得以大大提高。间接凝集反应的优点为：①敏感性强：间接凝集反应是最敏 ...

一、实验目的与原理 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时，它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现，如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS)大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合，即每克蛋白质结合1.4g的SDS－复合物都带上相同密度的负电荷，它的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而消除了蛋白质原有的电荷差别，使蛋白质分子电泳的迁移率主要 ...

蛋白质是生物体的重要组成部分，在现代生物制药领域有着重要的作用，本文介绍了现代生物分离技术反胶束萃取、双水相萃取和电泳在多肽蛋白质分离中的应用和现状。

Protein表达是一个非常复杂的过程，因此很难预测表达的蛋白是否是可溶性的、包涵体形式还是部分降解的。为了预防各种可能的困难条件，在重组蛋白上导入两种Tag可以提供获得高纯度均质蛋白的灵活性。 蛋白含有两种不同亲和纯化Tag的重要原因： 纯化全长的蛋白 获得最高纯化的蛋白 适合变性或生理条件下纯化 优化的操作过程，可以直接从培养基中纯化蛋白 与Strep-tag®配合最有效的是6x ...

Characterization of Phosphopeptides Using a Combination of Immobilized Metal Ion Affinity Media and Direct Analysis by MALDI-TOF-MS INTRODUCTION Phosphoproteins and peptides can be bound with high spe ...

1.每次取样测定后，应把钢瓶内余氯放尽(真空抽取或碱液吸收)，并用干燥氮气以1000ml/min的流量吹洗钢瓶，至瓶内无氯气（用氨水检验）。 2.每半年要清洗一次，并有称重记录。清洗时，先用水洗净，再用丙酮洗三次以上，每次用量约20ml，最后，在50～100℃的温度下，用干燥氮气以1000ml/min的流量吹洗钢瓶至干燥，此外，必须按《气瓶安全监察规程》规定执行。 3.使用单位有权按照本标准规定的 ...

空气可以通过钢瓶、室内空气系统和小型压缩机来提供。当然钢瓶是最贵的选择，特别是在工作量很大的情况下就要频繁的更换钢瓶，这问题就尤为显著。如果使用压缩空气，就需要在仪器的输入端前安装过滤器和压力表。如果用户需要可以向varian公司订购“Air Service Unit”（货号：01 102093 00）。 不管使用何种来源的空气，都必须保证气体供应的连续性，传送压力必须在4 ...