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SDS-PAGE测定蛋白质分子量及蛋白质的纯度鉴定

一、实验目的与原理 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现,如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS)大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合,即每克蛋白质结合1.4g的SDS-复合物都带上相同密度的负电荷,它的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,因而消除了蛋白质原有的电荷差别,使蛋白质分子电泳的迁移率主要 ...

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现代生物分离技术在多肽蛋白质分离纯化中的应用

蛋白质是生物体的重要组成部分,在现代生物制药领域有着重要的作用,本文介绍了现代生物分离技术反胶束萃取、双水相萃取和电泳在多肽蛋白质分离中的应用和现状。

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纯化全长/高纯度蛋白方法(Double-tag)

Protein表达是一个非常复杂的过程,因此很难预测表达的蛋白是否是可溶性的、包涵体形式还是部分降解的。为了预防各种可能的困难条件,在重组蛋白上导入两种Tag可以提供获得高纯度均质蛋白的灵活性。 蛋白含有两种不同亲和纯化Tag的重要原因: 纯化全长的蛋白 获得最高纯化的蛋白 适合变性或生理条件下纯化 优化的操作过程,可以直接从培养基中纯化蛋白 与Strep-tag®配合最有效的是6x ...

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Characterization of Phosphopeptides Using a Combination of Immobilized Metal Ion Affinity Media and Direct Analysis by MALDI-TOF-MS

Characterization of Phosphopeptides Using a Combination of Immobilized Metal Ion Affinity Media and Direct Analysis by MALDI-TOF-MS INTRODUCTION Phosphoproteins and peptides can be bound with high spe ...

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工业用液氯取样钢瓶的使用和维护

1.每次取样测定后,应把钢瓶内余氯放尽(真空抽取或碱液吸收),并用干燥氮气以1000ml/min的流量吹洗钢瓶,至瓶内无氯气(用氨水检验)。 2.每半年要清洗一次,并有称重记录。清洗时,先用水洗净,再用丙酮洗三次以上,每次用量约20ml,最后,在50~100℃的温度下,用干燥氮气以1000ml/min的流量吹洗钢瓶至干燥,此外,必须按《气瓶安全监察规程》规定执行。 3.使用单位有权按照本标准规定的 ...

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压缩气体钢瓶的维护

空气可以通过钢瓶、室内空气系统和小型压缩机来提供。当然钢瓶是最贵的选择,特别是在工作量很大的情况下就要频繁的更换钢瓶,这问题就尤为显著。如果使用压缩空气,就需要在仪器的输入端前安装过滤器和压力表。如果用户需要可以向varian公司订购“Air Service Unit”(货号:01 102093 00)。 不管使用何种来源的空气,都必须保证气体供应的连续性,传送压力必须在4 ...

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实验动物编号的常规方法

常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。 (一)颜料涂染 这种标记方法在实验室最常使用,也很方便。 经常应用的涂染化学药品有: ①、涂染红色:0.5%中性红或品红溶液。②、涂染黄色:3-5%苦味酸溶液。③、黑色:煤焦油的酒精溶液。④、涂染咖啡色:2%硝酸银溶液。 标记时用毛笔或棉签蘸取上述溶液,在动物体的不同部位涂上斑点,以示不同号码。编号的原则是:先左后右,从上到下。一般把涂在左前腿上的 ...

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直接凝集实验(Direct agglutination reaction)

颗粒性抗原(细菌、螺旋体、红细胞等)与相应的抗体血清混合后,在电解质参与下,经过一定时间,抗原抗体凝聚成肉眼可见的凝集块,这种现象称为凝集反应。血清中的抗体称为凝集素(Agglutinin),抗原称为凝集原(Agglutinogen)。 细菌或其他凝集原都带有相同的电荷(阴电荷),在悬液中相互排斥而呈均匀的分散状态。抗原与抗体相遇后,由于抗原和抗体分子表面存在着相互对应的化学基团,因而发生特异性 ...

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ELISPOT技术简介及原理(CTL)

ELISPOT 技术简介 ...

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植物组织培养及其在中草药研究中的运用

植物组织培养(Plant Tissue Culture)是应用无菌培养的方法培养植物的一个离体部分,也即是一种将自然环境中分离出来的植物细胞或组织放 入含有合成培养基的瓶中,在无菌条件下使之生长或发育的方法。这项工作自动控制50年代后期至今巳取得了很大的进展,如诱导培养胡萝卜的体细 胞分化成完整植株,由曼陀罗的花药培养形成了单倍体的植株。 &nbs ...

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凝集实验介绍

凝集反应是原生动物等颗粒抗原或表面覆盖抗原的颗粒状物质(如聚苯乙烯胶乳、炭素等),与相应抗体在电解质存在下的成团作用而引起的。在原虫等颗粒性抗原与相应抗体所产生的凝集反应中,参与反应的抗原称凝集原,抗体称为凝集素。 凝集反应的种类很多,但用于寄生虫病免疫反应诊断的凝集试验主要包括直接凝集试验和间接凝集试验,其共同特征是操作简便,反应快速,敏感性高;缺点是容易发生非特异性反应。所以在做凝集试验时,必 ...

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结核杆菌的培养基的配制及其计数

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Sucrose Fractionation of Castor Bean

Materials Castor beans Gradient former Sucrose solutions in 0.01 M EDTA pH 7.5 33% 44% 50% 57% 60% (w/v) ...

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Sedimentation Densities

Materials Table2 Density and refractive indexes of sucrose Table1 Densities of cell structures in sucrose Sucrose density fractions from Exercise “Sucrose Fractionation of Castor Bean&rd ...

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实验动物的捉拿和固定

捉拿和固定是动物实验操作技术中最基本最简单而又很重要的一项基本功。捉拿和固定各种动物的原则是:保证实验人员的安全,防止动物意外性损伤,禁止对动物采取粗暴动作。动物一般都是害怕陌生人接触其身体的,对于非条件性的各种剌激则更是进行防御性反抗。在捉拿、固定时,首先应慢慢友好地接近动物,并注意观察其表情,让动物有一个适应过程。捉拿的动作力求准确、迅速、熟练,力求在动物感到不安之前捉拿好动物。 (一)小鼠、 ...

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Equilibrium Density Gradient - Percoll

Materials Ultracentrifuge and swinging bucket rotor Percoll NaCl solutions with the following osmolarities:200 300 and 400 mill ...

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Low Speed Separaton of Cells

Materials Sepracell-MN tubes Clinical centrifuge with fixed angle rotor Phase contrast microscope Whole Blood Phosphate Buffered Saline (PBS) + 0.1% (w/v) Bovine Serum ...

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Separation of Cells by Velocity Sedimentation

It is possible to combine variations in density and size to allow for separation of cell populations within the earth's gravitational field i.e. without a centrifuge. A technique devised by Miller and ...

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实验鸭子的编号

实验鸭子编号方法

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实验动物编号标记方法

 动物在实验前常常需要作适当的分组,那么就要将其标记使各组加以区别。标记的方法很多,良好的标记方法应满足标号清晰、耐久、简便、适用的要求。

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