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组织培养再生的步骤

一、接种 组织培养的接种是指将灭过菌的材料,在无菌的情况下,切成小块,放入培养基的过程。科研、生产部门的接种工作,多在无菌室或超净工作台上进行,中学可制作接种箱,在箱内进行接种。接种的方法步骤如下: 1、在无菌室或接种箱中放好接种时所需要的酒精灯、贮存70%酒精和棉球的广口瓶、各种镊子、接种针、解剖刀、手术剪、火柴、培养基等。 2、在无菌室或接种箱内用紫外灯灭菌(无菌室照射20~50分钟,接种 ...

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厌氧菌的分离和培养

1 目的 1.1 了解厌氧微生物的生长特性 1.2 观察厌氧微生物(双歧杆菌)的形态特征 1.3 掌握厌氧微生物的滚管分离、培养与计数技术 2 原理 目前培养厌氧微生物的简便而又有效的技术包括有:厌氧箱培养技术;厌氧罐培养技术;厌氧袋培养技术;亨盖特厌氧滚管技术。这里介绍的是亨盖特厌氧滚管技术。亨盖特厌氧滚管技术是美国微生物学家亨盖特(Hungate)于1950年首次提出并应 ...

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厌氧培养

1.厌氧缸法。接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养出来。 2.厌氧袋(Bio-bag)即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气,内装气体发生管(有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿)、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后,尽量挤出袋内空气,然后密封袋口。先折断气体发生 ...

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袖珍式厌氧工作站 bugbox

·采用外源双瓶供气,一瓶为无氧混合气体,一瓶为氮气,使运作成本大为降低。 ·采用特殊处理的钯催化剂,省去了每次使用后的活化步骤,该催化剂可使用一年以上。 ·采用电子自动恒温恒湿系统。 ·转移闸系统可快速移入和移出样品。 ·采用EZEE SLEEVES裸手操作系统,避免使用刺激手腕的令人不舒服的橡胶袖套,尤其适用于对橡胶敏感的实验 ...

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无土栽培营养液配制

营养液的配方最好选用所栽作物专用的配方。如果专用配方找不到,可用霍格兰氏营养液的配方进行配制。 配制营养液时应按照以下方法进行: 1、在营养液的许多盐类中,以硝酸钙最容易和其它盐类起化合作用,如硝酸钙与硫酸钾相遇,容易产生硫酸钙沉淀,硝酸钙与磷酸盐相遇,也容易产生磷酸钙沉淀。因此,在配制营养液时,硝酸钙要单独溶解在1个容器里,稀释后才能和其它盐类混合在一起。 2、硝酸钙以外的其它大量元素和微 ...

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厌氧菌接种培养方法

厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌,必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂,或用物理、化学方法去除环境中的游离氧,以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基,牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多,可根据实际情况选用。厌氧缸法 接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养 ...

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培养箱温度失控处理措施

1.每天上班记录培养箱、冰箱的温度于温度记录本上,如发现普通培养箱的温度超过37℃(不包括37℃)或低于34℃(不包括34℃);真菌培养箱温度超过31℃(不包括31℃)或低于25℃(不包括25℃);冷藏冰箱的温度超过8℃(不包括8℃)或低于2℃(不包括2℃);冷冻冰箱的温度超过-10℃(不包括-10℃)或低于-30℃(不包括-30℃),应立即追溯其失控的时间和原因。 1.1如失控的原因可以马上纠正 ...

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Vicia Faba and Chemical Damage

Materials Growing root tips of the broad beanV. faba (2n=12) Solutions of chromosome-damaging agents listed in the introduction to this Chapter Reagents for Feulgen stain (Exercise 2.5) Oven at 60° ...

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Timing of Cycles

Materials Monolayer cultures grown in 75 mm culture flasks (Cells from Exercise 11.4 may be used or cultures of tetrahymena yeast or algae may be used.) H-thymidine with at least 4 µc/ml 0.36 c/ ...

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H-Thymidine Uptake by Cultured Cells

Materials Fibroblast cells in log phase growth Ca Mg free-phosphate buffered saline (PBSA) 5% (w/v) Glutaraldehyde (GTA) 2% (w/v) Perchloric Acid (PCA) Subbed slides (coated with chrom alum gelatin) a ...

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Ascaris Oogenesis

Materials Prepared slides of Ascaris megalocephala maturation Microscope Procedure 1.Place the slide(s) of Ascaris on the microscope and focus on the eggs within the body. Unlike the grasshopper testi ...

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Grasshopper Spermatogenesis

Materials Prepared longitudinal section of grasshopper testis Microscope Procedure 1.Place the slide on the microscope and with low power identify the apical end of the testis and the region where the ...

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实验用培养箱的种类与用途说明

培养箱是培养微生物的主要设备,可用于细菌、细胞的培养繁殖。其原理是应用人工的方法在培养箱内造成微生物和细胞、细菌生长繁殖的人工环境,如控制一定的温度、湿度、气体等。目前使用的培养箱主要分为三种:直接电热式培养箱、生化培养箱和二氧化碳培养箱。(一)电热式和隔水式培养箱 电热式和隔水式培养箱的外壳通常用石棉板或铁皮喷漆制成,隔水式培养箱内层为紫铜皮制的贮水夹层,电热式培养箱的夹层是用石棉或 ...

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Mitosis

Materials Prepared slide of Onion root tip Prepared slide of whitefish blastula Microscope Procedure 1.Obtain a slide of an onion root tip and examine it for the basic stages of mitosis. Refer to Figu ...

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巨噬细胞原代培养

巨噬细胞原代培养方法及步骤。

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原代神经细胞培养实验方法

原代神经细胞培养试验方法及步骤。

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神经胶质细胞培养

神经细胞(神经元)不易培养,只有在适宜情况下,如接种在胶原底层上,或加入神经生长因子和胶质细胞因子时,可出现一定程度的分化,长出突起等现象,但很难使之增殖。而神经胶质细胞是神经组织中比较容易培养的成分。 人、鼠等脑组织即可用于神经胶质细胞培养,不仅能获得生长的胶质细胞,也可形成能传代的二倍体细胞系。

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血管内皮细胞原代培养

内皮细胞易于从大血管分离培养成单层细胞,对于研究内皮细胞再生、肿瘤促血管生长因子(tumor angiogenesis factor,TAF)等有很大价值。 以人脐带静脉灌流消化法为例说明培养方法及步骤。

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PCR基础知识

PCR的最早设想 核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。 ...

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PCR技术简介

一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。这也是分子生物医学令人震撼的一例。 何谓PCR...

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