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H-Thymidine Uptake by Cultured Cells

Materials Fibroblast cells in log phase growth Ca Mg free-phosphate buffered saline (PBSA) 5% (w/v) Glutaraldehyde (GTA) 2% (w/v) Perchloric Acid (PCA) Subbed slides (coated with chrom alum gelatin) a ...

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Ascaris Oogenesis

Materials Prepared slides of Ascaris megalocephala maturation Microscope Procedure 1.Place the slide(s) of Ascaris on the microscope and focus on the eggs within the body. Unlike the grasshopper testi ...

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Grasshopper Spermatogenesis

Materials Prepared longitudinal section of grasshopper testis Microscope Procedure 1.Place the slide on the microscope and with low power identify the apical end of the testis and the region where the ...

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实验用培养箱的种类与用途说明

培养箱是培养微生物的主要设备,可用于细菌、细胞的培养繁殖。其原理是应用人工的方法在培养箱内造成微生物和细胞、细菌生长繁殖的人工环境,如控制一定的温度、湿度、气体等。目前使用的培养箱主要分为三种:直接电热式培养箱、生化培养箱和二氧化碳培养箱。(一)电热式和隔水式培养箱 电热式和隔水式培养箱的外壳通常用石棉板或铁皮喷漆制成,隔水式培养箱内层为紫铜皮制的贮水夹层,电热式培养箱的夹层是用石棉或 ...

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Mitosis

Materials Prepared slide of Onion root tip Prepared slide of whitefish blastula Microscope Procedure 1.Obtain a slide of an onion root tip and examine it for the basic stages of mitosis. Refer to Figu ...

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巨噬细胞原代培养

巨噬细胞原代培养方法及步骤。

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原代神经细胞培养实验方法

原代神经细胞培养试验方法及步骤。

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神经胶质细胞培养

神经细胞(神经元)不易培养,只有在适宜情况下,如接种在胶原底层上,或加入神经生长因子和胶质细胞因子时,可出现一定程度的分化,长出突起等现象,但很难使之增殖。而神经胶质细胞是神经组织中比较容易培养的成分。 人、鼠等脑组织即可用于神经胶质细胞培养,不仅能获得生长的胶质细胞,也可形成能传代的二倍体细胞系。

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血管内皮细胞原代培养

内皮细胞易于从大血管分离培养成单层细胞,对于研究内皮细胞再生、肿瘤促血管生长因子(tumor angiogenesis factor,TAF)等有很大价值。 以人脐带静脉灌流消化法为例说明培养方法及步骤。

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PCR基础知识

PCR的最早设想 核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。 ...

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PCR技术简介

一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。这也是分子生物医学令人震撼的一例。 何谓PCR...

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胶乳凝集实验及致敏胶乳试剂制备方法

一、胶乳凝集试验方法 1.胶乳凝集试验:先加受检标本,滴于反应板上,再加致敏胶乳1滴,连续摇动2-3min后观察结果。胶乳凝集者为阳性,不凝集者为阴性。同时需做阴、阳性对照。 2.胶乳凝集抑制试验:在反应板上先加受检标本1滴,再加1滴配对抗血清混匀,最后加1滴致敏胶乳悬液,连续摇动2-3min观察结果。胶乳凝集者为阴性,不凝集者为阳性。同时需做阴、阳性对照。 二、致敏胶乳试剂的制备(物理吸附法) ...

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间接凝集实验及致敏红细胞制备方法

将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的颗粒载体上,然后与相应的抗体结合,也可出现颗粒载体的凝集现象,称为间接凝集反应。间接凝集反应比直接凝集反应敏感性为高,可用于微量抗体或抗原的检查。 一、 间接血球凝集试验 间接血球凝集试验是根据红血球表面的吸附作用而建立起来的。将细菌可溶性抗原提出使之吸附于红血球表面,此时红血球即称为“致敏红血球”。这种致敏的红血球具有细菌的抗原性,与相应 ...

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酵母菌种如何鉴定

酵母菌种鉴定的方法

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免疫组化技术简单介绍

免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究的一种方法。 众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度 ...

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Miltenyi的柱子回收方法

准备使用回收的柱子时,抗体孵育始,即将柱子置于新鲜的75%酒精中,柱的容器内盛满酒精,自动流下,既消毒,又de-gas,去除气泡十分关键。洗抗体时,即开始洗柱子,将回收柱架于消毒过的长试管口上。换新的酒精自然滴下,换PBS+0.1%FBS冲洗之,最后用MACS Buffer冲洗。柱子准备完毕,准备上柱的细胞也就同时准备好了。回收方法:将长试管注满PBS,回抽柱子的活塞,倒出回抽液。倒入新的PBS, ...

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磁性微球在生物学中的应用

■ 磁性微球在核酸纯化上的应用   核 ...

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Miltenyi磁柱选择及标记问题

(主要针对Miltenyi产品)一、标记策略用MACS进行磁分离,最重要的参数就是高质量的标记。对阳性细胞的标记应尽可能强,而背景要尽可能低,才能获得对磁标记的阳性细胞和未标记的阴性细胞的最好分辨。有多种不同的标记策略可供参考:(1)直接标记:直接标记是最快速和最特异的磁标记方法。(2)间接标记:几乎所有的单克隆抗体或多克隆抗体都可以用于间接标记。用无标记的、生物素化的或FITC、PE或APC结合 ...

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磁珠分选细胞注意事项

磁珠分选细胞注意事项:1.待分选细胞中如有贴壁细胞,建议在分选前先贴壁培养去除,或者提高EDTA浓度; 2.抗体包被磁珠对死细胞常有非特异性结合。因而分选前去除死细胞; 3.新鲜分离骨髓细胞,先用胶原酶、DNA酶、胰酶联合消化,可使细胞团块解聚,从而提高分离效率。 4.上分离柱前,充分振荡,混悬细胞,打散细胞团块; 5.用分离柱分选,应用真空抽滤水,减少水中气泡,使分离柱不被气泡阻滞; 6.细胞悬 ...

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磁珠法自动核酸提取

核酸研究是现代生物学、医学研究中的重要课题。核酸作为遗传信息的携带者,是基因表达的物质基础,除了在生物体正常的生长、发育、和繁殖等生命活动中具有十分重要的作用外,它与生命的异常情况,如肿瘤发生、放射损伤、遗传疾病等也有密切关系。因此核酸是现代生物学、医学研究中的重要课题。无论是进行核酸结构与功能的研究,还是进行基因工程、蛋白质工程等的研究,首先都需要对核酸进行分离纯化。传统的核酸分离技术包含沉淀, ...

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