植物组织培养(Plant Tissue Culture): 是指通过无菌操作分离植物体的一部分(外植体explant),接种到培养基上,在人工控制的条件下(包括营养、激素、温度、光照、湿度)进行培养,使其产生完整植株的过程。(主要有原生质体(Protoplast),悬浮细胞,组织(愈伤组织Callus、茎尖分生组织),器官(胚,花药,子房,根和茎)的培养。其中最常见的是愈伤组织培养。 愈伤组织(C ...
电烘箱的种类很多,从家用食品电烘箱到工业用的烘房隧道烘箱等。原理与作用就是通过加热使水份蒸发及加热灭菌,或烘烤食品等。间单的说就是用可调可控的加热器在特定的环境下对加热物品进行定时定温加热,家用食品电烘箱较间单。加热器一般由电热丝或电热石英管等发热。用定时器及可调温控开关对加热进行控制。另一是超温保护,一般由弹跳式温控开关来完成,许多微波炉也整合了烘箱的部份工业用的较复杂,其原理相同只 ...
(一)温度/时间键可进行温度与时间切换 1) 温度设定:按一下温度/时间键,表的温度设定指示灯亮。设定键进入SV状态设定显示窗三个数字中有一个数闪烁再按移位键( △ ) 将闪烁数位移至需设定位,然后按∨或∧键即可改变温度设定所需温度(最小值0),最后按下设定键将设定值存入单片机,此时左显示窗测量温度,右显示窗口显示设定温度。 2) 时间设定:按一下温度/时间键,仪表的时间设定指示灯亮 ...
恒温箱是实验室常用加热设备之一。按最高使用温度分为干燥箱(又称烘箱,烤箱),保温箱(又称培养箱)两类。干燥箱最高温度300℃,用以烘干样品、药品、容器等的水分,灭菌及零配件的热处理,功率1000~4000W。保温箱最高使用温度60℃,用以培养、孵化等,功率500W。 按特殊用途恒温箱又可分为真空干燥箱、隔水式恒温箱、鼓风干燥箱、防爆干燥箱等。 恒温箱一般由箱体、发热体(镍铬电热丝)、测温仪或温度计 ...
一、愈伤组织的培养 一般来说,从接种外植体到出现愈伤组织,需要经过2周时间。2周之内就可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时,恒温箱的门应该关闭,不必见光,因为在无光条件下愈伤组织长得更快。2周以后,由于培养基中的营养成分已接近耗尽,必须更换培养基,进行继代培养。 二、愈伤组织的继代培养 进行继代培养所用的培养基,和培养愈伤组织所用的培养基相同。在严格的无菌条件 ...
1、无机营养物 无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成。大量元素中,氮源通常有硝态氮或铵态氮,但在培养基中用硝态氮的较多,也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。钾是培养基中主要的阳离子,在近代的培养基中,其数量有逐渐提高的趋势。而钙、钠、镁的需要则较少。培养基所需的钠和氯化物,由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁。培养基中的铁离 ...
1、根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。 2、将1中称好的琼脂加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。 3、将1中所取的各种物质(包括蔗糖),加入煮好的琼脂中,再加水至1000毫升,搅拌均匀,配成培养基。 4、用1N的氢氧化钠或盐酸,滴入3中的培养基里,每次只滴几滴,滴后搅拌均匀 ...
组织培养是否成功,在很大程度上取决于对培养基的选择。不同培养基有不同特点,适合于不同的植物种类和接种材料。开展组织培养活动时,应对各种培养基进行了解和分析,以便能从中选择使用。 培养基中的激素种类和数量,随着不同培养阶段和不同材料而有变化,因此各配方中均不列入。几种常用培养基如下: MS培养基 MS培养基是目前普遍使用的培养基。它有较高的无机盐浓度,对保证组织生长所需的 ...
接种用的材料表面,常常附有多种多样的微生物,这些微生物一旦带进培养基,就会迅速滋生,使实验前功尽弃。因此,材料在接种前必须进行灭菌。灭菌时,既要将材料上附着的微生物杀死,同时又不能伤及材料。因此,灭菌采用何种药剂,什么浓度,处理多长时间,均应根据材料对药剂的敏感情况仔细敲定。 经常使用的灭菌剂有次氯酸钠、过氧化氢、漂白粉、溴水和低浓度的氯化汞等。使用这些灭菌剂,都能起到表面杀菌的作用。但氯化汞灭 ...
1、使用方法 1.1把电源开关拨至“l”处,此时电源指示灯亮,控温仪上有数字显示; 1.2温度设定 a. 当所需加熟温度与设定温度相同时不无原则设定,反之则需重新设定。先按控温仪的功能键“SET”进入温度设定状态,SV设定显示一闪一闪,再按移位键“◢ ”配合加键“△”或减键“&rdqu ...
一、操作室厌氧环境形成 1、按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室内放入二个无毒塑料袋。 2、通电源开照明灯,开控温仪,调节所需温度及安全温度。 3、操作室内放入1000g钯粒(封闭)和500g干燥剂并放入美兰指示剂(封闭)。 4、 关紧取样室内外门,并抽真空校验。 5、操作室内第一次置换(氮气置换): (1)先用橡皮管插入操作室内进气口,另一头插入塑料袋。 (2)接通氮气进气路,打开氮气控 ...
一、接种 组织培养的接种是指将灭过菌的材料,在无菌的情况下,切成小块,放入培养基的过程。科研、生产部门的接种工作,多在无菌室或超净工作台上进行,中学可制作接种箱,在箱内进行接种。接种的方法步骤如下: 1、在无菌室或接种箱中放好接种时所需要的酒精灯、贮存70%酒精和棉球的广口瓶、各种镊子、接种针、解剖刀、手术剪、火柴、培养基等。 2、在无菌室或接种箱内用紫外灯灭菌(无菌室照射20~50分钟,接种 ...
1 目的 1.1 了解厌氧微生物的生长特性 1.2 观察厌氧微生物(双歧杆菌)的形态特征 1.3 掌握厌氧微生物的滚管分离、培养与计数技术 2 原理 目前培养厌氧微生物的简便而又有效的技术包括有:厌氧箱培养技术;厌氧罐培养技术;厌氧袋培养技术;亨盖特厌氧滚管技术。这里介绍的是亨盖特厌氧滚管技术。亨盖特厌氧滚管技术是美国微生物学家亨盖特(Hungate)于1950年首次提出并应 ...
1.厌氧缸法。接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养出来。 2.厌氧袋(Bio-bag)即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气,内装气体发生管(有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿)、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后,尽量挤出袋内空气,然后密封袋口。先折断气体发生 ...
·采用外源双瓶供气,一瓶为无氧混合气体,一瓶为氮气,使运作成本大为降低。 ·采用特殊处理的钯催化剂,省去了每次使用后的活化步骤,该催化剂可使用一年以上。 ·采用电子自动恒温恒湿系统。 ·转移闸系统可快速移入和移出样品。 ·采用EZEE SLEEVES裸手操作系统,避免使用刺激手腕的令人不舒服的橡胶袖套,尤其适用于对橡胶敏感的实验 ...
营养液的配方最好选用所栽作物专用的配方。如果专用配方找不到,可用霍格兰氏营养液的配方进行配制。 配制营养液时应按照以下方法进行: 1、在营养液的许多盐类中,以硝酸钙最容易和其它盐类起化合作用,如硝酸钙与硫酸钾相遇,容易产生硫酸钙沉淀,硝酸钙与磷酸盐相遇,也容易产生磷酸钙沉淀。因此,在配制营养液时,硝酸钙要单独溶解在1个容器里,稀释后才能和其它盐类混合在一起。 2、硝酸钙以外的其它大量元素和微 ...
厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌,必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂,或用物理、化学方法去除环境中的游离氧,以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基,牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多,可根据实际情况选用。厌氧缸法 接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养 ...
1.每天上班记录培养箱、冰箱的温度于温度记录本上,如发现普通培养箱的温度超过37℃(不包括37℃)或低于34℃(不包括34℃);真菌培养箱温度超过31℃(不包括31℃)或低于25℃(不包括25℃);冷藏冰箱的温度超过8℃(不包括8℃)或低于2℃(不包括2℃);冷冻冰箱的温度超过-10℃(不包括-10℃)或低于-30℃(不包括-30℃),应立即追溯其失控的时间和原因。 1.1如失控的原因可以马上纠正 ...
Materials Growing root tips of the broad beanV. faba (2n=12) Solutions of chromosome-damaging agents listed in the introduction to this Chapter Reagents for Feulgen stain (Exercise 2.5) Oven at 60° ...
Materials Monolayer cultures grown in 75 mm culture flasks (Cells from Exercise 11.4 may be used or cultures of tetrahymena yeast or algae may be used.) H-thymidine with at least 4 µc/ml 0.36 c/ ...