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巨噬细胞原代培养

巨噬细胞原代培养方法及步骤。

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原代神经细胞培养实验方法

原代神经细胞培养试验方法及步骤。

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神经胶质细胞培养

神经细胞(神经元)不易培养,只有在适宜情况下,如接种在胶原底层上,或加入神经生长因子和胶质细胞因子时,可出现一定程度的分化,长出突起等现象,但很难使之增殖。而神经胶质细胞是神经组织中比较容易培养的成分。 人、鼠等脑组织即可用于神经胶质细胞培养,不仅能获得生长的胶质细胞,也可形成能传代的二倍体细胞系。

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血管内皮细胞原代培养

内皮细胞易于从大血管分离培养成单层细胞,对于研究内皮细胞再生、肿瘤促血管生长因子(tumor angiogenesis factor,TAF)等有很大价值。 以人脐带静脉灌流消化法为例说明培养方法及步骤。

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PCR基础知识

PCR的最早设想 核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。 ...

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PCR技术简介

一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。这也是分子生物医学令人震撼的一例。 何谓PCR...

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胶乳凝集实验及致敏胶乳试剂制备方法

一、胶乳凝集试验方法 1.胶乳凝集试验:先加受检标本,滴于反应板上,再加致敏胶乳1滴,连续摇动2-3min后观察结果。胶乳凝集者为阳性,不凝集者为阴性。同时需做阴、阳性对照。 2.胶乳凝集抑制试验:在反应板上先加受检标本1滴,再加1滴配对抗血清混匀,最后加1滴致敏胶乳悬液,连续摇动2-3min观察结果。胶乳凝集者为阴性,不凝集者为阳性。同时需做阴、阳性对照。 二、致敏胶乳试剂的制备(物理吸附法) ...

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间接凝集实验及致敏红细胞制备方法

将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的颗粒载体上,然后与相应的抗体结合,也可出现颗粒载体的凝集现象,称为间接凝集反应。间接凝集反应比直接凝集反应敏感性为高,可用于微量抗体或抗原的检查。 一、 间接血球凝集试验 间接血球凝集试验是根据红血球表面的吸附作用而建立起来的。将细菌可溶性抗原提出使之吸附于红血球表面,此时红血球即称为“致敏红血球”。这种致敏的红血球具有细菌的抗原性,与相应 ...

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酵母菌种如何鉴定

酵母菌种鉴定的方法

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免疫组化技术简单介绍

免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究的一种方法。 众所周知,抗体与抗原之间的结合具有高度 ...

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Miltenyi的柱子回收方法

准备使用回收的柱子时,抗体孵育始,即将柱子置于新鲜的75%酒精中,柱的容器内盛满酒精,自动流下,既消毒,又de-gas,去除气泡十分关键。洗抗体时,即开始洗柱子,将回收柱架于消毒过的长试管口上。换新的酒精自然滴下,换PBS+0.1%FBS冲洗之,最后用MACS Buffer冲洗。柱子准备完毕,准备上柱的细胞也就同时准备好了。回收方法:将长试管注满PBS,回抽柱子的活塞,倒出回抽液。倒入新的PBS, ...

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磁性微球在生物学中的应用

■ 磁性微球在核酸纯化上的应用   核 ...

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Miltenyi磁柱选择及标记问题

(主要针对Miltenyi产品)一、标记策略用MACS进行磁分离,最重要的参数就是高质量的标记。对阳性细胞的标记应尽可能强,而背景要尽可能低,才能获得对磁标记的阳性细胞和未标记的阴性细胞的最好分辨。有多种不同的标记策略可供参考:(1)直接标记:直接标记是最快速和最特异的磁标记方法。(2)间接标记:几乎所有的单克隆抗体或多克隆抗体都可以用于间接标记。用无标记的、生物素化的或FITC、PE或APC结合 ...

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磁珠分选细胞注意事项

磁珠分选细胞注意事项:1.待分选细胞中如有贴壁细胞,建议在分选前先贴壁培养去除,或者提高EDTA浓度; 2.抗体包被磁珠对死细胞常有非特异性结合。因而分选前去除死细胞; 3.新鲜分离骨髓细胞,先用胶原酶、DNA酶、胰酶联合消化,可使细胞团块解聚,从而提高分离效率。 4.上分离柱前,充分振荡,混悬细胞,打散细胞团块; 5.用分离柱分选,应用真空抽滤水,减少水中气泡,使分离柱不被气泡阻滞; 6.细胞悬 ...

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磁珠法自动核酸提取

核酸研究是现代生物学、医学研究中的重要课题。核酸作为遗传信息的携带者,是基因表达的物质基础,除了在生物体正常的生长、发育、和繁殖等生命活动中具有十分重要的作用外,它与生命的异常情况,如肿瘤发生、放射损伤、遗传疾病等也有密切关系。因此核酸是现代生物学、医学研究中的重要课题。无论是进行核酸结构与功能的研究,还是进行基因工程、蛋白质工程等的研究,首先都需要对核酸进行分离纯化。传统的核酸分离技术包含沉淀, ...

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磁性微球在生物学和医学的应用

免疫磁性微球在生物医学方面的应用(1)免疫磁性微球在自身骨髓移植中的应用 在过去10多年中,高剂量化疗后给予自身骨髓移植(ABMT)已经成为某些患有急性白血病、何杰金氏淋巴瘤(NHL)、神经母细胞瘤及wilms肿瘤的可选疗法。最近,ABMT用于小细胞肺癌、睾丸癌和乳腺癌也取得了饿令人鼓舞的结果。但是,ABMT也有限制条件,那就是肿瘤转移细胞有可能累及骨髓。因此,在体外清除骨髓中的癌细胞是保证ABM ...

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磁性微球的制备

目前磁性微球在生物医药方面的应用以免疫磁性微球为代表,发展较快,已有产品上市,而且有很多成功的应用。磁性纳米材料是构成磁性微球的重要组成部分,因此磁性微球的应用也就是磁性纳米材料的应用。1 磁性纳米材料的制备与性能常用的磁性材料为三氧化二铁、四氧化三铁、铁钴合金等。这些磁性材料具有较好的磁响应性,采用适当的方式可以方便地得到这些大小在纳米尺度的磁性材料。例如:取一定量的磁性材料分别溶于适量的蒸馏水 ...

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免疫磁性微球的制备和应用

免疫磁性微球(Immunomagnctic beadsIMB) 是免疫学和磁载体技术结合而发展起来的一类新型材料。IMB是包被有单克隆抗体的磁性微球,可与含有相应抗原的靶物质特异性地结合形成新的复合物。通过磁场时,这种复合物可被滞留,与其它组分相分离该过程称为免疫磁性分离法(Immunomagnctic Separation)。免疫磁性分离简便易行,分离纯度高,保留靶物质活性,且高效、快速、低毒, ...

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免疫磁性微球研究进展

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免疫磁性微球在分离细胞中的应用

免疫磁性微球(Immunomagnetic Microspheres,IMMS),或称免疫磁珠(Immunomagnetic Beads,IMB),是表面结合有单克隆抗体的磁性微球。由于需要在磁性微球的表面结合上适当的抗体,因此要求所用的磁性微球能通过其表面的化学基因与单抗结合,或有较大的表面吸附力能与单抗牢固结合。交联聚苯乙烯微球强度高,表面易进行化学修饰,是比较理想的制备免疫磁性微球的骨架材料 ...

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