一、原理 定量的抗原加入到含有一定量的相应抗体的琼脂糖凝胶中,在电场作用下,引起抗原抗体的迁移和相互反应,当比例合适时形成肉眼可见的沉淀峰,由于电泳继续进行,样品孔不断有抗原移向抗原抗体复合物的沉淀峰,因抗原过剩使沉淀溶解而在前面又形成新的抗原抗体复合物的沉淀峰。如此反复向前,直到再无游离抗原而反应终止,形成上行火箭状的沉淀峰,其沉淀峰高度和抗原的浓度成正比,与同样条件下的已知浓度的抗原血清比较, ...
细胞培养常见问题及解答
①电泳RNA 所用器械如制胶的模具、梳子、电泳槽等用肥皂粉洗干净后用双蒸水冲洗二遍后在室温晾干备用。 ②用新的1XTBE 配制1. 2 %琼脂糖凝胶倒胶时溴化乙锭(E直接加入凝胶中。 ③制备好的琼脂糖凝胶板放入电泳槽后再加入经高压灭菌过的1XTBE 液面只能刚好同胶面平齐缓冲液不要淹过胶面。 ④点样时样品RNA 每10μl 加入2μl 上样缓冲液上样缓冲液是用DEPC 处理的水配制的5 ...
醋酸纤维素薄膜是由醋酸纤维素加工制成的。醋酸纤维素薄膜作为是电泳支持体,有以下优点: ①电泳后区带界限清晰; ②通电时间较短(二十分钟至一小时); ③它 对各种蛋白质(包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都几乎完全不吸附,因此无 拖尾现象; ④对染料也没有吸附,因此不结合的染料能完全洗掉,无样品处几乎完全 无色。它的电渗作用虽高但很均一,不影响样品的分离效果,由于醋酸纤维素薄膜吸 水量较低,因此必 ...
HBC裸鼠移植模型的建立包括活检取材的HBC标本和细胞株,后者应用较广泛。本贴主要讨论后者,算是抛砖了! 1、人乳腺癌细胞株的选择 目前人乳腺癌细胞建株的癌细胞较多,本人曾接触过细胞株总结如下 ER(+):MCF-7(来源:乳腺腺癌)ZR-75-30(乳腺导管癌)T47D(乳腺导管癌)ZR-75(乳腺腺癌) ER(-):MDA-MB-435s(乳腺导管癌)MDA-MB-435(乳腺导管癌)SK-B ...
卡槽的清洁 松开固定卡槽前方Holder的螺丝,用羊毛刷及ddH2O清洁卡槽,然后用干净的刷子将其擦干,如果可以的话,可以用异丙醇,甲醇或者乙醇代替水进行清洁,这样保存的时间较长。 压力电极的清洁 吸入端电极的清理非常重要,利用甲醇,异丙醇,或者乙醇清洁内部及其顶端。在电极内部小孔的顶部涂上一层薄薄的润滑油进行有效的防护。压力电极底部边缘的两个小孔需要用羊毛刷和水每个月进行清洁。 毛细管卡槽的清洁 ...
准备工作 1. 毛细管的制备: ① 剪略长于需要长度的毛细管(使用专用的裁剪纱布),断端利用镊子小心移除。 ② 烧窗:从毛细管进液端开始到实验者需要长度的位置烧窗,窗口尽量小,过程中可用防护工具对窗口两端的毛细管进行防护,烧好的窗需用粘有酒精的棉花擦拭。 注:检测的有效长度为从毛细管进液端到检测窗之间的距离,这个距离一般根据实验者的需要自己掌握。 ③ ...
用户:请就电泳仪电源的基本性能做一介绍。 工程师:在电脑型电泳仪电源中可分为两类:精简型和多用型,精简型均为双稳型,而多用型都是三稳(三恒)型。无论有几种稳定功能,电泳仪电源在实际工作时只能稳其中一种参数,至于稳哪一种参数,要看电泳仪电源的设定以及电泳仪的等效负载电阻而定。 电泳仪电源输出的所有参数根据其型号的不同都有一个特定的工作范围,如果实际需要超过这一范围,就应当选择能够满足使用的另外型号的 ...
The technique described here is a slight modification (March 1997) of methods presented in: Nagy A. J. Rossant. 1993. Production of completely ES cell-derived fetuses. In : Gene Targeting: A Practical ...
使用方法 1、首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接,注意极性不要接反。2、电泳仪电源开关调至关的位置,电压旋钮转到最小,根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。 3、接通电源,缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止,设定电泳终止时间,此时电泳即开始进行。4、工作完毕后,应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状态,并拨出电泳插头。注意事项 1、 ...
1、首先确定仪器电源开关应处于关闭状态。 2、连接电源线,确定电源插座是否有接地保护。 3、将黑红两种颜色的电极线对应插入仪器输出插口,并与电泳槽相对应插口连接好. (如果发现电极插头与插口之间接触较松,可以用小改锥将插头的簧片向外拨一下)。 4、确定电泳槽中的试剂配制是否符合要求。 5、用电压调节旋钮或电流调节旋钮调到所需电压或电流。如果不熟悉如何预置电压电流,可以先确定是恒压输出,还是恒流输出 ...
(一)原理 交叉免疫电泳是把琼脂平板电泳和火箭电泳结合起来的一种方法。先将抗原样品在琼脂凝胶中进行电泳分离,然后使已分开的各抗原成分与原泳动方向呈90度角的方向泳向含抗体的琼脂凝胶中,于是该抗原样品中的各个抗原成分和它相对应的抗体依次形成若干锥形沉淀线,根据沉淀线的位置及面积(或高度)可确定该抗原的质和量。 此试验可以用来鉴定抗原,即与标准抗原抗体系统相比较,就可知待测样品中抗原的质和量。此法也 ...
一、使用范围 ACS2000高效毛细管电泳仪系统具有高效、快速、经济、进样量小、灵敏度高等优点,可广泛应用于环境保护、生物化学、医学卫生、临床检测、食品卫生、药品检测、农业化学等 领域的生产、教学和科学研究。 二、操作程序 1、接通电源,仪器预热30分钟。 2、将毛细管的内壁用相应的溶液清洗。 3、选择所需的工作参数。 4、进样前先给仪器跑基线,基线平稳后再进样。 5、实验结束后关闭电源,并清洗毛 ...
1、接好电源线并确定与有接地保护的电源插座相连。 2、按颜色接好电源槽和电泳仪的连接导线,并上好电泳样品。 3、开启电源开关。 4、此时数字显示屏交替显示“dyy”和“2c”字样,然后显示上次工作的设定值,可直接启动输出。 5、若要改变其数值可按上下键调节,若需持续改变,可按住按键不放松,当达到所需数字时松开即可。 6、希望查看并设定电流和定时时间, ...
电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两大类,自由界面电泳不需支持物,如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电泳目前已很少使用。而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物,常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶-G薄层等,分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳。所谓电泳,是指带电粒子在电场中的运动,不同物质 ...
如何提高脑缺血的成功率? 经常有朋友费了九牛二虎之力,做了几个大鼠MCAO模型,第二天一看,个个活蹦乱跳,毫无脑缺血症状,当场晕。不成功的主要原因是栓线插入深度不够,即栓线的前端未进入大脑前动脉(ACA),拴线的粗细倒是次要的,0.20-0.26mm均可。因此,保证栓线进入ACA并阻断对侧来的血流,而又不刺破血管是重中之重。 如图1尼龙线光滑的末端,不仅大大减轻了插线对血管内皮的损伤,降低了刺穿血 ...
细胞差异和分化,细胞生长和增殖。
检索途径 在进行文献检索时,我们可根据文献的内部特征或外部特征进行检索。 文献的内部特征是指文献所论及事物,所提出的问题,涉及的基本概仿即主题以及文 献内容所属的学科范围都是文献的内部特征; 文献的外部特征包括题名,作者,作者单经以及某种特殊文献自身的特征标识。如专 种文献的专利另科技报告的报告号,标准文献的标准号等等。 分类途经:从学科角度将文献内容划分到某一学科内,根据文献内容所属的类检索文 ...
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。 一、污染原因 (一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。 (二 ...
制备好免疫胶体金后,还需要将其稀释到一定浓度,并吸附于特殊的惰性介质中才能够最终制成产品。一般来说,特殊的介质常用的是玻璃纤维或无纺布。玻璃纤维和无纺布本身一般是疏水的,胶体金产业一般采用表面活性剂预处理过的玻璃纤维或无纺布,通常配方为1%Tween20+适量PVA。介质处理完成后,免疫胶体金稀释液的配伍才是最关键的。现总结原则如下: 1、合适的离子种类和强度 免疫胶体金毕竟是含有生物活性分子,应 ...