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293细胞是腺病毒载体的包装细胞。腺病毒是继逆转录病毒后用于基因治疗研究的热门载体。直接将腺病毒载体导入人体内表达目的基因，治疗恶性肿瘤，心血管疾病或一些遗传疾病已取得可喜进展；利用腺病毒载体在包装细胞 293中表达分泌性蛋白质，如蛋白酪氨酸激酶 1C等亦成为生产重组蛋白的一条途径。因此完善 293细胞的大规模培养技术具有越来越重要的市场意义。哺乳细胞的大规模培养方式有三种：贴壁培养，微载体培养， ...

一、组织处理 恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件，也是决定染色成败的内部因素，在组织细胞材料准备的过程中，不仅要求保持组织细胞形态完整，更要保持组织细胞的抗原性不受损或弥漫，防止组织自溶。如果出现自溶坏死的组织，抗原已经丢失，即使用很灵敏的检测抗体和高超的技术，也很难检出所需的抗原，反而往往由于组织的坏死或制片时的刀痕挤压，在上述区域易出现假阳性结果。 1. 组织及时取材和固定 ...

支原体菌株来源：M.Arginini ATCC23838 精氨酸支原体M.FermentaneATCC19989发酵支原体M.SalivariumATCC23064唾液支原体 ...

细胞株若受到细菌、真菌、支原体、或是特定病毒等之污染时，会严重的影响实验的结果。而细菌、真菌等之微生物污染时，较易自培养基等的外观变化察觉。但是若受到支原体之污染时，细胞之外观较无明显变化，但是其污染会造成细胞之生长速率缓慢、细胞产生病变之型态改变等等变化。 各国细胞库支原体污染的统计表，如下：国家　 受支原体污染(%) 报告年度USA－FDA 15 1993(past 30 years)USA－ ...

一、血液的采集 常用的采血方法有割（剪）尾采血、眼眶静脉丛采血、断头采血、心脏采血、颈静脉（动脉）采血、股动脉（静脉）采血、耳静脉采血、前肢头静脉才学、后肢小静脉采血等。 二、尿液的采集 实验动物的尿液常用代谢笼采集，也可通过其他装置来采集。 （一）用代谢笼采集尿液 代谢笼用于收集实验动物自然排出的尿液，是一种特别设计的为采集实验动物各种排泄物的密封式饲养笼，有的代谢笼除可收集尿液外，又可收集粪便 ...

由于免疫组化具有特异性强、灵敏度高、定位准确等特点，且能将形态研究与功能研究有机地结合在一起，所以，这门新技术已被广泛地应用于生物学和医学研究的许多领域。在病理学研究中，免疫组化技术的作用和意义更为重要。以肿瘤研究为例，在免疫组化技术出现以前，对肿瘤的诊断和分类还局限于细胞水平，而引入免疫组化技术后，则使研究的深度提高到了生物化学水平、分子水平。近年来，伴随基因探针研究而兴起的核酸分子原位杂交技术 ...

一、免疫组化技术的基本原理 应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。 众所周知，抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半抗原去免疫 ...

Day -1 Pass ES cells at normal density on gelatinized plate to free the culture of contamination fibroblast cells. Day 1 Trypsinized the cells as for normal passaging until the colonies li ...

Day -1 Pass ES cells at normal density on gelatinized plate to free the culture of contamination fibroblast cells. Day 1 Trypsinized the cells as for normal passaging until the colonies li ...

Day -1 Pass ES cells at normal density on gelatinized plate to free the culture of contamination fibroblast cells. Day 1 Trypsinized the cells as for normal passaging until the colonies li ...

1. Treat 10 cm tissue culture plates with 0.1% gelatin for at least two hours before use. 2. Sacrifice the pregnant female mouse (day 13 or 14 p.c.) by cervical dislocation. Dissect out the uterine h ...

Three weeks prior to embryonic fibroblast isolation a PGK-neo male mouse is mated to a heterozygote female. 13.5 days to 14.5 days after the plug is observed sacrifice the pregnant female either by ce ...

首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接，注意极性不要接反。 电泳仪电源开关调至关的位置，电压旋钮转到最小，根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。 接通电源，缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止，设定电泳终止时间，此时电泳即开始进行。 工作完毕后，应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状态，并拨出电泳插头。 注意事项： 电泳仪通电进入工作状态后，由于不同介质支持物的电阻值不同，电泳时 ...

试剂及材料： 1）PBS 2）0.8%正常熔点凝胶（PBS配制） 3）0.6％低熔点凝胶（PBS配制） 4）毛玻璃片 5）盖玻片 6）碱性裂解液（2.5mol/ ...

免疫电泳 一、操作步骤 1.取一块干净的玻璃板，用少量75%乙醇冲洗，晾干后置于水平台，将1%琼脂糖融化，56℃水浴中保温。 2.将琼脂糖铺于玻璃板上，厚度约为1㎜。凝固后，打孔。 3.在孔内加入抗原，其中一孔内加电泳指示剂。 4.将凝胶板放在电泳槽中进行电泳，确定电泳时间。 5.电泳后在凝胶板上沿电泳方向平行挖2㎜宽的长槽，加入抗血清。 二、实验结果 将凝胶板放入湿盒，室温放置12小时，可观察在 ...

血清的热灭活是很多培养者感兴趣的话题，价格不菲的血清中含有诸如生长因子，维生素，氨基酸等珍贵物质，而将它们置于50℃以上的温度长达30分钟是完全没有必要的。尽管如此，在大多数实验室之中血清的热灭活还是作为常规来执行，多数实验者并没有考虑热处理对血清中的生长因子，氨基酸等成分带来的负面影响，在我们的技术热线中最常被提到的就是否该对血清进行热灭活，下面我们就对胎牛血清的热灭活进行一些探讨和解释。

培养基DMED的配置。

一、DNA Southern Blot及杂交 本技术可用于基因组DNA特定序列定位，尤其可分析某些基因的限制性内切酶长度多态性，对遗传性疾病的早期基因诊断、产前诊断或基因变异等方面的研究有应用价值，其过程包括：样品DNA内切酶水解、水解片断的琼脂糖凝胶电泳分离、分离后水解片断的转移(固定)、特异性DNA片断的分子杂交及放射自显影。(一)样品DNA内切酶水解 限制性内切酶(RE)可裂 ...

细胞原代和传代培养的步骤及注意事项。

实验原理 单向定量免疫电泳又称火箭电泳（rocket immunoelectrophoresis）。在琼脂内掺入适量的抗体，在电场作用下，定量的抗原泳动遇到琼脂内的抗体，形成抗原—抗体复合物沉淀下来。走在后面的抗原继续在电场作用下向正极泳动，遇到琼脂内沉淀的抗原—抗体复合物，抗原量的增加造成抗原过量，使复合物沉淀溶解，一同向正极移动而进入新的琼脂内与未结合的抗体结合，又形成 ...