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Accuracy of manual counts with an hemacytometer depend on: accurate mixing of the sample (no bubbles!) number of chambers counted number of cells counted (practical: 200-500 per 0.1 mm3) The chamber o ...

Trypan blue will stain dead or dying cells. Viable cells are able to repell the dye and do not stain. Note: Trypan blue has a greater affinity for serum proteins than for cellular protein. If the back ...

PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污 染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。 一、污染原因 (一)、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于 密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染；标本核酸模板在提 取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶 或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污 ...

Counting cells by the use of a hemacytometer is a convenient and practical method of determining cell numbers in the case that the Coulter counter is out-of-order temporarily. (It is not that bad.) T ...

Materials Suspension cultures set up from Exercise 12.8 Sterile transfer pipettes Materials for viability counting (Exercise 12.7) Procedure After 12 hours aseptically remove 0.1 ml from each of the t ...

Load both sides of the hemacytometer with the cell suspension - covering both counting grids. Count the number of cells in 5 out of 9 squares from each counting grid (count a total of 10 squares). Div ...

A hemacytometer (also spelled hemocytometer) is an etched glass chamber with raised sides that will hold a quartz coverslip exactly 0.1 mm above the chamber floor. The counting chamber is etched in a ...

80年代的技术很经典，但那时分子生物学不够发达，现在方法有无进步呢?如何利用现在的技术来鉴定全新的病毒呢?有此想法很久了，可一直未搞清楚。这也跟如何发现一个新基因的道理是相通的。这是真正创新的基础。 我先来最简单的，1、采集各种病料，用各种细胞、宿主盲传，分离病毒，期望看到细胞病变。如果连细胞病变都没有，没折了？有别的办法证明有病毒吗？。2、纯化病毒，做电镜观察，与已有病毒形态、大小相似好办，要是 ...

随着生命科学技术的发展，动物实验已成为医学实验研究的基本方法。根据实验研究目的、实验动物的种类及药物剂型、剂量的不同，要求对实验动物实施不同的给药方法。尤其对于药物的毒理、药效的研究和药物剂量的确定，经口灌胃给药方法是一种重要的途径。在国内文献上却很少见到具体的描述。在此，作者将在实践中摸索出的一套实用于小鼠、大鼠、豚鼠、家兔经口灌胃给药的方法介绍如下。 一灌胃器具制作 1.1小鼠、大鼠、豚鼠灌胃 ...

We use two different kinds of media. Most cells are grown in DMEM. A few lymphoid cell lines are grown in RPMI. Cells grown in DMEM must be grown in a 10% CO2 atmosphere. As a result most of our incub ...

1. embryos are dissected from timed-pregnant mice from 11.5 d.p.c. to 13.5 d.p.c. 2. metanephroi and associated ureteric buds are microdissected and placed in holding medium (L15 medium supplemented ...

聚合酶链反应(polymerase chain reaction PCR)是一种选择性体外扩增DNA或RNA片段的方法，在微生物感染的诊断中具有重要的价值。在PCR扩增过程中，扩增的DNA产量是呈指数上升的，经过n个循环的扩增，一个DNA分子的产量便达到2n个拷贝。PCR产物一般为1013拷贝/ml，取0.1ml即为109拷贝，而1mg人基因组DNA才含1.4´106拷贝的单拷贝基因片 ...

复制动物肿瘤的方法很多，如将实验动物用放射线照射或静脉、局部注射放射性同位素；使用各种化学致癌剂（烷化剂、多环芳香烃类、芳香胺类、氨基偶氮染料、亚硝胺类）；使用植物毒素（如苏铁素、黄樟素等）；使用金属（如铬、镍、砷、镉等）；使用RNA和DNA肿瘤病毒；使用多种致癌性霉菌毒素（其中致癌作用最强者为黄曲霉素）等，均可诱发成各种肿瘤。 诱发性肿瘤模型其数量在诱发性动物模型中占首位。一般是利用致癌物质通 ...

embryos are dissected from timed-pregnant mice from 10.5-11.5 d.p.c. limb buds are microdissected and placed in holding medium (L15 medium supplemented with 1 x MITO+ serum extender) (all me ...

脑肿瘤目前仍是严重威胁人类健康和生命的疾病，而肿瘤实验动物模型的建立为研究其发病机制、生物学特性和检测各种治疗方法提供了一种高模拟性工具。自上世纪以来，先后建立了化学物质诱发脑肿瘤模型、病毒诱发模型、同种以及异种移植模型，随着现代分子生物学技术的发展，转基因动物模型又将成为人们研究的热点。 1、早期脑肿瘤动物模型及其局限性 1．1 自发性脑肿瘤动物模型 脑肿瘤在哺乳动物中的发病率不一，有报道狗为 ...

大鼠心肌梗死模型制作图解 （一）制作前准备 1、器械：动物呼吸机，开胸制作心梗模型，维持呼吸至关重要。虽然据说某些牛人可以不用呼吸机，但是我想这是经验积累的结果，开始时必然要用；况且需要看此说明的人应该没有牛到这个程度。当然，如果你经费异常充足，不在乎死亡成千上万的大鼠也可以。显微器械，最主要的是针持，大鼠胸腔、心脏均很小，常规器械无法进入胸腔缝扎。其他手术器械以眼科器械为主。 2、动物：应选择成 ...

Isolation of Lung Bud Endoderm What you need: E11-12 mouse embryos DMEM with 5% fetal bovine serum petri dishes for dissections and washes Tyrode-Ringer's solution pH 7.6-7.7 (recipe below) pancr ...

开始之前：其实非常简单，不需要你下载任何软件，但是你得有一台电脑能上网。当然，最重要的是，你要很清楚用于做引物的模板序列，至于怎么找模板序列，不再本贴的讨论范围。另外，要先对PCR目的序列的长度有个大致估计，好了，马上开始吧： 第一步：找到Primer3的站点。你不用记住这个站点，但是要记住“Primer3”这个词，然后打开GOOGLE首页，输入Primer3，跳出来的第一 ...

结合primer5和Oligo设计引物，步骤及心得

PCR引物设计的11条黄金法则 一、引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区。 二、引物长度一般在15~30碱基之间。 引物长度（primer length）常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致 ...