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After an aliquot of the PCR mixture is analyzed on an agarose gel the remainder of the reaction is concentrated by ethanol precipitation resuspended in buffer and subjected to a simultaneous fi ...

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Ref. Seed and Sheen Gene 67 271-277 (1988) Normal reaction is Chloramphenicol + Acetyl-CoA -> Acetylchloramphenicol Assay uses butyryl-CoA (more hydrophobic) 14C-Cm+ Bu-CoA->Bu-14C-Cm Km (Cm) 1 ...

A. Culture Growth: 1.For BAC isolation for shotgun library construction: Pick a smear of colonies and inoculate 3 ml TB medium containing the appropriate antibiotic. Grow the culture for 8 hours 37 ...

Mutagenesis is a fundamentally important DNA technology which seeks to change the base sequence of DNA and test its effect on gene or DNA function. The mutagenesis can be conducted in vivo (in studies ...

1.grow up single colony in 1.5 ml LB/antibiotic ovn @37℃ . 2.pour into tube spin for 30 sec . 3.decant supernatant and resuspend pellet in 100 ml lysis solution . 4.add 200 ml alkaline SDS vortex well ...

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在分子生物学研究中，DNA 的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。目前用于测序的技术主要有Sanger等（1977）发明的双脱氧链末端终止法和Maxam和 Gilbert（1977）发明的化学降解法。这二种方法在原理上差异很大，但都是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一个特定的碱基处终止，产生A，T，C，G四组不同长度的一系列核苷酸，然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测，从而获得DN ...

T-RFLP中文可翻译为：末端限制性片段长度多样性，又可以称为16sRNA基因的末端限制性片段分析技术。是一种新兴的研究微生物多态性的分子生物学方法，日亦受到研究人员的重视。该技术已经成功应用于各种微生物群落的分析比较、研究微生物群落多样性及结构特征等多方面。 T-RFLP的技术原理是根据的保守区设计通用引物，其中一个引物的5‘末端用荧光物质标记，常用荧光物质有HEXTET6-FAM ...

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随着基因工程的发展，常常需要构建一种能高水平表达异源蛋白质的表达载体。启动子对外源基因的表达水平影响很大，是基因工程表达载体的重要元件。因此研究启动子的克隆方法，对研究基因表达调控和构建表达载体至关重要。 迄今为止，国外尚未见到有关启动子克隆方法的综述性报道，国内仅孙晓红等曾就启动子的结构、分类、克隆方法和食用菌中已经分离到的启动子作过综述。而近年来又有许多改进的克隆启动子的方法获得了多方面的成功 ...

Qiagen公司的琼脂糖凝胶回收试剂盒：MinElute Gel Extraction Kit 品牌：Qiagen回收范围：70bp-4kb价格：（50包装1485，约29元/反应） 特点： 洗涤体积只要10μl，回收产物浓度高，方便后继实验 使用方便快捷（wash-and-spin) 高回收率 回收产物纯度高，可用于同位素或荧光测序、芯片分析、连 ...

外源DNA片段和线状质粒载体的连接，也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸，可生成4个新的磷酸二酯链。但如果质粒DNA已去磷酸化，则吸能形成2个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有2个单链切口，当杂本导入感受态细胞后可被修复。相邻的5'磷酸和3'羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的DNA连接酶催化，这两种酶就是大肠杆菌 ...