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来自上海某研究所的某博士的研究课题是寻找导致某种疾病的相关基因，最近他获得了这一疾病的微卫星家族标记图谱，但是这种串联重复的微卫星位点并不能完全满足他的分析要求，因此他决定转向作单核苷酸多态性SNPs（single nucleotide polymorphism，发音为“snips”）基因分型。 确实，如果你的研究课题也是寻找易感基因，那么SNPs是一种比较而言可行而且高效 ...

Selection of siRNA duplexes from the target mRNA sequence Using Drosophila melanogaster lysates (Tuschl et al. 1999) we have systematically analyzed the silencing efficiency of siRNA duplexes as a fun ...

Protocol for Isolation of Genomic DNA from Mammalian Cells 1.Trypsinize harvest and resuspend cells at 107 / ml in 10 mM Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM EDTA. 2.Add SDS and Proteinase K to a final concentrat ...

Gene (Ref) Accession # Position from ATG ...

Ribonuclease Protection Assay contributed by James McCaughern-Carucci Yale University Most RNase Protection protocols require an overnight hyb with numerous subsequent clean-up steps. This method requ ...

1. Add appropriate volumes of RNA (<12 ul) plus probe (< 3 ul). Try 5 and 10 ug RNA plus 600 or 800 pg dig labelled probe. 2. Include 2-3 yeast RNA samples/probe used. 2ul of 5mg/ml stock. 3. A ...

Hot phenol may also be used to remove DNA. 1. Add equal volume of TE-saturated phenol to RNA solution. Mix. 2. Heat to 70 ℃ for 5 minutes. 3. Centrifuge at top speed for 10 minutes at room temperature ...

The Queensland Institute for Medical Research (QIMR) lab's method for automated sequencing for expressed sequence tags from Schistosoma japonicum and/or S. mansoni cDNA libraries constructed in the di ...

来自一家名为“ＡＬＮＹＬＡＭ”的生物技术公司的研究人员在11日出版的《自然》杂志上报告说，他们通过转基因技术 在ＲＮＡ（核糖核酸）干扰技术的研究上取得了突破，为治疗糖尿病 、癌症等疾病带来了希望。 ＲＮＡ干扰是一种由双链ＲＮＡ诱发的“基因沉默”。在此过程中，致病细胞中与双链ＲＮＡ有同源序列的信使ＲＮＡ被降解，从而抑制了致病基因的表达。ＲＮＡ干扰技术在 ...

本制品是一种快速方便的总RNA提取试剂，可以从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等中提取总RNA。样品在RNAiso Reagent中能够充分被裂解，在加入氯仿离心后，溶液会形成上清层、中间层和有机层（下层)，RNA分布在上清层中，收集上清层后，经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。 RNAiso Reagent具有很强的广谱性，可以适用于各种样品的总RNA提取，提取过程方便快速，整个操作在一 ...

1.克隆到shRNA 表达载体中的shRNA 包括两个短反向重复序列，中间由一茎环（loop）序列分隔的，组成发夹结构，由polⅢ启动子控制。随后在连上5-6个T作为RNA 聚合酶Ⅲ的转录终止子。 2.两个互补的寡核苷酸两端须带有限制性酶切位点。 3.Stratagene发现29个寡核苷酸较之原先推荐的23个寡核苷酸可以更有效的抑制目的基因。 4.在启动子下游的酶切位点下方紧连一个C，使插入片段和 ...

RNA的完整性可以通过琼脂糖变性电泳分析检测而含量则通过紫外分光光度计确定。常见的变性电泳有甲醛变性电泳，戊二醛变性电泳等。 甲醛变性电泳检测RNA完整性 一、材料、试剂和仪器 1 材料: 植物总RNA 5-10μg 2 试剂: 1）加样运载缓冲液（Loading buffer），50% 甘油，1mmol/L EDTA (pH 8.0)，0.25%溴酚蓝，25%二甲苯氰FF 2）10&tim ...

CONCERT细胞质RNA 纯化试剂是一种新颖的单相酚溶液，是专门设计用来从新鲜或冷冻的培养的动物细胞 或组织中快速、简单地纯化高质量的细胞质RNA 。 应用 利用CONCERT™细胞 质RNA 试剂分离的总RNA 能够用于构建cDNA文库，RT－PCR，northern印迹分析，斑点印迹杂交，poly（A＋）筛选，体外翻译，RNA 酶保护，和分子克隆。 现在所有的商品化试剂不仅分离细 ...

在所有RNA实验中，最 关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶（RNA酶）的污染。由于RNA酶广泛 存在而稳定，一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过程中的降解，而所制备的RNA的纯度和完整性又可直接影响RNA分析的结果，所以RNA的制备与分析操作难度极大。 在实验中，一方面要严格控制外源性RNA酶的污染；另一方面要最 ...

完整RNA 的提取和纯化，是进行RNA 方面的研究工作，如Nothern杂交、mRNA 分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有ＲＮＡ的提取过程中都有五个关键点，即１）：样品细胞或组织的有效破碎；２），有效地使核蛋白复合体变性；３），对内源ＲＮＡ酶的有效抑制；４）有效地将ＲＮＡ从ＤＮＡ和蛋白混合物中分离；5），对于多糖含量高的样品还牵涉到多糖杂质的有效除去。但其中最关键 ...

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