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可溶性抗原与相应的抗体混合，在电解质存在的条件下，两者比例适合，即可有沉淀物出现，叫沉淀反应（Precipitation）.由于沉淀反应抗原多系胶体溶液。沉淀物主要是由抗体蛋白所组成。 为了求得抗原与抗体的适宜比例，保证有足够的抗体，而且抗原分子小，具有较大的反应面积，因此操作上通常是稀释抗原，不稀释抗体。 沉淀反应的种类有环状沉淀、絮状沉淀、荚膜膨胀、琼脂扩散及免疫电泳等。此外还有放射性同位 ...

1、打开离心机电源开关，进入待机状态。 2、选择合适的转头：877转头配套的离心管为200ml专用管，875转头配套离心管为40ml专用管，离心时离心管所盛液体不能超过总容量的2/3，否则液体易于溢出；使用前后应注意转头内有无漏出液体残余，应使之保持干燥。转换转头时应注意使离心机转轴和转头的卡口卡牢。 3、离心管平衡误差应在0.1克以内。 4、选择离心参数： 按温度设置按钮，再用数字键设置离心温度 ...

1.按“power”键打开离心机电源开关； 2.平衡放置离心管； 3.设置离心参数： （1）调节温度按钮，设定所需离心温度； （2）调节速度设置按钮，设定所需离心速度，但最高不得超过14000rpm； （3）揿分/秒选择按钮，确定使用“分”或“秒”计时，再调节时间设置按钮，设置离心时间； （4）盖上离心机 ，按“s ...

离心机的种类很多，根据转速不同，可以分为低速离心机、高速离心机和超速离心机，转速少于6000r/min的为低速离心机，低于25000r/min的为高速离心机，超过30000r/min的是超速离心机；根据用途不同，还可以将离心机分为分析离心机和制备离心机。 一般实验室装备的离心机其最大转速约为4000r/min左右的台式或落地式离心机，现简要叙述一般离心机的使用方法。 1． 将待离心的液体置于离心 ...

1. 使用本仪器须在仪器管理人员指导下进行。2. 接通电源，打开仪器主机、冷阱以及真空隔膜泵。3. 开启真空泵时冷阱温度应至少低于-50℃。4. 抽真空前注意仪器所有的阀门应该关闭。5. 实验完成后恢复气压时，可等待自动放气，也可使用冷阱后方的放气阀进行缓慢放气。完全放气后才可以打开仪器盖。6. 严格按照使用情况登记使用记录，在管理人员同 ...

PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性，不出现扩增条带。 PCR反应的关键环节有 ①、模板核酸的制备 ②、引物的质量与特异性 ③、酶的质量 ④、PCR循环条件。 寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①、模板中含有杂蛋白质；②、模板中含有Taq酶抑制剂；③、模板中蛋白质没有消化除净，特别是染色体中的组蛋白；④、在提取制备模 ...

alimama_pid="mm_10043573_137377_1822161"; alimama_titlecolor="FF9900"; alimama_descolor ="552c55"; alimama_bgcolor="f7f7f7"; alimama_bordercolor="f7f ...

Northern Blot Preparation of Formaldehyde Agarose Gel The gel conditions (1% agarose 1X MOPS 6.3% formaldehyde) are designed for ~4 hours of electrophoresis. If longer times are necessary the formald ...

Overview With this protocol transcripts that were initiated from specific genes by RNA polymerases prior to permeabilization can be measured. Instead of a nuclear extract permeabi ...

RNA extraction buffer: 0.1M NaCl 2% SDS 50mM Tris/HCl (pH9) 10mM EDTA 20mM ß-mercaptoethanol 1. Grind leaf tissue on liquid N in mortar and pestle. 2. Transfer the ground tissue to a 10ml conica ...

基因敲除和转基因动物是功能缺失表型研究的主要方法。然而，获得这些动物是一个漫长而且费用昂贵的过程，同时很多基因的缺失会导致胚胎致死表型，使得基因敲除变得不再可能。 灭活蛋白功能的方法包括结构域阴性突变构建和分析，和使用抗体和aptamers。但是，这可能需要花费一些时间确定什么构型和结构有功能，而且它们似乎只对某些靶标有作用。 有两种方法被用来调节mRNA的更新，反义mRNA和核酶（ribozym ...

Overview We design shRNA molecules with an algorithm. Our algorithm uses several criteria to rank potential 21mer targets within each human and mouse Refseq transcript. The algorithm applies a set of ...

Diethyl pyrocarbonate derivitizes histidine residues and is therefore an effective method to inactivate nucleases including RNAse. CAUTION: DEPC is irritating to the eyes skin and mucous membranes. It ...

In vitro transcription with yeast nuclear extract Steve Hahn Wear gloves throughout use RNAse free solutions (either autoclaved or sterile filtered) and clean bench and pipetmen with 95% ethanol befo ...

For quantitating RNA levels from either polyA+ selected RNA or crude RNA preps. Solutions 10X Hybridization Buffer 0.4 M PIPES 12.1 g PIPES (Sigma #P6757) 4.0 M NaCl 23.4 g NaCl 10 mM EDTA 2.0 ml 500 mM EDTA pH to 6.7 and bring up to 100 ml with DEPC treated Q, autoclave 1X Hybridization Mixture 8 ml formamide 1 ml DEPC treated Q 1 ml 10X Hybridization Buffer 2X RNase Buffer 20 mM Tris 7.5 2 ml 1M Tris 7.5 10 mM EDTA 2 ml 500 mM EDTA 8.0 0.6 M NaCl 12 ml 5 M NaCl up to 100 ml DEPC treated Q, aut

siRNA Database Searchable database of Silencer ™ Validated and Pre-designed siRNAs to >34000 human mouse and rat targets. All siRNAs in the database have been designed for maximum potency an ...

The protocols listed here are for Drosophila cells in 6 well plates and our pre-aliquoted 384 well plates. RNAi experiments may be done in other size plates just scale up or down. Adopted from Clemens ...

Polymerase III in vitro Transcription Steve Hahn last modified 10/15/99 For the following reactions use appropriate shielding and dispose of radioactive waste properly! A 20 microliter transcription r ...

为了分析特异siRNA 序列在基因活性上的效应，必须知道导入siRNA 的序列。这将要求设计合成寡核苷酸或者载体上的短的发夹RNA （siRNA ）序列，转染后检测基因的阻断。而dicer酶切的siRNA （d-siRNA ）导入细胞后，由于d-siRNA 库中通常都有好几种有效的siRNA 序列，它们在起始RNA i反应尤其有效。 然而目前还没有方法确定在这个库中起作用的特异的序列。 ...

1. Add the following to a sterile microfuge tube on ice: -1 ug linearized plasmid DNA. -2 ul Dig RNA Labeling Mix 10X concentrate -2 ul 10X transcription buffer -1-2 ul RNase inhibitor (DNase free) -a ...