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PCR的假阳性问题是在PCR诞生之初就被深刻认识到了，同时由于造成假阳性的因素相对单一，因此假阳性并不是困惑检验工作的主要原因。如果一个项目只是阳性率高敏感性好的话，那么可以认为其阴性结果具备很高的可排除性，仍然有相当的临床适用价值。但PCR的假阴性在检验工作中仍很严重，并且用些因素经常被人忽略，严重的影响了PCR的使用。可以想象一种假阳性和假阴性都很高的项目，有什么样的诊断价值。 造成PCR假阴 ...

PCR的最早设想 核酸研究已有100多年的历史，本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术，Korana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想：“经过DNA变性，与合适的引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物，并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。 PCR的实现 1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis 等发明了具有划时代意义的聚合酶链反 ...

程序：1 编程 1.1 打开快速电泳仪背面的系统开关，仪器开始进行自检。 1.2 仪器自检完毕后，按〈SEP method file〉键，输入方法号按〈do〉键确认。 1.3 按〈step forward〉键开始对分离方法进行编程，利用〈cursor〉键控制光标的移动，〈step ...

目的 探讨阿司匹林对人γδT细胞杀伤消化道肿瘤细胞株的影响。方法 用异戊烯焦磷酸法体外扩增人外周血γδT细胞。用不同浓度的阿司匹林诱导γδT细胞和消化道肿瘤SGC-7901、SW-1990、SW-480、SW-1116、LOVO细胞株，用MTT法检测阿司匹林对这些细胞的抑制率和用乳酸脱氢酶法测定γδT ...

（l）开机 打开水源，将主电源开关置于ON（接通）位置，机器开始工作：机器设有延时装置，即在通电3分钟后启动减速器，压缩机等部件，在此期间指示冷凝温度高的红灯（LED）闪亮（即3分钟延时）。第一批雪花冰约在压缩机启动3分钟后落人储冰箱，10分钟后出冰正常，产生坚硬的冰块。 （2）停机 关闭主电源开关，机器停止工作。每次重新启动时，机器都要经3分钟延时后开始自动运行。 （3）指示灯说明 电子雪花机的 ...

1、pcDNA3.1＋-gD的线性化: pcDNA3.1＋使用说明书推荐了以下几个酶作为线性化酶(BglⅡ MfeⅡ Bst1107Ⅰ Eam1105Ⅰ PvuⅠ ScaⅠ SspⅠ)通过DNAMAN分析gD序列发现其带有MfeⅡ酶切位点。 2、转染前一天在60mm的dish中接种8×105个细胞加入5ml培养基(含血清不含抗生素)37℃5%CO2培养至转染时要求细胞40%-80%汇合 ...

一、新的颅内给药方法 血药屏障（brain blood barrier．bbb）的存在，使很多药物不能进入脑部，限制了脑部疾病的治疗。 通过鼻腔向脑输送药物：雌二醇、多巴胺、孕酮、神经生长因子等，通过鼻腔给药直接进入脑脊液。 也许这种方法不新鲜，但似乎临床应用较少。方法不够好，南京总医院的刘新峰在国外的研究，是一个很有前途的方法。刘新峰研究了NGF通过鼻腔给药，其脑内前额、海马区较同样剂量的直接静 ...

一、大鼠灌胃 大鼠灌胃是最常见的给药方法之一。灌胃所用的针头可以从市场上购买，操作方法和小鼠灌胃大同小异，只是由于大鼠体积较大，抓大鼠的手法和小鼠有所不同。 大鼠灌胃是在清醒状态下进行的，不需要麻醉。大鼠的灌胃针长约6～8cm，直径约1.2mm。 大鼠灌胃时，右手持灌胃注射器，左手拇指和食中二指相对，抓住大鼠颈部皮肤，使大鼠的头部和颈部及躯干呈一直线，不需要固定大鼠的尾巴，就可以实施灌胃操作了，其 ...

早在1958年科学家分离出DNA聚合酶（ polymerase）后，就曾设想利用DNA聚合酶扩增大量DNA片段。但当时由于DNA测序较难，没有核苷酸合成技术及耐热性的DNA聚合酶没有得到分离等原因而没有发展起来。直到1985年，美国的Cetus人类 遗传实验室的年轻科学家Mullis在偶然灵感的启迪下发明了划时代的聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）简称PCR技术- ...

１．选择那种动物比较好？ 用Beagle犬比较多 ２．怎么实验动物给药？ 方法是使狗的嘴张开并固定，头稍抬起，用镊子把胶囊或是片子放在舌后部，倒少量的水，如果是胶囊水不能太多否则胶囊会漂起来，然后动作快点放开固定，Beagle犬很温顺一般不会有什么问题 。 口服制剂用兔子的也比较多，但一般需要将药物粉碎后灌胃，肠溶制剂不合适 。 ...

糖尿病（diabetes mellitus ，DM）已成为严重危害人类健康的公共卫生问题，DM及其并发症不仅严重影响糖尿病患者的生活质量，同时也是致残、致死的重要原因。因此，建立合适的糖尿病动物模型，阐明DM及其并发症的发病机制就显得尤为重要。目前，DM动物模型制备方法主要有:①手术切除胰腺;②化学药物诱导;③自发性糖尿病动物模型;④转基因动物等。 【切除胰腺的DM模型】　 常采用狗、猫和大鼠等造 ...

小鼠灌胃 小鼠灌胃方法比较简单，上面的帖子里面也有提到，需要关注的只有两点： 一是要保持小鼠的头部和颈部成一直线，方便灌胃针头进入；　　二是动作要轻柔，从口角进入，防止损失食道。做的多了自然就熟练了。 具体操作过程如下： 1. 准备灌胃针头。一般可以从市场上面买到，实在没有的话，可以用12号的针头，剪去针尖，用砂纸将头端磨平，也可以用。但是买的灌胃针头的头端用锡或者适宜的方法处理了针头的锐口，自己 ...

PROCEDURE for preparation of activated platelets 1. Centrifuge tube of freshly drawn HEP or EDTA blood at 600 rpm (75xg) for 20 minutes. 2. Remove all of platelet rich plasma (top layer) and place i ...

Internalization of receptor is measured as the reduction of receptors on the plasma membrane surface. Surface receptors are labeled with fluoresent antibodies which is in turn measured using a flow cy ...

末代沙皇尼古拉二世、1918年的流行性感冒病毒、电影《侏罗纪公园》，以及辛普森杀妻案，这四件事情到底有什么相关？答案是没有。只不过近十几年来生物技术的一项新发明，把它们给连在一块了。这项技术就是“聚合酶链反应”（polymerase chain reaction，PCR）。 PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年 ...

离心机是利用离心力对混合溶液进行快速分离的专门设备，它的用途十分广泛，如在生化研究中对所研究的对象，如：生物细胞、病毒、血清。蛋白等有机物、无机物溶液、悬浮液及胶体等样品进行分离、浓缩、提取等制备工作。其中以普通的离心机（转数在4000～5 000 r/min）最常见。下面就简要介绍普通离心机为例的维护修理。 普通离心机由电动机、转盘、调速器。套管、底座等组成，其中电动机是轻载时转速高，但随着负载 ...

一、条带宽不超过1mm，边缘整齐； 二、条带在期望的碱基大小之内； 三、背景上无smears也无引物二聚体的出现则是PCR扩增失败，而非阴性反应； 四、如果出现期望的碱基大小之外的其它条带，不管是否有期望大小的条带，均应作为人工假像看待； 五、在临床标本检测时，尤其对于肿瘤标本，除预期条带外，经常有以外条带或smear现象，但只要其亮度明显低于目的条带，也应视为阳性； 六、对于某些情况，尤其在自 ...

常见实验动物的捉持和给药方法 一小白鼠的捉持和给药方法 1、捉持方法 右手提起鼠尾放在粗糙物(如鼠笼)上面轻向后拉其尾此时小鼠前肢抓住粗糙面不动；用左手拇指和食指捏住双耳及头部皮肤，无名指、小指和掌心夹其背部皮肤及尾部便可将小鼠完全固定.腾出右手可以给药。 此外，也可单手捉持，难度较大，但速度快。先用拇指和食指抓住小鼠尾巴，用小指、无名指和手掌压住尾根部，再用腾出的拇指、食指及中指抓住鼠双耳及头部 ...

目前，实验室常用的是电动离心机。 电动离心机转动速度快，要注意安全，特别要防止在离心机运转期间，因不平衡或试管垫老化，而使离心机边工作边移动，一致从实验台上掉下来，或因盖子未盖，离心管因振动而破裂后，玻璃碎片旋转飞出，造成事故。因此使用离心机时，必须注意以下操作。 （1）离心机套管底部要垫棉花或试管垫。（2）电动离心机如有噪音或机身振动时，应立即切断电源，即时排除故障。 （3）离心管 ...

在动物实验中，为了观察药物对机体功能、代谢及形态引起的变化，常需要将药物注入动物体内。给药的途径和方法多种多样，可根据实验目的、实验动物种类和药物剂型、剂量等情况确定。 (一)注射给药法 1. 皮下注射 注射时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤，右手持注射器将针头刺入，固定后即可进行注射。 ①小鼠在背部或前肢腋下，大鼠在背部或侧下腹部；　　②豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位；　　③兔在背部或耳根部注 ...