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Chemotaxis Assayby Melissa Swope Purpose The purpose of a chemotaxis assay is to determine whether your protein or small molecule of interest has chemotactic activity on a specific cell type. Chemota ...

（一）狗、猫、兔、豚鼠 1、空气栓塞法 向动物静脉内注入一定量的空气，使之发生栓塞而死。当空气注入静脉后，可在右心随着心脏的跳动使空气与血液相混致血液成泡沫状，随血液循环到全身。如进入肺动脉，可阻塞其分支，进入心脏冠状动脉，造成冠状动脉阻塞，发生严重的血液循环障碍，动物很快致死。 2、急性失血法 3、破坏延脑法 用器具破坏延脑或用木锤用力击其后脑部。 4、开放性气胸法 将动物开胸，造成开放性气胸 ...

1、4%多聚甲醛常规灌注固定，取材并置20%蔗糖溶液（4℃）过夜，蜡块制作，切片，贴片。0.01 M PBS清洗5 min×3次； 2、脱蜡、水化：用二甲苯两次10 min，用梯度乙醇由低浓度到高浓度进行水化； 3、加入0.3%的过氧化氢甲醇溶液（甲醇80 ml＋0.01 M PBS 100 ml＋30%过氧化氢）30 min，以消除内源性过氧化物酶的影响，0.01 M PBS清洗5 ...

Software for: Making Restriction Maps Designing PCR primers Assembling fragments detecting SNPs and managing raw sequence data For:GCGMacPCUNIXand on the Web Restriction Mapping -Making restriction ma ...

1、石蜡切片置于60 ℃烘箱中，烘片2 h，脱蜡至水，用PH7.4的PBS冲洗三次，每次3 min（3×3'）。 2、取一定量PH6.0柠檬酸盐缓冲液，加入微波盒中，微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档微波处理10 min，取出微波盒流水自然泠却，从缓冲液中取出玻片，先用蒸馏水冲洗两次，之后用PBS冲洗2×3'。(注：不是 ...

实验动物的处死方法很多，应根据动物实验目的、实验动物品种（品系）、以及需要采集标本的部位等因素，选择不同的处死方法。无论采用哪一种方法，都应遵循安乐死的原则。 安乐死是指在不影响动物实验结果的前提下，使实验动物短时间无痛苦地死亡。 处死实验动物时应注意，首先要保证实验人员的安全；其次要确认实验动物已经死亡，通过对呼吸、心跳、瞳孔、神经反射等指征的观察，对死亡作出综合判断；再者要注意环保，避免污染环 ...

1、PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 2、假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消 化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时 ...

PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生. 一、污染原因 1、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染. 2、P ...

一、经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳 这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛－DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳， 因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H＋梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相等的分辨率（Miller，1987），但用含朋乙二醛－DMSO的凝胶对RNA进行分级离，通常Northern杂交所显示 ...

PCR技术简介 前言 一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。这也是分子生物医学令人震撼的一例。 何谓PCR 简单的说，PCR就是利用DNA聚合 ...

随着兽医防疫工作重要性的逐步提高，PCR检测技术已被兽医工作者比较广泛认可，已经从实验室研究走进了临床应用阶段。如何提高PCR检测质量，已成为实验室技术人员不可回避的一个问题，它直接影响实验室检测结果的可信度和兽医防疫工作质量。 PCR检测质量的控制是一个系统工程，总体上涉及三个方面：一是试验仪器；二是试验试剂与耗材；三是人员操作。任何一个方面出现问题，都会影响PCR检测质量。 一、试验仪器 PC ...

小鼠胚胎成纤维细胞的富集 1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后，实施断颈法处死小鼠。 2、用70％乙醇擦拭腹部，把皮肤向后拉，暴露出腹膜。用消毒过的工具，剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。 3、用剪刀剪开每一测的胚囊并将胚胎移到培养皿中。 4、用两副钟表镊子将胎盘和膜与胚胎分离开，分离后切除内脏（所有深色的东西）。将胚 ...

操作步骤： 1、将离心机打开，仪器此时的工作状态为最后操作设置的参数。 2、平衡离心管，两两对称放入离心机。 3、盖好离心盖，盖子锁上时才能离心。 4、选择操作模式： 设置参数： 1）离心速度：300rpm~14000rpm； 2）离心时间：1min~99min； 3）离心温度：－10℃～40℃；&nb ...

1 开车前准备 1.1 松开离心机刹车，用手试转转鼓，看有无咬煞情况。 1.2 检查其它部位有无松动及不正常现象。 1.3 滤袋不得有破损，铺滤袋保证舒坦、平整。 2 开车 开启电源，转鼓依顺时针方向旋转（从静止到正常转速约40~60秒） 3 运转 SS800型离心机最大装料量为135Kg，容量为90升，投料时应注意控制。 4 停车 关闭电源开关，非防爆岗位用的离心机可采用间隙式刹车，切记不可一次 ...

实验动物的给药容积1、口服法 口服法给药很难准确掌握给药量，另外室温下易分解物质的给药，小量被检物质的给药，都很难准确平均填加。 2、灌胃法 各种动物一次灌胃能耐受的最大容积如下： a小鼠 A体重（g）>30 最大容积（ml）1.0；　　B体重（g）25～30 最大容积（ml）0.8；　　C体重（g）20～24 最大容积（ml）0.5； b大鼠 A体重（g）>300 最大容积（ml）8 ...

步骤： 1、开机：打开开关，视窗上显示“SELF TEST”显示10秒中后，显示RUN-ENTER菜单： “-RUN ENTER PROGRAM PROGRAM”准备执行程序。 2、放入样本管，关紧盖子。 3、如果要运行 ...

一、动物模型 （一）研究药物吸收的动物模型 几种体内动物模型被广泛的应用于研究药物的鼻腔吸收，其中应用最为普遍的是大鼠模型。通常将大鼠麻醉后切开颈部皮肤，做一食管插管直至鼻腔后部，封闭鼻腭通道，防止药液从口腔流失。将药液输入鼻腔并反复循环，计算试验池中药物浓度的下降。即为被吸收的药物量。 家兔是另一种被广泛应用于药物鼻腔吸收试验的动物模型。另外几种应用较多的试验动物有绵羊、狗、猴等。对于药物动力学 ...

PCR的假阳性问题深受重视，但PCR假阴性问题相对于临床检测更为严重。其实PCR假阳性的问题是比较单纯的，一般仅涉及污染和引物的非特异性问题。而污染可以通过严格的实验室管理，合理的环境设置，以及加入UNG酶抗污染基本可以解决，而引物的非特异性问题基本属于厂家试剂质量问题。而PCR的假阴性却不同，它涉及了与PCR实验的几乎所有人员和技术环节，十分复杂。就临床而言，大三阳检出率低、甚至于GC镜下都很多 ...

PCR的假阳性问题是在PCR诞生之初就被深刻认识到了，同时由于造成假阳性的因素相对单一，因此假阳性并不是困惑检验工作的主要原因。如果一个项目只是阳性率高敏感性好的话，那么可以认为其阴性结果具备很高的可排除性，仍然有相当的临床适用价值。但PCR的假阴性在检验工作中仍很严重，并且用些因素经常被人忽略，严重的影响了PCR的使用。可以想象一种假阳性和假阴性都很高的项目，有什么样的诊断价值。 造成PCR假阴 ...

PCR的最早设想 核酸研究已有100多年的历史，本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术，Korana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想：“经过DNA变性，与合适的引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物，并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。 PCR的实现 1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis 等发明了具有划时代意义的聚合酶链反 ...