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末代沙皇尼古拉二世、1918年的流行性感冒病毒、电影《侏罗纪公园》，以及辛普森杀妻案，这四件事情到底有什么相关？答案是没有。只不过近十几年来生物技术的一项新发明，把它们给连在一块了。这项技术就是“聚合酶链反应”（polymerase chain reaction，PCR）。 PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年 ...

离心机是利用离心力对混合溶液进行快速分离的专门设备，它的用途十分广泛，如在生化研究中对所研究的对象，如：生物细胞、病毒、血清。蛋白等有机物、无机物溶液、悬浮液及胶体等样品进行分离、浓缩、提取等制备工作。其中以普通的离心机（转数在4000～5 000 r/min）最常见。下面就简要介绍普通离心机为例的维护修理。 普通离心机由电动机、转盘、调速器。套管、底座等组成，其中电动机是轻载时转速高，但随着负载 ...

一、条带宽不超过1mm，边缘整齐； 二、条带在期望的碱基大小之内； 三、背景上无smears也无引物二聚体的出现则是PCR扩增失败，而非阴性反应； 四、如果出现期望的碱基大小之外的其它条带，不管是否有期望大小的条带，均应作为人工假像看待； 五、在临床标本检测时，尤其对于肿瘤标本，除预期条带外，经常有以外条带或smear现象，但只要其亮度明显低于目的条带，也应视为阳性； 六、对于某些情况，尤其在自 ...

常见实验动物的捉持和给药方法 一小白鼠的捉持和给药方法 1、捉持方法 右手提起鼠尾放在粗糙物(如鼠笼)上面轻向后拉其尾此时小鼠前肢抓住粗糙面不动；用左手拇指和食指捏住双耳及头部皮肤，无名指、小指和掌心夹其背部皮肤及尾部便可将小鼠完全固定.腾出右手可以给药。 此外，也可单手捉持，难度较大，但速度快。先用拇指和食指抓住小鼠尾巴，用小指、无名指和手掌压住尾根部，再用腾出的拇指、食指及中指抓住鼠双耳及头部 ...

目前，实验室常用的是电动离心机。 电动离心机转动速度快，要注意安全，特别要防止在离心机运转期间，因不平衡或试管垫老化，而使离心机边工作边移动，一致从实验台上掉下来，或因盖子未盖，离心管因振动而破裂后，玻璃碎片旋转飞出，造成事故。因此使用离心机时，必须注意以下操作。 （1）离心机套管底部要垫棉花或试管垫。（2）电动离心机如有噪音或机身振动时，应立即切断电源，即时排除故障。 （3）离心管 ...

在动物实验中，为了观察药物对机体功能、代谢及形态引起的变化，常需要将药物注入动物体内。给药的途径和方法多种多样，可根据实验目的、实验动物种类和药物剂型、剂量等情况确定。 (一)注射给药法 1. 皮下注射 注射时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤，右手持注射器将针头刺入，固定后即可进行注射。 ①小鼠在背部或前肢腋下，大鼠在背部或侧下腹部；　　②豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位；　　③兔在背部或耳根部注 ...

平端连接 通常情况下，PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接，但其连接效率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性，能在两6条DNA链的3'末端加上一个多余的碱基，使合成的PCR产物成为3'突出一个碱基的DNA分子。这种DNA分子的连接效率很低。由于PCR产物的效率通过较高，。在采用大量T4DNA连接酶并配以5-10u T4 RNA连接酶时，可显著提高其连接效率。对于较短PC ...

在动物实验中被毛有时会影响实验操作与观察，因此必须除去。 一.除去被毛的方法有剪毛、拔毛、剃毛和脱毛等 (一)剪毛法:剪毛法是将动物固定后，先用蘸有水的纱布把被毛浸湿，再用剪毛剪刀紧贴皮肤剪去被毛。不可用手提起被毛，以免剪破皮肤。剪下的毛应集中放在一容器内，防止到处飞扬。给狗、羊等动物采血或新生乳牛放血制备血清常用此法。 (二)拔毛法:拔毛法是用拇指和食指拔去被毛的方法。在兔耳缘静脉注射或尾静脉注 ...

一.标本收集和查验程序 对于所有送检的标本，必须认真执行查验程序，方能进入下一程序，其主要程序是： 1.收集标本时：要仔细查对申请单上的姓名与标本上的姓名，序号是否一致；标本的件数与申请单是否相符；标本是否用固定液固定过。 2.标本经上述验收后，进行编号登记，以防错乱。编号按年份和流水号两种方法，如果为了今后的查找较为方便，按年份编号为较好。 二.活检组织取材 在外科送检的诸多材料中，对于每一例病 ...

PCR-SSCP分析的基本程序为：首先PCR扩增特定靶序列，然后将扩增产物变性为单链，进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。在不含变性剂的中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳时，DNA单链的迁移率除与DNA链的长短有关外，更主要的是取决于DNA单链所形成的构象。在非变性条件下，DNA单链可自身折叠形成具有一定空间结构的构象。这种构象由DNA单链碱基决定，其稳定性靠分子内局部顺序的相互作用（主要为氢键）来维持。相同长度 ...

一、离心机操作步骤 １.接通电源，打开离心机盖。 ２.按要求装配好离心管。 ３.按要求安装离心转头。 ４.关上离心机盖。 ５.输入离心数据，编离心程序。 ６.抽真空，并开始运行程序。 ７.程序结束后，去真空。 ８.打开离心机盖，取出转头。 ９.取出离心管并进行分析。 二、离心管的选用 1.玻璃离心管绝对不能在高、超速离心机上使用。 2.PA管：化学性能稳定，半透明，能耐高温消毒。 3.PP管：化学 ...

变性梯度胶凝电泳(DGGE)能够将具有单个碱基差别的DNA分子分离开来。分离以 DNA在溶液中的解链特性为基础。以温度或变性剂浓增高时，DNA分子在不同的区域相 对应的解链温度称为基础。解链区域的长度从25个碱基对到数百个碱基对不等，与每 一个解链区域相对应的解链温度称为解链温度(Tm)。由于一个DNA链上相邻碱基间的 堆积作用在DNA双螺旋的稳定上起着相当重要的作用，因此解链区域的Tm值主要取决 ...

SP(streptavidin-perosidase)法，即链霉菌亲和素-过氧化物酶法。按标记物质的种类如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法)；按结合方式可分为抗原-抗体结合，如过氧化物酶-抗过氧化物酶（PAP）法和亲和连接，如卵白素- ...

一.豚鼠采血法 1.耳缘剪口采血 将耳消毒后，用锐器(刀或刀片)割破耳缘，在切口边缘涂抹20%柠檬酸钠溶液，阻止血凝，则血可自切口自动流出，进入盛器。操作时，使耳充血效果较好。此法能采血0.5ml左右。 2.心脏采血 取血前应探明心脏搏动最强部位，通常在胸骨左缘的正中，选心跳最显的部位作穿刺。针头宜稍细长些，以免发生手术后穿刺孔出血，其操作手法详见兔心脏采血。因豚鼠身体较小，一般可不必将动物固定在 ...

五、火箭电泳试验 火箭电泳实际是一种定量免疫电泳。其原理为：在电场作用下，抗原在含定量抗体的琼脂介质中泳动，二者比例在合适时在较短时间内形成状似火箭或锥形的沉淀线，而此沉淀线的高度常与抗原量成正比关系，因此本法可以测定样品中抗原的含量。 1.材料： （1）诊断血清（抗体）：抗人IgG或IgA免疫血清 （2）待检血清（抗原）：人血清 （3）参考血清 （4）pH8.6，离子强度0.05M巴 ...

1 离心机类型 (1)普通离心机 (2)高速离心机 (3)超高速离心机 ①制备性超速离心机 主要由驱动和速度控制、温度控制、真空系统和转头四部分组成。 ②分析性超速离心机 分析性超速离心机使用了特殊设计的转头和检测系统，以便连续地监视物质在一个离心场的沉降过程。 2 操作注意事项 离心机工作时是高速运转 ...

四、免疫电泳实验 免疫电泳实验是先将抗原物质在琼脂凝胶中做电泳分离，然后于凝胶槽中加入抗体血清。使抗原抗体进行双向扩散，在比例适宜部位形成特异的抗原抗体沉淀弧线。每条沉淀弧线代表一组抗原抗体复合物，故可用抗原成分分析；且可以根据其迁移率与抗体所出现的特异反应进行鉴定。 1.材料： （1）待检标本（抗原）：正常人血清。 （2）抗体：正常人血清的家兔免疫血清。 （3）1.5%离子琼脂（系用巴比妥缓冲液 ...

三、对流免疫电泳试验 对流免疫电泳是在琼脂扩散基础上结合电泳技术而建立的一种简便而快速的方法。此方法能在短时间内出现结果，故可用于快速诊断，敏感性比双向扩散技术高10-15倍。 血清蛋白在PH8.6条件下带负电荷，所以在电场作用下都向E极移动。但由于抗体分子在这样的PH条件下只带微弱的负电荷，而且它的分子量又较大（为r球蛋白）。所以游动慢。更重要的是抗体分子受电渗作用影响较大，也就是说点渗作用 ...

采血方法的选择，决定于实验的目的所需血量以及动物种类。 凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。例如，研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱，需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及 K+、Na+、CI ...

二、琼脂扩散试验 琼脂扩散是抗原抗体在凝胶中所呈现的一种沉淀反应。 抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相遇时，便出现可见的白色沉淀线。这种沉淀线是一组抗原抗体的特异性复合物。如果凝胶中有多种不同抗原抗体存在时，便依各自扩散速度的差异，在适当部位形成独立的沉淀线，因此广泛地用于抗原成分的分析。琼脂扩散试验可根据抗原抗体反应的方式和特性分为单向免疫扩散、双向免疫扩散、免疫电泳、对流免疫电泳、单向及双向火 ...