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Pyrrolizidine alkaloid clivorine inhibits human normal liver L-02 cells growth and activates p38 mitogen-activated protein kinase in L-02 cells Abstract Clivorine a pyrrolizidine alkaloid extracted fr ...

四极杆（Quadrupole）：由四根带有直流电压（DC）和叠加的射频电压（RF）的准确平行杆构成，相对的一对电极是等电位的，两对电极之间电位相反。当一组质荷比不同的离子进入由DC和RF组成的电场时，只有满足特定条件的离子作稳定振荡通过四极杆，到达监测器而被检测。通过扫描RF场可以获得质谱图。四极杆成本低，价格便宜，虽然目前日常分析的质荷比的范围只能达到3000，但由于分析器内部可容许较高压力，很 ...

工作原理 早期的飞行质谱为基质辅助激光解吸离子飞行质谱（maldi－tofms），基质使被分析蛋白质离子化，再由质谱测定。seldi把基质改为以色谱原理设计的蛋白芯片，增强了分离能力。芯片技术最初应用于dna分析，称基因芯片。由于芯片整合了多种高技术：高度集成、超微化、计算机化、自动化，具有多样、快速等优点，也成了飞行质谱的首选。和dna不同，蛋白质是三维结构，制作蛋白芯片最困难的是如何在不损害 ...

机体受某些抗原刺激后，可产生不完全抗体，由于这种抗体体积较小、长度短，只能与颗粒抗原一方相结合(又称单价抗体)，因而不能出现肉眼可见的凝集反应。 Coombs首先根据抗体存在于球蛋白，注入异种动物的球蛋白又是抗原的原理，将含有不完全抗体的血清球蛋白免疫异种动物，获得抗球蛋白抗体，此种抗体可以起到桥梁作用，连接已结合有不完全抗体的抗原，产生肉眼可见的凝集反应，这种反应称为抗球蛋白试验。抗球蛋白试验又 ...

一、免疫荧光组织（细胞）化学技术的发展简史 免疫荧光组织化学是现代生物学和医学中广泛应用的技术之一，是由Coons和他的同事(1941)建立，免疫荧光技术与形态学技术相结合发展成免疫荧光细胞（或组织）化学。它与葡萄球菌A蛋白（SPA）、生物素与卵白素、植物血凝素（ConA等）相结合拓宽了领域；与激光技术、电子计算机，扫描电视和双光子显微镜等技术结合发展为定量免疫荧光组织化学技术；荧光激活细胞分类器 ...

1、乙醚 乙醚吸入法是最常用的麻醉方法各种动物都可应用。其麻醉量和致死量相差大所以其安全度大。但由于乙醚局部刺激作用大可刺激上呼吸道粘液分泌增加；通过神经反射还可扰乱呼吸、血压和心脏的活动，并且容易引起窒息，在麻醉过程中要注意。但总起来说乙醚麻醉的优点多，如麻醉深度易于掌握，比较安全，而且麻醉后恢复比较快。其缺点是需要专人负责管理麻醉，在麻醉初期出现强烈的兴奋现象，对呼吸道又有较强的刺激作用，因此 ...

一、荧光素与抗体结合 1、透析法 （1）概述：适用于蛋白质含量低、样品体积小的抗体溶液的标记；标记较均匀，非特异荧光较低。 （2）步骤：将含10 mg/ml的Ig溶液10 ml装入透析袋；将上述透析袋放入烧杯中，含0.1 mg/ml FITC的pH=9.4的碳酸盐缓冲液100 ml；4 ℃磁力搅拌24 h；取出透析袋，进行纯化、鉴定。 2、搅拌法 （1）概述：适用于蛋白质含量较高、样品 ...

光是电磁波，波长100nm～400nm称为紫外光， 400nm～780nm之间的光可被人眼观察到，大子780nm称为红外光。人们只所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。 检测单位： 光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收 ...

一、组织处理 恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件，也是决定染色成败的内部因素，在组织细胞材料准备的过程中，不仅要求保持组织细胞形态完整，更要保持组织细胞的抗原性不受损或弥漫，防止组织自溶。如果出现自溶坏死的组织，抗原已经丢失，即使用很灵敏的检测抗体和高超的技术，也很难检出所需的抗原，反而往往由于组织的坏死或制片时的刀痕挤压，在上述区域易出现假阳性结果。 1、组织及时取材和固定 ...

一、固定剂 大多数神经激素、肽类物质为水溶性，在用于免疫细胞化学研究之前，常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同，因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此，在进行免疫细胞化学研究之前，很有必要了解所要研究的物质（蛋白质或肽类）的化学性质，并根据需要来选择适宜的固定剂（或固定方法）以及改进固定条件。 目前，免疫细胞化学研究 ...

二、缓冲液 免疫细胞化学中应用的缓冲液种类较多，即使是同种缓冲液，其浓度、pH、离子强度等也常常不同。在此介绍几种最常用的缓冲液的配制。 1、0.2 mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer，PB） 试剂： NaH2PO4·2H2O、Na2HPO4·12H2O。 配制方法：配制时，常先配制0.2 mol/L的NaH2PO4和0.2 mol/L ...

细菌药敏实验常用方法

一、使用环境与工作习惯 1、使用环境　　 显微镜的工作场所应当清洁、干燥、无震动、无腐蚀性气体存在。 2、工作习惯 （１）台面和凳子的高度要适当。 （２）镜检时，即便用单目显微镜，也须两眼同时睁开，用左眼观察。以便右眼绘图或记录。如一只眼睁，一只眼闭，眼睛容易疲劳，无法久看。工作时间较长时，可两眼轮流观察。 二、使用前的准备 1、光学系统的安装 对新购或已经卸掉光学系统的显微镜，使用前必须先将显微 ...

细菌保存的常用方法

准备 仪器要放置在阴凉、干燥、无灰尘、酸碱、蒸汽的平台上，不用时罩好防尘罩。 操作 1.将所需观察的标本放在载物台，上卡夹住。 2.将各倍率物镜装于物镜转换器上，目镜插入目镜筒中。 3. 操作时将标本移动到载物台中间，先用低倍物镜观察。打开电源开关把亮度调节钮移至适当位置，转动粗调手轮将载物台上升到能见到标本的影形，转动微调手轮即可得到清晰的物象。光亮的选择可转动聚光架手轮使聚光镜上升或下降，再调 ...

一、操作规程： 1、接通电路，开启开关； 2、数秒钟后，调节灯的强度至合适亮度； 3、使用后，将灯的亮度调至最小； 4、关闭开关，拔下电源插座，套上防尘罩； 5、放回仪器原始存放处，并登记实验仪器使用记录本。 二、注意事项： 1、显微镜安放在坚固平坦的桌面或工作台上，不要在有阳关直射、高温或高湿、多尘以及容易受到强烈振动的地方使用显微镜； 2、移动显微镜时，一定要抓住观察筒延长筒的根部和照明柱，并 ...

操作程序： 1、倒置显微镜中最常用的观察方法就是相差。由于这种方法不要求染色，是观察活细胞和微生物的理想方法。在此提供各种聚光器来满足需要，这种方法提供带有自然背景色的、高对比度的、高清晰度的图像。 2、开机。接连电源。打开镜体下端的电控开关。 3、使用 （1）准备：将待观察对象置于载物台上。旋转三孔转换器，选择较小的物镜。观察，并调节铰链式双目目镜，舒适为宜。 （2）调节光源：推拉调节镜体下端的 ...

如何获取与组织细胞功能相关的各种定量测量信息是免疫组织（细胞）化学的一大难题。制作免疫组织（细胞）化学标本环节较多，只要有一个环节失误就会影响实验结果，除了需要精制的药品外，还需要熟练的技术。那么，做成理想的标本后，如何进行观察才能获得尽量多的的各种定量信息，而且使这些信息能较客观的反映出来，这就是本文的写作目的。 一、定量分析的重要性 目前有许多研究免疫组织（细胞）化学的文章，是做定性和定位研 ...

5、研究神经递质的超微结构定位 应用免疫电子显微镜技术（常用为PAP法或胶体金标记技术）可显示抗原在神经细胞内的超微结构定位及在突触水平神经元间的联系的化学本质。Pickel应用免疫电镜观察证明TH存在于DA和DA能神经元的细胞体、树突和近侧轴突。在胞体内此酶定位于内质网、Golgi器和微管上。神经终末枝的突触小泡一般认为是神经递质的亚细胞贮存部位，在电镜下观察神经末梢内突触小泡呈现不同形态，目前 ...

一、其它荧光抗体染色方法 1、膜抗原荧光抗体染色法 本法应用直接法或间接法的原理和步骤，可对活细胞在试管内进行染色，常用于T和B细胞、细胞培养物、瘤细胞抗原和受体等的检查和研究，阳性荧光主要在细胞膜上。FACS即采用此法原理。 2、双重染色法 在同一标本上有两个抗原需要同时显示（如A抗原和B抗原），A抗原的抗体用FITC标记，B抗原的抗体用罗达明标记，可采用以下染色方法： （1）一步法双染色　 先 ...