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PCR技术综述

前言 一滴残留在裙子上的精液使得美国总统BillClinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerasechainreaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。这也是分子生物医学令人震撼的一例。 何谓PCR 简单的说 ...

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免疫固定电泳扫描(图)

一、免疫固定电泳介绍 鉴定某一蛋白成分最好的方法是通过免疫化学手段观察其电泳特性及抗原性。免疫 固定电泳是抗原在载体上电泳后直接用抗血清作用于蛋白,进行抗原抗体反应,使 抗原在电泳位置被免疫固定。 血、尿中游离轻链(本周氏蛋白)的检测对诊断轻链病是不可缺少的步骤,并对多 发性骨髓瘤等疾病的预后判断也有一定帮助。免疫学方法是使用抗轻链(KAP或LAM) 抗血清进行免疫分析。 二、实验仪器 Sebi ...

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免疫固定电泳操作规程

一、项目名称 免疫固定电泳(HYDRAGEL IMMUNOFIXATION) 二、检验方法名称 琼脂糖凝胶免疫固定电泳 三、方法学原理 血清蛋白电泳中出现的异常条带主要存在于β-球蛋白和γ-球蛋白区域,通常疑为单克隆蛋白质并且提示丙球蛋白血症。为鉴别异常条带,可运用免疫固定技术。免疫固定电泳是一种简单的技术,电泳后的蛋白质与相应抗体形成复合物和被固定在相应的位置上,通过下列四 ...

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动物实验基本操作之五“分组与编号”

动物实验之前,必须对实验动物进行随机分组和编号标记,这是做好实验和实验记录的前提。 一、随机分组 (一)当分为二组时 例:设有雄性Wistar大鼠12只,按体重大小依次编为1,2,3,…,12号,试用完全随机的方法,分为甲、乙两组。 分组方法:假设所产生的点是随机数字表上第21行第31列的78,则从78开始,由上向下抄12个随机数字,如下: 动物编号:1 2 3 4 5 6 7 8 ...

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免疫胶体金银细胞化学染色中固定剂选择

免疫胶体金银染色和其它免疫细胞化学方法一样,要想得到好的染色效果,关键取决于标本处理是否合适,只有使抗原性及组织结构保存的好,才能使以后的染色成功成为可能,其次要用高特异性和高效价的一抗,选择合适的稀释度。由于免疫组化方法广泛应用于不同的生物学科,所要检出的抗原种类繁多,性质也各不相同。因此,不可能有一种适用于所有抗原的固定剂,而是根据不同的抗原性质区别对待。根据我们使用的固定剂介绍如下,仅供参考 ...

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冷凝集实验知识及操作步骤

一、概念与临床意义 冷凝集实验主要用于由肺炎支原体引起的原发性非典型性肺炎的辅助诊断。参考值:凝集价≤1:32;临床意义:由肺炎支原体感染引起的原发性非典型性肺炎患者的血清中常含有较高的寒冷红细胞凝集素,简称冷凝集素,它能与患者自身红细胞或“O”型人红细胞于4℃条件下发生凝集,在37℃时又呈可逆性完全散开。75%的支原体肺炎病人,于发病后第二周血清中冷凝集素效价达1: ...

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彩色免疫金银法(CIGSS)操作指南

1、基本原理 彩色免疫金银法(coloured IGSS简称CIGSS)是在IGSS基础上发展起来的一种新方法。其基本原理与彩色显影相似。IGSS方法染色在抗原位点处生成银颗粒经铁氰化钾与溴化钾的作用即被氧化成溴化银,后者与彩色显影剂相接触立即被还原成金属银,而彩色显影剂本身则被氧化,其氧化产物使彩色成色剂由无色变成有色的染料并沉积在银颗粒的部位,金属银变成了银离子。由于染料只能通过彩色显影剂沉积 ...

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免疫荧光双标技术中操作要点和注意事项

一、免疫荧光的标本制作的基本程序同DAB显色的免疫组化,不同点如下: 1、免疫荧光不需要使用双氧水处理,封闭和一抗孵育与其它相同。 2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育,孵育时间根据抗体的工作浓度确定。 3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。 4、免疫荧光在封片使用专用封片剂或甘油:0.01MPBS (1:1)。 5、条件许可可以购买防淬灭的试剂加入封片剂中,标本可以保存更久。 ...

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动物实验基本操作之四“妊娠检查”

一、妊娠诊断 雌性动物妊娠后会发生一系列的复杂变化。为了在配种以后能及时掌握雌性动物是否妊娠、妊娠的时间及胎儿和生殖器官的异常情况,采用临床和实验室的方法进行检查,称为妊娠检查,又称妊娠诊断(pregnancy diagnosis)。通过妊娠检查,可以及时地对雌性动物加强护理或再次配种,以保护母体和胎儿的正常发育,避免胎儿早期死亡和流产及减少繁育时间的损失。妊娠检查不但要求准确,且及早确诊更为重要 ...

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荧光显微镜的简易操作与注意事项

1、荧光显微镜基本操作流程 (1)关闭房间内的电灯,开启显微镜汞灯。 (2)根据样品荧光素选择相应荧光组件。 (3)选择滤光片。 (4)放好样品,找到合适的视野。 (5)需拍照先确认照相机已装好。 (6)使用结束关闭所有电源并做好使用记录。 (7)如需详细说明,请借阅说明书。 2、荧光显微镜使用注意事项 (1)荧光几乎都较弱,应在暗室内进行。 (2)关闭汞灯至少在开启15分钟后。 (3)尽可能缩 ...

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飞行质谱技术引人关注

飞行质谱的全称是表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF或SELDI)。质谱技术-飞行质谱是由2002年诺贝尔化学奖得主田中(Tanaka)发明,赛弗吉(Ciphergen)系统生物公司制造的特殊芯片,诞生伊始便引起学术界的重视,成为最引人注目的亮点。 工作原理 早期的飞行质谱为基质辅助激光解吸离子飞行质谱(MALDI-TOFMS),基质使被分析蛋白质离子化,再由质谱测定。SELD ...

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ABI-028_TY8412串联飞行质谱仪的特点

1【产品名称】 串联飞行质谱仪(蛋白质组分析系统)2【产品型号】 ABI-028_TY84123【产品规格】 47004【产品产地】 美国应用生物系统公司(ABI)5【产品详细描述】4700TOF/TOF蛋白质组分析系统是全球第一台TOF/TOF 串联飞行质谱仪,它作为目前的最新质谱技术,它一问世即被世界各大蛋白组研究中心和著名蛋白质实验室所争相采用。它由两级TOF和高能碰撞池组成,其工作原理是离 ...

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免疫组化中抗体选择要求

对于初入实验室的学生,拟做冰冻切片的免疫荧光染色。从文献看来,荧光素标记的二抗大部分都是选择Jackson ImmunoResearch公司产品,偶遂登入其官方网站,其产品种类太多了,令人眼花。如何选择以下哪种类别参与自己的实验? 例如:Jackson ImmunoResearch All Secondary Antibodies:Whole IgG of Affinity-Purified An ...

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免疫荧光技术常见问题汇总

1、问:免疫荧光:用免疫荧光方法做同样的内容,组织切片和培养细胞,两者操作过程中有哪些不同? 参考见解:只是固定方法不同,细胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛,而染色方法是一样的。 2、问:近期要做免疫荧光双标,不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤以及注意事项? 参考见解:我正在做冰冻组织切片的免疫荧光的双染。有些体会: (1)选取primary antibodies时要来源于两种不同的动物,我用的 ...

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700-3.0-TM储物柜智能锁使用说明书

(图1:) ON ...

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免疫荧光与酶免疫组织化学方法的异同

1、概念和基本原理 免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜的现像和放大作用,在细胞,亚细胞水平检测各种抗原物质,并可在原位显示相应的基因和基因表达产物。 免疫组织化学技术现已有:免疫荧光组织(细胞)化学技术、免疫酶组 ...

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直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

免疫荧光细胞化学技术,它的原理是根据抗原抗体反应的规律,把已知的抗原或抗体标记上荧光素,制成荧光抗原或抗体,然后以它作为探针来检测组织或细胞内的相应物质。应用的方法有直接法、间接法、夹心法和补体法等。在荧光显微镜下,根据其形成复合物所发的荧光,来确定判断检测物的来源、性质和部位。 1、直接法:这是最早的方法。其基本原理是用已知的抗体标记上荧光素后成为特异性荧光抗体,染色时将该抗体直接滴在载玻片上进 ...

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实验室建设要点

实验室基础建设一般常用项目有: (1)实验台柜包括中央实验台、实验台、边台、仪器台、天平台、药品柜、毒品柜、玻璃器皿柜等。  (2)空调通风设施。在新的化验中心,所有的建筑面积均有空调。通风系统包括通风柜(毒气柜)、排风罩(固定式)、活动式排风罩、排气扇等。  (3)用水设施包括化验盆、洗涤池、化验水龙头等。  (4)安全设施包括消防喷水灭火系统,惰性气体灭火系统,安全柜,紧急事故淋洗器、洗眼器等 ...

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实验台面板的评鉴

实验室业主、建筑师、实验室管理人员或者有时使用者于实验室工程初始设计阶段时,应指定台面板类型。而实验台台面板的评鉴应以各个实验室的不同需求为基础: ◆耐腐蚀性  ◆耐热性  ◆对液体的吸收性能  ◆负重能力  ◆抗冲击及抗磨损性  ◆导电率  ◆收集和排放液体的能力(特别是在水槽区和通风柜中)  ◆维修保养便利性  ◆符合人体工学性  ◆实用性  ◆颜色  ◆整体外观  ◆特殊需求(例如,不规则的 ...

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振动实验台的使用和维护

一、振动实验台详细说明 振动实验台设计、安装、调试、验收均按中华人民共和国JB/T7974-1999和JB/T7975-1999检定标准及企业内控标准执行。 振动实验台是用于工件检测或划线的平面基准量具。平板安装就调至水平、负荷均匀分布于各支点上。环境温度(20±5)℃,使用时应避免振动。平台工作面采用刮研工艺,工作面上可加工V形、T型、U型槽、燕尾槽、和圆孔、长孔等。振动实验台研制 ...

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