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质谱的定义、发展历史、种类及应用

质谱定义 质谱分析法是通过对被测样品离子的质荷比的测定来进行分析的一种分析方法。被分析的样品首先要离子化,然后利用不同离子在电场或磁场的运动行为的不同,把离子按质荷比(m/z)分开而得到质谱,通过样品的质谱和相关信息,可以得到样品的定性定量结果。 发展历史 从J.J. Thomson制成第一台质谱仪,到现在已有近90年了,早期的质谱仪主要是用来进行同位素测定和无机元素分析,二十世纪四十年代以后开始 ...

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质谱介绍及质谱图的解析

质谱法是将被测物质离子化,按离子的质荷比分离,测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。质量是物质的固有特征之一,不同的物质有不同的质量谱——质谱,利用这一性质,可以进行定性分析(包括分子质量和相关结构信息);谱峰强度也与它代表的化合物含量有关,可以用于定量分析。 质谱仪一般由四部分组成:进样系统——按电离方式的需要,将样品送入离子源的适当 ...

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质谱介绍

质谱分析本是一种物理方法,其基本原理是使试样中各组分在离子源中发生电离,生成不同荷质比的带正电荷的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器。在质量分析器中,再利用电场和磁场使发生相反的速度色散,将它们分别聚焦而得到质谱图,从而确定其质量。第一台质谱仪是英国科学家阿斯顿(F.W.Aston,1877—1945)于1919年制成的。出手不凡,阿斯顿用这台装置发现了多种元素同位素, ...

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鼠科常用实验品种介绍——大鼠

大鼠(RAT)学名Rattus norvegicus在生物分类学上属脊椎动物门、哺乳动物纲、啮齿目、鼠科、家鼠属、褐家鼠种。 生活习性 生长发育:新生大鼠体重约5-6颗,45天体重可达180克以上,此时可供试验用。成年雄性大鼠体重可达300-800克,此行可达200-400克。 活动规律:大书喜啃咬,白天常挤在一起休息,夜间活动,晚上活动量大,采食量良多,食性广泛,喜肉食。对光照、噪音敏感。 繁殖 ...

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常用实验动物介绍一(大小鼠、豚鼠)

一、小鼠 1、〖名 称〗:BALB/c小鼠 〖简 介〗:1913年,贝格(Bagg)从美国商人欧希尔(Ohio)处购得的白化小鼠原种,以群内方法繁殖。麦克·多威尔(MacDowell)在1923年开始作近交系培育,至1932年达26代,命名为BALB/c品系。安德尔文特(Andervont)等人使BALB/c广为传播和应用。1985年我国从美国NIH引进到中国医学科学院实验动物研究所 ...

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腹腔麻醉和静脉麻醉的比较

1、腹腔给药麻醉多用于大小鼠和豚鼠,较大的动物如兔、狗等则多用静脉给药进行麻醉。 2、戊巴比妥钠狗、兔,静脉缓慢30 mg/kg ,腹腔给药 40~50mg/kg ,常用浓度3 % ,2~4小时中途加上1/5 量,可维持1小时以上 3、静脉注射必须缓慢,同时观察肌肉紧张性、角膜反射和对皮肤夹捏的反应,当这些活动明显减弱或消失时,立即停止注射。 4、麻醉期间,动物的体温调节机能往往受到抑制,出现体温 ...

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麻醉大鼠后使其立即清醒的麻醉药物

方法一 我在实验中用的是300g~350g的大鼠,其中按照药物选择有几种麻醉的方式: 1、常用的,麻醉安全范围比较大的就是戊巴比妥,我使用的是300g左右的大鼠注射10mg~16mg左右,这样术中的麻醉效果满好的,最主要的是麻醉的安全窗比较大,10mg和16mg的效果都是差不多,不够的话可以补一部分,不会轻易的死亡; 2、使用氯胺酮,这个药物较戊巴比妥的优点就是,麻醉迅速,大概2分钟左右就可以完全 ...

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大鼠的麻醉

一、SD大鼠的麻醉 1、SD大鼠腹腔麻醉 把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷,腹腔注射,3分钟麻醉,30分钟清醒。 乳化异氟烷制备:用30%的脂肪乳为载体,在室温下(20℃)应用玻璃瓶法,配制成8%的乳化异氟烷。即将1.2ml的液态异氟烷和21.3ml的30%脂肪乳加入至一个气密性良好的25~30ml玻璃容器内,在振荡器上以2000r/min的速度剧烈震荡30s,静置30s,然后再以2000r/m ...

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PCR扩增产物的电泳分析

凝胶电泳分琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳两种。 一、琼脂糖凝胶电泳 琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法。琼脂糖是从海藻中提取的一种线状高聚物。根据琼脂糖的溶解温度,把琼脂糖分为一般琼脂糖和低熔点琼脂糖。低熔点琼脂糖熔点为62~65℃,溶解后在 37℃下维持液体状态约数小时,主要用于DNA片段的回收,质粒与外源性DNA的快速连接等。 1、凝胶浓度 凝胶浓度的选择依 ...

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大鼠经口腔气管插管技术

方法一 用导管室报废的6F导管最前端,约7~8厘米。插管时左手拉紧大鼠舌头,右手持导管(凹面向上,有白色的一端向前),顺着导管弧度,紧贴上颚后边一直向前,就可以插进气管。很容易插到食管内。多练习找一下感觉,多总结失败的原因,一定会成功的。 方法二 用医院内用的16号套管针,将前面尖的部分剪掉一些,然后将老鼠绑在鼠板上,将板头侧抬高45~60度,然后用灯照在鼠颈部,用左手将老鼠的舌头拉向左侧,就可以 ...

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PCR-聚合酶链反应的进展

在聚合酶链反应(PCR)的方法建立以前,面院DNA长链上某种基因的变化有很大难度。1983年由Kry Mullis 等利用当时已经发现的DNA聚合酶,首先建立的体外DNA序列扩增法,基本方法是用寡核苷酸引物扩增位于两个已知序列之间的DNA序片段。反应在DNA聚合酶催化下完成。引物的序列分别与模板基因的序列互补,分别结合在模板DNA对应的两条单链的目的基因的两端随着引物序列从5’~3&r ...

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PCR技术总汇

PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 一、温度与时间的设置 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40 ~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至70~75℃,在Taq DNA 聚合酶的作用下,使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100~300bp时)可采用二温度点法, 除变性温度外、退火与延伸温 ...

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英国RI显微镜操纵系统操作、维护注意事项

一、空中定位(设置针) 用两个4X物镜 1、拿一个空的皿,轻轻在上面划交叉线 2、放置这个盘在显微镜载物台下,并移到中心 3、选4X物镜(无座,或低4X物镜),聚焦交叉线在表面(在这“10个步骤”中不需要再调显微镜聚焦钮!!) 4、选4X物镜带座(或高4X) 5、全部升高有黄/黑颜色杆,将针嵌入到左边HOLDER,再将它放入PAR21(左边) 6、对中心,将控制杆(红色)B ...

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显微操作技术

显微操作技术(MicromanipulationTechnique)是指在高倍倒置显微镜下,利用显微操作器(Micromanipulator),控制显微注射针在显微镜视野内移动的机械装置,用来进行细胞或早期胚胎操作的一种方法。 目前,以细胞内微注射和微灌注技术为基础的玻璃针头(GlassNeedle,精细的玻璃微量毛细移液管)的使用,已经在越来越多的实验生物学研究领域中成为一项非常普遍的操作方法, ...

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体视显微镜的调校和操作

一、体视显微镜因其所具备的众多优点在工农业和科研各部门有着广泛的应用。若在使用过程中出现一些问题可根据实际情况自行解决。根据实际使用情况常见的故障有: 1、视场较模糊或有脏物: 可能的原因有标本上有脏物,目镜表面有脏物,物镜表面有脏物,工作板表面有脏物。可根据实际情况采取清洁标本,目镜,物镜和工作板表面的脏物解决。 2、双像不重合 可能的原因为瞳距调节不正确可采取修正瞳距的措施,双像不重合也可能是 ...

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双目解剖镜使用标准操作规程

一、原理 双目解剖镜主要由两组平行的接物镜和两组平行的接目镜构成。由于多一次聚焦,将放大的倒象校正为正象,因此用者可以自如地在镜下进行各项细小操作。 二、主体内容 1、润湿标本,务必使用玻璃镜台。暗示标本与淡色标本,除须改用白色底板或黑色底板外,上面可加灯光照射。透明标本只用玻璃镜台,并可移动镜台下的反光镜,以调节光线明暗度。 2、用螺丝固定于镜柱的镜子,应将镜筒提高到与物镜“操作距离 ...

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实验室生物显微镜XS-402型使用与保养

一、使用方法 1、灯光照明 调节亮度控制钮/电源开关,直到获得所需亮度。一般情况下,不要将照明明亮度调至最强状态,否则会使灯泡缩的使用时间。 2、调焦 将标本切片置于工作台中间,先用10×物镜和10×目镜为防止标本和物镜相碰,应先使载物台上升,使标本与物镜靠近,然后再使标本与物镜相离,在相离过程中达到调焦目的。 操作者可先缓慢逆向旋转粗调焦手轮,使标本下降,同时在10&t ...

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激光共聚焦扫描显微镜基本组成、特点

一、激光共聚焦显微镜的基本组成 激光扫描共聚焦显微镜 (laser scanning confocal microscope LSCM)是20世纪80年代发展起来的一项具有划时代意义的高科技新产品,是当今世界最先进的细胞生物学分析仪器。激光共聚焦显微镜利用激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦的原理和装置,以及通过针孔的选择和 PMT的收集,并带有一套对其所观察到的对象进行数字图像分析处 ...

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电子显微镜生物样品的制备实验

一、目的要求 学习并掌握制备微生物及核酸电镜样品的基本方法。二、电子显微镜与光学显微镜的主要区别 显微镜的分辨率取决于所用光的波长,1933年开始出现的电子显微镜正是由于使用了波长比可见光短得多的电子束作为光源,使其所能达到的分辨率较光学显微镜大大提高。而光源的不同,也决定了电子显微镜与光学显微镜的一系列差异。 根据电子束作用于样品的方式的不同及成像原理的差异,现代电子显微镜已发展形成 ...

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PCR技术的原理与方法

PCR定义 PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应,是指在DNA聚合酶催化下,以母链DNA为模板,以特定引物为延伸起点,通过变性、退火、延伸等步骤,体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。是一项DNA体外合成放大技术,能快速特异地在体外扩增任何目的DNA.可用于基因分离克隆,序列分析,基因表达调控,基因多态性研究等许多方面。 PCR技术的基本原理 一 ...

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