【摘要】 目的 建立健康儿童T淋巴细胞亚群及其绝对计数的正常参考值。方法 采用流式细胞术,通过四色荧光标记,在绝对计数管(TruCount tube)内进行T淋巴细胞亚群的检测及绝对计数分析。结果 健康儿童T淋巴细胞(CD3+细胞群体)占淋巴群体的百分率为(65.16±7.05)%,绝对计数为(2029.75±718.85 ...
应用流式细胞术(FACS)测定动员后的外周血及采集的自体外周血造血干细胞(APBSC)中的CD34+细胞及其亚群,操作简单、快速、重复性好,对及时掌握最佳采集时机,准确判断采集的干 /祖细胞数量具有重要指导意义。为准确检测外周血及 APBSC中的CD34+细胞,本文比较了几种 FACS检测CD34+细胞方法的异同。 1 材料与方法 1.1 外周血造血干细胞 APBSC采集自经环磷酰胺(CT ...
人 头颈部肿瘤 AM 人腺样囊性癌细胞(高转移) A2 人腺样囊性癌细胞 A83 人腺样囊性癌细胞 Hep-2 人喉表皮癌细胞 KB 人口腔上皮癌细胞 CNE-2Z 人鼻咽癌母系细胞 肺癌 A549 人肺腺癌细胞 801-D&nbs ...
【摘要】 目的 探讨应用流式细胞术(FCM)检测恶性肿瘤病人外周血淋巴细胞多项免疫指标的变化及该指标对恶性肿瘤免疫治疗前后的临床价值。方法 采用流式细胞术检测50例恶性肿瘤病人和31例健康人的外周血CD3、CD4、CD8等八项免疫指标变化,并且对其中10例病人应用免疫制剂治疗前后对抗原表达的结果进行比较。结果 恶性肿瘤病人免疫功能紊乱:(1)细胞免疫 ...
动物组织肿瘤细胞 AtT-20 小鼠垂体瘤 BC3H1 鼠脑瘤 BV-2 小鼠小胶质瘤细胞 C6 大鼠脑胶质瘤 Cyc-tAg 小鼠T淋巴细胞瘤(SV40T抗原转染) DCS 小鼠树突状细胞肉瘤(B类) EL-4 鼠T淋巴细胞瘤 F ...
动物组织正常及及永生化细胞 3T3 swiss swiss鼠胚胎成纤维细胞 3T3L1 小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪) 3T6swiss 小鼠胚胎成纤维细胞 7WCY1.0 人APP-PS1双基因转染细胞株(CHO)(B类) 7WD10 人APP基因转染细胞株(CHO)(B类) 7 ...
人类组织肿瘤细胞 10104 人淋巴瘤细胞(B类) A-204 人横纹肌肉瘤 A375 人皮肤黑色素瘤细胞 A431 人皮肤基底细胞癌 A549 人肺癌细胞 A875 人黑色素瘤细胞 BeWo 人胎盘绒毛癌细胞 BGC-823 人胃腺癌细胞 BT474 人乳腺导管瘤 CAC ...
人类组织正常及永生化细胞 293E E转化人胚肾293细胞(B类) 293ET ET转化人胚肾293细胞(B类) 293KB KB转化人胚肾293细胞(B类) 293T 人胚肾T细胞 A7d 野生型人C-KIT受体细胞株(B类) AMS3(SCF3) 人干细胞因子单克隆抗体细胞株(B类) APP-PS1 人A ...
生物芯片,简单地说就是在一块指甲大小(1cm3)的有多聚赖氨酸包被的硅片上或其它固相支持物(如玻璃片、硅片、聚丙烯膜、硝酸纤维素膜、尼龙膜等,但需经特殊处理。作原位合成的支持物在聚合反应前要先使其表面衍生出羟基或氨基(视所要固定的分子为核酸或寡肽而定)并与保护基建立共价连接;作点样用的支持物为使其表面带上正电荷以吸附带负电荷的探针分子,通常需包被以氨基硅烷或多聚赖氨酸等)将生物分子探针(寡核苷酸片 ...
一般基因芯片按其材质和功能,基本可分为以下几类 (一)元件型微阵列芯片 1、生物电子芯片 2、凝胶元件微阵列芯片 3、药物控释芯片 (二) 通道型微阵列芯片 1、毛细管电泳芯片 2、 PCR扩增芯片 3、集成DNA分析芯片 4、毛细管电层析芯片 (三)生物传感芯片 1、光学纤维阵列芯片 2、白光干涉谱传感芯片 3、小鼠基因表达谱芯片(MGEC) ...
测量红细胞的变形性是临床血液流变学的一项重要指标,最常用的测量方法是微孔滤膜筛滤法和激光衍射法。这些方法测出的是大量红细胞的平均结果。但是,在微循环中即使只有2~3%的红细胞变形性很差,也会严重影响红细胞通过毛细血管的流动。早在80年代中期,国际血液学标准化委员会血液流变学专家组“关于血液粘度及红细胞变形性测定的指导意见”中就指出:“这种少数的异常细胞对于体内血 ...
待分析基因在与芯片结合探针杂交之前必需进行分离、扩增及标记。根据样品来源、基因含量及检测方法和分析目的不同,采用的基因分离、扩增及标记方法各异。当然,常规的基因分离、扩增及标记技术完全可以采用,但操作繁琐且费时。高度集成的微型样品处理系统如细胞分离芯片及基因扩增芯片等是实现上述目的的有效手段和发展方向。为了获得基因的杂交信号必须对目的基因进行标记,目前采用的最普遍的荧光标记方法与传统方法如体外转录 ...
细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。 下面是一幅凋亡过程图。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是caspase家族激活,磷脂酰丝氨酸外翻,这时细胞的形态已经发生了改变,可以看到细 ...
调亡细胞的TUNEL的流式细胞仪分析过程1.离心收集细胞,PBS洗1~2次。2.1%多聚甲醛低温下固定15min。3.3ml PBS洗1次,70%乙醇固定,冰箱内放置1~3天。4.PBS轻洗1次5.细胞与TdT标记液37℃孵育,时间1~2h。6.PBS轻洗1次。7.细胞在黑暗中37℃与100μl的染色缓冲液孵育30min。8.含0.1% Triton-X 100的PBS轻洗1次。9.1ml ...
流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群或亚群细胞。活细胞免疫荧光技术是用于FCM检测的标本准备,染色后也能在荧光显微镜下进行观察,在某些实验条件下 ...
1.离心收集细胞,PBS洗1~2次2.1%多聚甲醛低温下固定15min。3.3ml PBS洗1次,70%乙醇固定,冰箱内放置1~3天。4.PBS轻洗1次。5.2×105细胞与12.5μl的缺口平移缓冲液在15℃共孵育6h,每过15min振动1次。6.PBS轻洗1次。7.细胞在黑暗中37℃与100μl的染色缓冲液孵育30min。8.含0.1%Triton-X 100的PBS轻 ...
流式细胞仪血小板分析应用范围 通过分析信号传递、细胞骨架结构、颗粒释放、糖蛋白构形、膜磷脂、与抗凝因子的结合和微粒形成,分析血小板活化,血小板对刺激物的反应性 通过分析受激后表面结合蛋白触发凝血链式反应和表面糖蛋白缺陷检测,分析血小板止血功能的获得性和遗传性缺陷 结合血小板大小,检测血小板RNA含量,分析血小板成熟度,计数网织血小板 发现血小板抗体,做定性和定量分析 血小板分析的临床应用 血小 ...
基本原理 其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性,主要包括以下几个方面:1. 细胞核的改变:由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变。研究表明,用各种染色体荧光染料对经固定的凋亡细胞进行染色,其DNA可染性降低。许多学者把这种D ...
流式细胞仪检测细胞凋亡——Annexin V/PI双染色法 基本原理细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V是一 ...
基本原理 经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据细胞膜完整性将细胞分为“活细胞”和“死细 ...