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试管苗的生理和解剖特征决定了必须对它们逐渐降低相对湿度和增强光照来进行炼苗，以使试管苗移出后适应大田的自养生长和有菌环境。 移栽前宜对移栽基质进行消毒处理。消毒方法一般有两种。一是用干热消毒法，将移栽基质在烘箱中烘烤处理或在高压灭菌锅中以15磅压力维持20~30 min。二是采用福尔马林熏蒸消毒法，即用5%的福尔马林或0.3%硫酸铜稀液泼浇于基质，然后用塑料布覆盖1周后揭开，翻动基质使气味挥发。常 ...

可溶性抗原，如蛋白质、多糖、类脂质和病毒等，与相应抗体结合后，抗原抗体复合物可以结合补体，但这一反应肉眼不能察觉，如再加入红细胞和溶血素，即可根据是否出现溶血反应来判定反应系统中是否存在相应的抗原或抗体。这个反应就是补体结合反应。 补体结合反应是一种古老的血清学技术，Bordet和Gengou在1901年设计这一试验，由于有敏感性高和适应性广的优点，尽管操作繁杂，目前仍被有效地应用。 1、补体及其 ...

养细胞就像养孩子，甚至比养孩子还难。忘记是谁这么说了。上次一次性死了14瓶细胞，前后分析都是培养基污染了。然后换了新培养基，换了新的种子，开始长得不错，但今天看了一下，又污染了，培养基变浑浊。我养的是HUVEC，8月4日从一个老师处取种子（8月3日复苏），他原先是用高糖DMEM培养的，而我用的是1640。在倒置显微镜下，细胞形态不是太好，而且有小黑点。我用1640换掉原先的DMEM培养基，5，6日 ...

目前制备生物芯片采用的方法主要有2类：光引导原位合成法和预先合成后点样法。最常使用的是接触式预合成后点样法（简称接触点样法）。这种方法的优点是可以充分利用原有的方法和仪器来制备探针溶液，探针的长度可以任意选择，且制备方法简单，成本低，合成芯片品种较多，因此受到世界上大多数研究机构的欢迎。本文将对接触式点样法制备生物芯片的点样机理进行分析与讨论，并给出了样点估算的经验公式。 《生物芯片点样机器人样品 ...

一、目的要求 了解植物细胞悬浮培养的基本原理，通过实验掌握植物细胞悬浮培养的方法和技术。并通过实验练习和巩固无菌操作技术。 二、基本原理 利用固体琼脂培养基对植物的离体组织进行培养的方法在植物遗传实验中已经得到广泛的应用。但这种方法在某些方面还存在一些缺点，比如在培养过程中，植物的愈伤组织在生长过程中的营养成分、植物组织产生的代谢物质呈现一个梯度分布，而且琼脂本身也有一些不明的物质成分可能对培养物 ...

1991年，美国Stephenfodor等提出了DNA芯片的概念，随着人类基因组计划（HumanGenomeProject，HGP）的实施，生物芯片术已成为基因组计划中的一种重要技术手段。生物芯片（biologicalchip或biochip），把生化分析系统中的样品制备、生化反应和结果检测三个部分有机地结合起来连续完成。与传统的检测方法相比，具有高通量、高信息量、快速、微型化、自动化、成本低、污 ...

High-throughput SNP genotyping by single-tube PCR with Tm-shift primers. Wang J Chuang K Ahluwalia M Patel S Umblas N Mirel D Higuchi R Germer S. Human Genetics Department Roche Molecular Systems Alam ...

将豚鼠血清用水合肼或氨水处理去除其中的C4，这种C4缺乏血清（简称R4）不能使致敏的SRBC溶解，当加入含有C4的受检血清后，级联酶促反应发生即可导致致敏的SRBC溶解。溶血的程度与待测血清中C4的活性相关。 1、无补体C4-抗原抗体复合物（EAR4）的制备 在新鲜豚鼠血清中按每ml加0.15mol/L氨水0.25ml或0.75mol/L水合肼0.25ml，混合后置37℃水浴30～90 ...

1. SG浓度：　　终浓度1:5000－1:100000，一般为1:10000—1:70000 2. Primer浓度：　　终浓度50nM－300nM　　固定摸板浓度的梯度实验　　不加摸板的对照实验（NTC）——有无非特异信号　　熔解曲线的分析——是否单峰　　建议使用HPLC纯化的引物 3. MgCl2浓度　　降低MgCl2浓度以减少非特 ...

据估计细胞膜上与物质转运有关的蛋白占核基因编码蛋白的15~30%，细胞用在物质转运方面的能量达细胞总消耗能量的2/3。 细胞膜上存在两类主要的转运蛋白，即：载体蛋白（carrier protein）和通道蛋白（channel protein）。 载体蛋白又称做载体（carrier）、通透酶（permease）和转运器（transporter），有的需要能量驱动，如：各类APT驱动的离子泵；有的则不 ...

将RRBC加入正常人血清中，可使B因子活化，激活补体旁路途径致使BRBC溶解。将正常人新鲜血清加热使B因子丧失活性（简称RB），旁路途径不能激活，当加入RRBC时不发生溶血。此时再加入含有B因子的待测血清，旁路途径即被激活，RRBC发生溶血反应。根据溶血程度可测定待测血清中B因子的活性。 1、兔红细胞（rabbitredbloodcell，RRBC）悬液的制备 无菌采兔耳静脉或心脏血， ...

realtime PCR 在PCR体系中加有sybr green或者探针，普通的RT-PCR则没有。 realtime PCR上机后从电脑上直接读出结果，普通的RT-PCR需要跑胶、紫外线下观察结果或用凝胶成像系统分析。 realtime PCR一次测多种mRNA表达需要多色荧光，这就需要仪器支持多色荧光并且探针用不同荧光标记。普通的RT-PCR，可以采取双重PCR的方法同时检测2种mRNA表达。 ...

质膜（plasma membrane）包在细胞外面所以又称细胞膜。围绕各种细胞器的膜，称为细胞内膜。 质膜和内膜在起源、结构和化学组成的等方面具有相似性，故总称为生物膜（biomembrane）。生物膜是细胞进行生命活动的重要物质基础。 质膜表面寡糖链形成细胞外被（ cell coat ） 或糖萼（glycocalyx）。 质膜下的表层溶胶中具有细胞骨架成分组成的网络结构，除对质膜有支持作用外，还 ...

多聚集链反应（polymerasechainreactionPCR）技术发明至今已近20年了，在这期间技术得到了不断的发展，近年来出现的实时荧光定量PCR（real-timequantitativePCR）技术实现了PCR从定性到定量的飞跃，它以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点成为了分子生物学研究中的重要工具，本文就此技术及其应用做一综述。 1 实时荧光定量PCR ...

PCR除了是一个诊断工具外，更重要的是它有广泛的运用。PCR本身可直接用来鉴定特定基因的存在与否，也可以用来侦测基因是否有异常 (Gene mutation deletion and rearrangement…)。例如，在医学上对遗传疾病或肿瘤癌症的诊断及预后的评估； 对细菌、病毒及霉菌感染的诊断。它也可成为一个生产线进而大量复制特定的基因进行基因密码的读取 (DNA sequen ...

所谓生物芯片（Biochip）即应用于生命科学和医学领域中作用类似于电子芯片的器件。它可以对生物分子进行快速并行处理，把生命科学中许多不连续的过程如样品制备、化学反应和结果检测等步骤移植到芯片上并使其连续化和微型化。其突出特点是信息量大，处理速度快。正是由于这些特点，使得生物芯片有着非常广阔的应用前景。它的应用范围涉及生命科学基础研究、疾病诊断和治疗、药物筛选和新药开发、食品卫生监督、司法鉴定、国 ...

1、在骨肿瘤发病机理研究中的应用 骨恶性肿瘤是多种癌基因多阶段多途径协同作用的结果，到目前为止，发现与骨恶性肿瘤密切相关的癌基因有K-ras、c-fos、proα-1、proα-2、c-sis、c-raf、 c-myc、met、mdm2，抗癌基因有Rb、P53、P16等。发现的癌基因已有100多个，抗癌基 因有8个，它们当中究竟还有哪些与骨恶性肿瘤发生发展有关，仍有待于进一 ...

骨肿瘤诊断需要解剖学、组织学和胚胎学等基础知识，对病变需认真观察，仔细分析，但更重要的是对临床资料及X线所见要特别重视。骨肿瘤形态变异较大，而临床X线观察较全面，病理镜检有一定局限性，而一些癌基因改变是与某一型骨肿瘤密切 相关，即为肿瘤特异性基因，因此在骨肿瘤诊断方面在坚持临床、X线及病理三结合 的诊断原则基础上，通过PCR技术对肿瘤特异性癌基因变化的检测，可以更好地辅助骨肿瘤的诊断，具有其它方法 ...

步骤一：接种 组织培养的接种是指将灭过菌的材料，在无菌的情况下，切成小块，放入培养基的过程。科研、生产部门的接种工作，多在无菌室或超净工作台上进行，中学可制作接种箱，在箱内进行接种。接种的方法步骤如下： ①在无菌室或接种箱中放好接种时所需要的酒精灯、贮存70%酒精和棉球的广口瓶、各种镊子、接种针、解剖刀、手术剪、火柴、培养基等。 ②在无菌室或接种箱内用紫外灯灭菌（无菌室照射20～50分钟，接种箱照 ...

细胞是一切生命活动的基本结构和功能单位。 1、细胞是由膜包围的原生质团，通过质膜与周围环境进行物质和信息交流； 2、是构成有机体的基本单位，具有自我复制的能力，是有机体生长发育的基础； 3、是代谢与功能的基本单位，具有完整的代谢和调节体系，不同的细胞执行不同的功能； 4、是遗传的基本单位，具有发育的全能性。 第一节真核细胞 一、基本结构 具有核膜，由膜围成的各种细胞器，如核膜、内质网、高尔基体、线 ...